| 摘要 | 第1-7页 |
| 1 文献综述 | 第7-17页 |
| 1．1 酵母抗逆的分子调控机制 | 第7页 |
| 1．2 海藻糖的抗逆作用 | 第7-10页 |
| 1．2．1 海藻糖对酿酒酵母处于高渗条件下存活所起的作用 | 第7-9页 |
| 1．2．2 海藻糖在酵母遭受热冲击时的保护作用 | 第9-10页 |
| 1．2．3 海藻糖与醉母耐酒精能力的关系 | 第10页 |
| 1．3 海藻糖生物合成途径及其相关基因 | 第10-12页 |
| 1．3．1 UDPG途径 | 第10-11页 |
| 1．3．2 麦芽糊精途径 | 第11-12页 |
| 1．3．3 麦芽糖途径 | 第12页 |
| 1．3．4 其它途径 | 第12页 |
| 1．4 海藻糖的分解代谢调控与抗逆的关系 | 第12-13页 |
| 1．5 tps1基因的调控表达机制 | 第13-14页 |
| 1．6 海藻糖抗逆境的作用机理 | 第14-15页 |
| 1．6．1 “水替代”假说 | 第14-15页 |
| 1．6．2 “玻璃态”假说 | 第15页 |
| 1．6．3 优先排阻说 | 第15页 |
| 1．6．4 海藻糖与其它分子的协同作用 | 第15页 |
| 1．7 当前的研究状况 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 实验材料与方法 | 第18-26页 |
| 3．1 试验材料与仪器 | 第18-21页 |
| 3．1．1 菌种 | 第18页 |
| 3．1．2 试剂 | 第18-19页 |
| 3．1．3 培养基 | 第19页 |
| 3．1．4 溶液配制 | 第19-21页 |
| 3．1．5 酶与标准分子量 | 第21页 |
| 3．1．6 试验仪器 | 第21页 |
| 3．2 试验方法 | 第21-26页 |
| 3．2．1 基因克隆 | 第21-22页 |
| 3．2．1．1 总DNA提取方法 | 第21页 |
| 3．2．1．2．PCR产物回收 | 第21-22页 |
| 3．2．1．3．质粒的抽提 | 第22页 |
| 3．2．1．4．载体的构建 | 第22页 |
| 3．2．1．5 感受态细胞的制备及转化 | 第22页 |
| 3．2．1．6 重组质粒蓝白斑筛选阳性转化子 | 第22页 |
| 3．2．1．7 阳性克隆的检出及验证 | 第22页 |
| 3．2．1．8 酶切、酶连以及其它的基因操作技术 | 第22页 |
| 3．2．2 探针标记 | 第22-24页 |
| 3．2．2．1 制备模板 | 第22页 |
| 3．2．2．2 标记探针 | 第22-24页 |
| 3．2．3 Dot bloting | 第24-26页 |
| 3．2．3．1 样品的处理 | 第24页 |
| 3．2．3．2 总RNA的抽提以及点膜 | 第24页 |
| 3．2．3．3 Dot Bloting | 第24页 |
| 3．2．3．4 光检测 | 第24-26页 |
| 4：结果及分析 | 第26-34页 |
| 4．1 基因克隆及序列分析 | 第26-30页 |
| 4．1．1 酵母基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 4．1．2 PCR的设计 | 第26页 |
| 4．1．3 质粒和目的片断的酶切 | 第26-27页 |
| 4．1．4 酶切后片断的酶连 | 第27页 |
| 4．1．5 目的菌株的筛选 | 第27-29页 |
| 4．1．6 tps1基因测序及序列比对 | 第29页 |
| 4．1．7 TPS1蛋白序列的比对及分析 | 第29-30页 |
| 4．2 Dot Bloting | 第30-34页 |
| 4．2．1 热激Dot Bloting结果 | 第32-33页 |
| 4．2．2 NaCL处理后Dot Bloting结果 | 第33-34页 |
| 5 讨论与分析 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 英文摘要 | 第43-44页 |
| 附表1 | 第44-48页 |
| 附表2 | 第48-49页 |