| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 插图和附表清单 | 第12-14页 |
| 文献综述 | 第14-26页 |
| ·木聚糖酶 | 第14-15页 |
| ·木聚糖酶的作用机制 | 第15-17页 |
| ·保持异头构型的两步置换反应 | 第15-16页 |
| ·倒位异头构型的一步置换反应 | 第16-17页 |
| ·产木聚糖酶的极端微生物 | 第17页 |
| ·各种极端微生物木聚糖酶的研究概况 | 第17-20页 |
| ·嗜热微生物的木聚糖酶 | 第17-18页 |
| ·嗜冷微生物的木聚糖酶 | 第18-19页 |
| ·嗜碱微生物的木聚糖酶 | 第19页 |
| ·嗜酸微生物的木聚糖酶 | 第19-20页 |
| ·嗜盐微生物的木聚糖酶 | 第20页 |
| ·嗜极性微生物木聚糖酶的应用 | 第20-23页 |
| ·木聚糖酶在造纸业中的应用 | 第21页 |
| ·木聚糖酶在食品中的应用 | 第21-22页 |
| ·木聚糖酶在饲料应用 | 第22页 |
| ·木聚糖酶在能源转化方面的应用 | 第22页 |
| ·在其它方面的应用 | 第22-23页 |
| ·木聚糖酶基因克隆与表达的研究概况 | 第23页 |
| ·木聚糖酶的研究方法及热点 | 第23-24页 |
| ·高温木聚糖酶的研究意义 | 第24-26页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 第一部分 T.halotolerans木聚糖酶基因扩增方法的探索以及信息学分析 | 第27-57页 |
| 第一章 T.halotolerans YIM 90462~T木聚糖酶基因扩增方法的探索 | 第28-48页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·菌种和质粒 | 第28页 |
| ·实验用培养基 | 第28页 |
| ·T.halotolerans YIM 90462~T木聚糖酶基因扩增准备工作 | 第28-29页 |
| ·T.halotolerans YIM 90462~T的培养 | 第28-29页 |
| ·T.halotolerans YIM 90462~T基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·木聚糖酶基因的扩增方法探索 | 第29-46页 |
| ·保守序列扩增 | 第29-35页 |
| ·设计木聚糖酶N-和C-端的简并引物 | 第35-36页 |
| ·TaKaRa LA PCRTM in vitro Cloning Kit | 第36-37页 |
| ·反向PCR技术 | 第37-40页 |
| ·基于染色体基因定位的染色体步移的PCR技术 | 第40-42页 |
| ·Site Finding-PCR方法 | 第42-45页 |
| ·基因序列的拼接 | 第45-46页 |
| ·总结与讨论 | 第46-48页 |
| 第二章 T.halotolerans YIM 90462~T木聚糖酶基因信息学分析 | 第48-57页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶全基因序列分析 | 第48-55页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶基因序列 | 第48-49页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶基因保守区分析 | 第49-50页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶的分子量和等电点预测 | 第50页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶信号肽的预测 | 第50-51页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶二级结构的分析 | 第51-53页 |
| ·Xyn11-1木聚糖酶同源模建 | 第53页 |
| ·序列比对和系统进化分析 | 第53-55页 |
| ·实验结果与讨论 | 第55-57页 |
| 第二部分 T.halotolerans Xyn11-1木聚糖酶基因克隆与表达 | 第57-78页 |
| 第三章 T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1木聚糖酶原核表达体系的构建 | 第58-64页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·质粒和宿主 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-62页 |
| ·引物设计与合成 | 第58页 |
| ·T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1基因的PCR扩增 | 第58-60页 |
| ·原核表达体系(Xyn11-1-pET28a/BL21)的构建 | 第60-62页 |
| ·实验结果与讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 重组T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1木聚糖酶的表达以纯化 | 第64-68页 |
| ·刚果红初步检测 | 第64-65页 |
| ·重组T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1木聚糖酶诱导表达 | 第65页 |
| ·重组T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1木聚糖酶的纯化 | 第65页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第65-66页 |
| ·实验结果与讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 重组T.halotolerans YIM 90462~T Xyn11-1木聚糖酶的酶学性质研究 | 第68-78页 |
| ·木聚糖酶的测定方法 | 第68-70页 |
| ·木聚糖酶活力的测定 | 第68-69页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第69-70页 |
| ·木聚糖酶性质研究 | 第70-74页 |
| ·最适温度测定 | 第70-71页 |
| ·最适催化pH测定 | 第71-72页 |
| ·金属离子的耐受性 | 第72-73页 |
| ·抑制剂对酶活力的影响 | 第73-74页 |
| ·相对分子质量的测定 | 第74页 |
| ·实验结果与讨论 | 第74-78页 |
| 总结 | 第78-80页 |
| 展望 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第88-89页 |
| 附录B 主要溶液的配制方法 | 第89-91页 |
| 附录C 主要试剂、酶制剂和试剂盒 | 第91-92页 |
| 附录D 主要仪器和设备 | 第92页 |
