| 独创声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 胰蛋白酶研究进展 | 第13-32页 |
| 1. 胰蛋白酶的分布、结构、酶原活化及其基因 | 第13-19页 |
| ·胰蛋白酶的分布 | 第13-14页 |
| ·结构 | 第14-15页 |
| ·酶原活化 | 第15-16页 |
| ·胰蛋白酶基因的研究 | 第16-19页 |
| ·真菌 | 第16页 |
| ·脊椎动物 | 第16-17页 |
| ·昆虫纲 | 第17-18页 |
| ·甲壳动物 | 第18-19页 |
| 2 胰蛋白酶性质及动力学研究 | 第19-22页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶组成 | 第19-21页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶动力学研究 | 第21页 |
| ·温度、pH 值对甲壳动物胰蛋白酶活性的影响 | 第21页 |
| ·激活剂、抑制剂对甲壳动物胰蛋白酶活性的影响 | 第21-22页 |
| 3 甲壳动物胰蛋白酶消化生理 | 第22-26页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶比活力变化的内部因素 | 第22-24页 |
| ·甲壳动物不同发育阶段胰蛋白酶活力变化的外部因素 | 第24-26页 |
| ·共生菌的影响 | 第24页 |
| ·饵料对甲壳动物胰蛋白酶活力的影响 | 第24-25页 |
| ·昼夜节律、季节对甲壳动物胰蛋白酶活力的影响 | 第25-26页 |
| 4 胰蛋白酶应用价值 | 第26-30页 |
| ·胰蛋白酶在医药方面的应用 | 第26-27页 |
| ·胰蛋白酶在轻工业方面的应用 | 第27-28页 |
| ·胰蛋白酶及其基因的科研价值 | 第28-30页 |
| ·胰蛋白酶作为蛋白质工程模型 | 第28-29页 |
| ·胰蛋白酶固定化技术及其应用 | 第29页 |
| ·胰蛋白酶作为科研工作的工具酶 | 第29-30页 |
| ·胰蛋白酶基因的研究价值 | 第30页 |
| 5 研究目的与意义 | 第30-32页 |
| 第二章 太平洋磷虾胰蛋白酶样酶的分离纯化 | 第32-46页 |
| 1 实验用品 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32-33页 |
| ·实验药品 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-38页 |
| ·蛋白含量测定 | 第33-34页 |
| ·蛋白质浓度为0.1～1.0mg/ml | 第33-34页 |
| ·蛋白质浓度为0.01～0.10mg/ml | 第34页 |
| ·蛋白质浓度为含1.25～10.00μg/ml | 第34页 |
| ·酶比活力测定方法 | 第34-35页 |
| ·胰蛋白酶样酶分离纯化路线 | 第35页 |
| ·粗酶液的制备 | 第35页 |
| ·胰蛋白酶样酶分离纯化路线一 | 第35-36页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第35-36页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换柱层析 | 第36页 |
| ·Sephacryl 5200 凝胶过滤柱层析 | 第36页 |
| ·胰蛋白酶样酶分离纯化路线二 | 第36-38页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第36-37页 |
| ·Benzamidine-Sepharose48 亲和层析 | 第37-38页 |
| ·环氧氯丙烷活化 | 第37页 |
| ·引入间隔臂 | 第37页 |
| ·偶联配基 | 第37页 |
| ·层析 | 第37页 |
| ·绘制层析曲线，计算活性回收率、纯化倍数及收获率 | 第37-38页 |
| ·SDS-PAGE | 第38页 |
| 3 实验结果及讨论 | 第38-45页 |
| ·胰蛋白酶样酶分离纯化路线一 | 第38-41页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第38-39页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换柱层析 | 第39-40页 |
| ·Sephacryl 5200 凝胶过滤柱层析 | 第40-41页 |
| ·胰蛋白酶样酶分离纯化路线二 | 第41-43页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第41-42页 |
| ·Benzamidine-Sepharose48 亲和层析 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE | 第43-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 太平洋磷虾胰蛋白酶样酶的性质及动力学研究 | 第46-70页 |
| 1 实验用品 | 第46-48页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·实验药品 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-55页 |
| ·酶催化 BApNA 水解反应的动力学 | 第48页 |
| ·几种抑制剂对酶反应速率的影响 | 第48-49页 |
| ·Benzamidine 对酶的抑制动力学 | 第49-50页 |
| ·不同金属离子对酶反应速率的影响 | 第50页 |
| ·几种有机溶剂对酶反应速率的影响 | 第50-51页 |
| ·温度对酶的稳定性的影响 | 第51页 |
| ·温度对酶反应速率的影响 | 第51-52页 |
| ·pH 对酶反应速率的影响 | 第52页 |
| ·胰蛋白酶样酶活性功能基团的研究 | 第52-55页 |
| ·巯基与酶活性的关系 | 第52-53页 |
| ·色氨酸残基与酶活性的关系 | 第53页 |
| ·组氨酸残基与酶活性的关系 | 第53-54页 |
| ·氨基与酶活性的关系 | 第54页 |
| ·羧基与酶活性的关系 | 第54-55页 |
| ·精氨酸残基与酶活性的关系 | 第55页 |
| 3 结果与讨论 | 第55-69页 |
| ·酶催化 BApNA 水解反应的动力学 | 第56页 |
| ·几种抑制剂对酶反应速率的影响 | 第56-57页 |
| ·Benzamidine 对酶的抑制动力学 | 第57-58页 |
| ·不同金属离子对酶活力的影响 | 第58-59页 |
| ·几种有机溶剂对酶反应速率的影响 | 第59-61页 |
| ·温度对酶的稳定性的影响 | 第61-62页 |
| ·温度对酶反应速率的影响 | 第62-63页 |
| ·pH 对酶反应速率的影响 | 第63-64页 |
| ·胰蛋白酶样酶活性功能基团的研究 | 第64-69页 |
| ·巯基与酶活性的关系 | 第64页 |
| ·色氨酸残基与酶活性的关系 | 第64-65页 |
| ·组氨酸残基与酶活性的关系 | 第65-66页 |
| ·氨基与酶活性的关系 | 第66-67页 |
| ·羧基与酶活性的关系 | 第67-68页 |
| ·精氨酸残基与酶活性的关系 | 第68-69页 |
| 4 小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
