| 第一章 前言 | 第1-17页 |
| ·野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)概况 | 第9-10页 |
| ·黄单胞菌的形态和特征 | 第9页 |
| ·黄单胞菌引起的主要病害及其致病机制 | 第9页 |
| ·黄单胞菌的应用 | 第9-10页 |
| ·野油菜黄单胞菌致病机理的分子遗传学研究概况 | 第10-12页 |
| ·hrp基因簇与Hrp TTSS分泌系统装置 | 第10-11页 |
| ·多糖 | 第11页 |
| ·胞外酶 | 第11-12页 |
| ·依赖于Ⅲ型分泌系统(TTSS)的效应物 | 第12页 |
| ·锌吸收调控蛋白研究进展 | 第12-16页 |
| ·原核生物锌离子代谢概述 | 第12-14页 |
| ·锌吸收调控蛋白(Zur)简介 | 第14-15页 |
| ·Zur调控机理研究进展 | 第15-16页 |
| ·野油菜黄单胞菌中锌吸收调控蛋白的初步鉴定 | 第16页 |
| ·本工作的目的与内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-41页 |
| ·材料 | 第17-24页 |
| ·本实验所用的菌株和质粒见表 | 第17-18页 |
| ·培养基及生长 | 第18-19页 |
| ·抗生素及其贮存、使用浓度 | 第19页 |
| ·溶液与缓冲液 | 第19-24页 |
| ·方法 | 第24-41页 |
| ·Xcc 8004 Zur23个保守氨基酸位点的突变设计 | 第24-25页 |
| ·常规PCR反应 | 第25-26页 |
| ·重组PCR反应 | 第26-32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第32页 |
| ·质粒的提取 | 第32页 |
| ·总DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·限制性内切酶酶切 | 第33页 |
| ·DNA连接 | 第33页 |
| ·电脉冲感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·转化 | 第34页 |
| ·三亲本接合 | 第34页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第34-35页 |
| ·植株的致病性试验 | 第35页 |
| ·锌敏感性实验 | 第35页 |
| ·Zur蛋白、点突变ZurM蛋白的表达纯化 | 第35-36页 |
| ·蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第36-37页 |
| ·DNA电泳迁移率变动试验(electrophoresis mobility shift assay，EMSA) | 第37-38页 |
| ·非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·Dnase Ⅰ足迹试验 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-66页 |
| ·Xcc Zur蛋白能与它所调控基因的启动子特异性结合 | 第41-49页 |
| ·Xcc XC0376、XC2386、XC3668的启动子区中存在与E.coli Zur-box相似的DNA序列 | 第41-43页 |
| ·启动子的扩增 | 第43页 |
| ·Xcc Zur表达、纯化 | 第43-45页 |
| ·Zur与启动子的结合分析 | 第45-47页 |
| ·DNA足迹试验确定XC3668启动子上存在Zur特异性结合保护位点 | 第47-49页 |
| ·Xcc Zur在锌离子吸收调控、EPS产生和致病性上的作用在结构上是分离的 | 第49-62页 |
| ·Xcc Zur蛋白中存在23个高度保守的氨基酸位点 | 第49页 |
| ·Xcc Zur点突变体的构建 | 第49-54页 |
| ·Xcc Zur点突变体锌敏感性试验 | 第54-57页 |
| ·Xcc Zur点突变体致病性试验 | 第57-58页 |
| ·Xcc Zur点突变体EPS产量检测 | 第58-60页 |
| ·Xcc Zur在锌离子吸收调控、EPS产生和致病性上的作用在结构上是分离的 | 第60-62页 |
| ·Xcc Zur第126、129号半胱氨酸是Zur与其目标启动子结合所必需的。 | 第62-66页 |
| ·Xcc Zur表达、纯化 | 第63-64页 |
| ·Xcc Zur第126、129号半胱氨酸是Zur与其目标启动子结合所必需 | 第64-66页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第66-69页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·关于Xcc Zur的调控机制 | 第66-67页 |
| ·关于Xcc Zur23个高度保守氨基酸突变所用的点突变方法 | 第67页 |
| ·关于Xcc Zur蛋白23个高度保守氨基酸在锌离子吸收、EPS产生和致病性中的作用 | 第67-68页 |
| ·关于Xcc Zur蛋白第126、129号半胱氨酸在该蛋白发挥调控功能中可能的作用 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 研究生阶段论文发表情况 | 第76页 |
