| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-21页 |
| 第二章 质粒DNA的扩增和提取纯化 | 第21-31页 |
| 1． 仪器与试药 | 第22-24页 |
| 2． 实验方法 | 第24-27页 |
| 2．1 质粒DNA的扩增 | 第24-25页 |
| 2．2 质粒DNA的提取和纯化 | 第25-26页 |
| 2．3 质粒DNA的产量 | 第26页 |
| 2．4 质粒DNA的纯度分析 | 第26-27页 |
| 3． 讨论 | 第27-31页 |
| 第三章 脂质-聚阳离子-DNA复合物制备工艺的研究 | 第31-63页 |
| 第一节 DNA含量测定方法的建立 | 第32-36页 |
| 1． 仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 2． 方法与结果 | 第33-35页 |
| 2．1 Hoechst 33258溶液的配制 | 第33页 |
| 2．2 荧光扫描 | 第33-34页 |
| 2．3 狭缝选择 | 第34页 |
| 2．4 标准曲线的绘制 | 第34页 |
| 2．5 LPD的回收率实验 | 第34页 |
| 2．6 LPD的重现性试验 | 第34-35页 |
| 3． 讨论 | 第35-36页 |
| 第二节 阳离子LPD的制备及其理化性质 | 第36-45页 |
| 1． 仪器与试剂 | 第36-37页 |
| 2． 实验方法 | 第37-40页 |
| 2．1 阳离子型LPD的制备 | 第37-38页 |
| 2．2 阳离子型LPD的理化性质 | 第38-40页 |
| 3． 实验结果 | 第40-43页 |
| 3．1 聚阳离子-DNA复合物的形成 | 第40-41页 |
| 3．2 LPD的形态粒径和Zeta电位 | 第41页 |
| 3．3 LPD的形态 | 第41-42页 |
| 3．4 LPD的包封率 | 第42页 |
| 3．5 LPD的抗核酸酶能力 | 第42-43页 |
| 4． 讨论 | 第43-45页 |
| 第三节 中心组合设计优化LPD的处方 | 第45-63页 |
| 1． 仪器于试剂 | 第46-47页 |
| 2． 实验方法 | 第47-49页 |
| 2．1 阴离子型LPD的制备 | 第47页 |
| 2．2 LPD的粒径和Zeta电位的测定 | 第47页 |
| 2．3 LPD的抗核酸酶能力的定量评价 | 第47-48页 |
| 2．4 确定实验范围 | 第48页 |
| 2．5 中心组合设计 | 第48-49页 |
| 2．6 数据处理 | 第49页 |
| 3． 结果和讨论 | 第49-63页 |
| 3．1 因素水平范围的确定 | 第49-51页 |
| 3．2 中心组合设计的试验结果 | 第51-54页 |
| 3．3 处方成分对LPD粒径的影响 | 第54-56页 |
| 3．4 处方成分对LPD抗核酸酶能力的影响 | 第56-58页 |
| 3．5 LPD的处方优化 | 第58-63页 |
| 第四章 脂质-聚阳离子-DNA复合物的体外细胞学实验 | 第63-79页 |
| 1． 仪器与试药 | 第63-65页 |
| 2． 实验方法 | 第65-69页 |
| 2．1 细胞复苏 | 第65页 |
| 2．2 细胞传代 | 第65-66页 |
| 2．3 细胞转染 | 第66页 |
| 2．4 转染率的测定 | 第66-68页 |
| 2．5 X-Gal染色 | 第68页 |
| 2．6 目的基因IL-12的检测 | 第68-69页 |
| 3． 实验结果 | 第69-74页 |
| 3．1 处方优化 | 第69-70页 |
| 3．2 转染率的比较 | 第70-74页 |
| 3．3 目的蛋白的表达 | 第74页 |
| 4． 讨论 | 第74-79页 |
| 第五章 阳离子LPD冻干针剂的研究 | 第79-91页 |
| 1． 仪器与试剂 | 第79-80页 |
| 2． 方法与结果 | 第80-88页 |
| 2．1 LPD冻干针剂处方与工艺研究 | 第80-84页 |
| 2．2 LPD冻干针剂质量评价 | 第84-88页 |
| 3． 结论与讨论 | 第88-91页 |
| 3．1 冻干后的LPD的基本特征 | 第88-89页 |
| 3．2 冻干保护剂的作用 | 第89页 |
| 3．3 冻干LPD针剂中DNA的完整性和抗核酸酶能力 | 第89-91页 |
| 第六章 阳离子LPD冻干针剂在小鼠体内的靶向性和药效学初步研究 | 第91-113页 |
| 第一节 阳离子LPD冻干针剂在小鼠体内靶向性的初步研究 | 第91-97页 |
| 1． 仪器与试药 | 第91-92页 |
| 2． 实验方法 | 第92-94页 |
| 2．1 给药 | 第93页 |
| 2．2 取材 | 第93页 |
| 2．3 固定和包埋 | 第93页 |
| 2．4 冰冻切片 | 第93页 |
| 2．S X-Gal染色 | 第93页 |
| 2．6 复染和封片 | 第93-94页 |
| 3． 实验结果 | 第94-96页 |
| 4． 讨论 | 第96-97页 |
| 第二节 pORFmIL-12阳离子冻干针剂治疗小鼠肺癌的药效学初步研究 | 第97-105页 |
| 1． 仪器与试药 | 第98-99页 |
| 2． 实验方法 | 第99-100页 |
| 2．1 荷瘤动物模型建立 | 第99页 |
| 2．2 给药 | 第99页 |
| 2．3 肿瘤大小测定与生存期计算 | 第99-100页 |
| 2．4 血清和组织样品的收集和检测 | 第100页 |
| 3． 实验结果 | 第100-104页 |
| 3．1 受试品对小鼠肿瘤生长的影响 | 第100-101页 |
| 3．2 荷瘤小鼠的生存期 | 第101-102页 |
| 3．3 肿瘤中mIL-12浓度 | 第102-103页 |
| 3．4 血清中mIL-12浓度 | 第103-104页 |
| 3．5 肺中mIL-12浓度 | 第104页 |
| 4． 讨论 | 第104-105页 |
| 第三节 阳离子LPD(pORFmIL-12)冻干针剂抑瘤机制研究 | 第105-113页 |
| 1． 仪器与试药 | 第106-107页 |
| 2． 实验方法 | 第107页 |
| 2．1 动物模型的建立和分组给药 | 第107页 |
| 2．2 NK、CTL效应细胞制备 | 第107页 |
| 2．3 NK、CTL靶细胞制备污~(51)Cr4小时释放试验 | 第107页 |
| 2．4 结果计算 | 第107页 |
| 3． 实验结果 | 第107-109页 |
| 3．1 NK细胞杀伤活性 | 第107-108页 |
| 3．2 特异性CTL杀伤活性 | 第108-109页 |
| 4． 讨论 | 第109-113页 |
| 第七章 肝细胞靶向脂质-聚阳离子-DNA复合物的研究 | 第113-134页 |
| 第一节 胆固醇半乳糖衍生物的合成 | 第114-123页 |
| 1． 仪器与试药 | 第114页 |
| 2． 合成路线 | 第114-116页 |
| 3． 合成方法 | 第116-123页 |
| 第二节 半乳糖化的质粒脂质纳米粒的肝细胞靶向性研究 | 第123-134页 |
| 1． 仪器与试药 | 第123-125页 |
| 2． 实验方法 | 第125-126页 |
| 2．1 Gal-LPD的制备 | 第125页 |
| 2．2 Gal-LPD的细胞转染试验 | 第125页 |
| 2．3 Gal-LPD的细胞毒性试验 | 第125-126页 |
| 3． 结果与讨论 | 第126-131页 |
| 3．1 配体分子结构对Gal-LPD转染率的影响 | 第126-128页 |
| 3．2 带不同电荷的Gal-LPD的转染率比较 | 第128-129页 |
| 3．3 转染后不同的孵育时间对转染率的影响 | 第129-130页 |
| 3．4 不同的转染剂量对转染率的影响 | 第130页 |
| 3．5 细胞毒性实验 | 第130-131页 |
| 4． 小结 | 第131-134页 |
| 结论 | 第134-136页 |
| 综述 肿瘤基因治疗的载体系统 | 第136-154页 |
| 1． 病毒载体系统 | 第137-141页 |
| 2． 非病毒载体系统 | 第141-148页 |
| 3． 结语 | 第148-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 作者简介 | 第155-158页 |
| 声明 | 第158页 |
