| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| ·EST技术概述 | 第13-14页 |
| ·EST研究的主要步骤 | 第14-18页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第15页 |
| ·cDNA文库中阳性克隆的单向测序 | 第15页 |
| ·EST数据的分析处理 | 第15-18页 |
| ·EST的主要应用 | 第18-22页 |
| ·作为遗传标记 | 第18页 |
| ·用于新基因的发现 | 第18-20页 |
| ·基因表达谱分析 | 第20-21页 |
| ·作为外显子标签用于基因组诠释 | 第21页 |
| ·用于制备cDNA微阵列 | 第21页 |
| ·研究基因表达的动态性 | 第21-22页 |
| ·基因电子克隆(in silico cloning) | 第22页 |
| ·EST研究的局限性 | 第22页 |
| ·芸薹属作物的EST研究进展 | 第22-23页 |
| ·转录本等比例扩增技术概述 | 第23-27页 |
| ·体外转录(IVT in vitro transcription)方法 | 第23-24页 |
| ·全面RT-PCR扩增方法 | 第24-27页 |
| ·几种方法的比较与展望 | 第27页 |
| ·结球白菜结球机理研究进展 | 第27-28页 |
| ·本课题实验设计及研究目的 | 第28-30页 |
| 第二章 结球白菜结球前期叶片表达序列标签(EST)的获取与分析 | 第30-44页 |
| ·材料与方法 | 第30-34页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·EST序列的获得 | 第31-34页 |
| ·EST序列数据的分析处理 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-38页 |
| ·质粒提取结果 | 第34-35页 |
| ·质粒测序结果 | 第35页 |
| ·EST数据的前处理 | 第35-36页 |
| ·片段重叠群(contig)分析 | 第36页 |
| ·EST序列同源性比较分析及其推测编码产物的功能分类 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-44页 |
| ·质粒提取部分 | 第38-39页 |
| ·质粒序列测定部分 | 第39-40页 |
| ·EST序列数据分析处理部分 | 第40-44页 |
| 第三章 结球白菜结球前期叶片的基因表达分析 | 第44-71页 |
| ·材料与方法 | 第44-55页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·TE-3D法提取叶片总RNA和DNA | 第44-45页 |
| ·利用全面扩增技术(PloyAPCR)扩增cDNA | 第45-47页 |
| ·cDNA arrays的构建 | 第47-49页 |
| ·cDNA arrays的杂交 | 第49-50页 |
| ·Northern杂交 | 第50-51页 |
| ·基因组Southern杂交 | 第51-52页 |
| ·快速扩增cDNA末端(RACE) | 第52-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-63页 |
| ·cDNA扩增 | 第55-56页 |
| ·cDNA插入片段的扩增 | 第56-57页 |
| ·cDNA arrays的构建和杂交 | 第57页 |
| ·部分候选基因的杂交验证及全长序列的获得 | 第57-63页 |
| ·讨论 | 第63-71页 |
| ·cDNA的全面扩增技术 | 第63页 |
| ·cDNA阵列的制作和杂交 | 第63-64页 |
| ·结球白菜结球期叶片基因表达网络预测 | 第64-71页 |
| 第四章 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 附表与图版 | 第84-124页 |