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共表达猪生长抑素基因和PRRS病毒GPS基因的质粒DNA的动物免疫试验研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
1 引言第10-24页
   ·生长抑素与动物生长第10-12页
     ·生长抑素的分子结构第10-11页
     ·生长抑素影响动物生长的机理第11页
     ·生长抑素主动免疫促进动物生长第11-12页
   ·猪繁殖与呼吸综合征的免疫与预防第12-18页
     ·PRRSV 基因组结构及其编码的蛋白第12-13页
     ·PRRSV 感染与体液免疫第13-14页
     ·PRRSV 感染与细胞免疫第14页
     ·PRRSV 感染与细胞因子的产生第14-15页
     ·PRRS 灭活疫苗的研究第15页
     ·PRRS 弱毒疫苗的研究第15-16页
     ·PRRS 基因工程疫苗的研究第16-18页
     ·PRRS疫苗免疫佐剂的研究第18页
   ·抗病毒 DNA 疫苗的研究进展第18-23页
     ·DNA 疫苗诱导免疫应答的机制第19页
     ·DNA 疫苗的接种方法和途径第19-21页
     ·DNA 疫苗的细胞因子佐剂第21-22页
     ·抗原靶向 APC 的嵌合 DNA 疫苗第22-23页
   ·研究的目的及意义第23-24页
2 材料与方法第24-34页
   ·实验动物及饲养第24页
   ·质粒和受体菌第24页
   ·主要试剂第24页
   ·主要溶液的配制第24-25页
   ·主要仪器设备第25-26页
   ·引物第26页
   ·猪外周血单个核细胞的分离第26页
   ·猪外周血单个核细胞基因组 DNA 的提取第26页
   ·生长抑素基因的扩增第26-27页
   ·生长抑素基因的克隆第27-28页
     ·PCR 产物的回收第27页
     ·PCR 产物的连接第27-28页
     ·感受态细胞制备第28页
     ·转化第28页
   ·阳性重组子的筛选与鉴定第28-29页
     ·裂解法提取质粒 DNA第28-29页
     ·重组子酶切及 PCR 鉴定第29页
   ·融合表达 SS 与 GP5 真核表达载体的构建第29-31页
   ·质粒 DNA 的大量制备第31页
   ·BALB/c 小鼠的免疫程序第31页
   ·猪的免疫程序第31-32页
   ·ELISA 检测免疫动物血清中抗 GP5 抗体第32页
   ·Western blot 检测免疫动物血清中抗 GP5 抗体第32-33页
   ·统计分析第33-34页
3 结果第34-40页
   ·猪生长抑素基因的扩增第34页
   ·重组质粒pMD-SS 的鉴定第34页
   ·重组质粒pISG-GP5 的鉴定第34-36页
   ·重组质粒pISG-SS/GP5 的鉴定第36-37页
   ·免疫小鼠血清中抗 GP5 抗体检测第37-38页
   ·免疫猪血清中抗 GP5 抗体检测第38-39页
   ·猪的体重变化及统计学分析第39-40页
4 讨论第40-43页
   ·DNA 疫苗的接种方法第40页
   ·动物年龄对 DNA 疫苗免疫应答的影响第40页
   ·重组疫苗诱导的 GP5 抗体与免疫保护第40-41页
   ·基因免疫的促生长作用第41页
   ·生长抑素融合蛋白免疫的促生长作用第41-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-53页
附录第53-55页
攻读硕士期间发表的论文第55页

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