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小鼠类乳腺干细胞的分离、培养和鉴定

第一部分 文献综述第1-29页
 综述一 干细胞研究与应用第12-20页
  1 胚胎干细胞第12-15页
   ·胚胎干细胞研究现状第12-13页
   ·胚胎干细胞的应用第13-15页
  2 成体干细胞研究现状第15-20页
   ·造血干细胞研究及应用第16-17页
   ·上皮干细胞研究及应用第17页
   ·间充质干细胞研究及应用第17-18页
   ·神经干细胞研究及应用第18-19页
   ·骨骼肌干细胞研究及应用第19-20页
 综述二 类乳腺干细胞研究进展第20-28页
  1 乳腺的发生和发育第20-22页
  2 乳腺的基本结构及其细胞组成第22页
  3 乳腺发育及其细胞分化的调控第22-23页
  4 类乳腺干细胞的种类第23-24页
  5 类乳腺干细胞的分化调控第24-25页
  6 干细胞的潜能和衰老第25页
  7 类乳腺干细胞与乳腺再生的关系第25-26页
  8 类乳腺干细胞的特异性标记物第26-28页
 总结与展望第28-29页
第二部分 实验内容第29-73页
 实验一 小鼠乳腺发育规律及乳腺中的干细胞的研究第29-41页
   ·实验材料和方法第29-34页
     ·实验动物第29页
     ·试剂与仪器第29-30页
     ·乳腺全组织片的制作与观察第30-31页
     ·乳腺组织切片免疫荧光组织化学染色第31-34页
   ·结果第34-36页
     ·乳腺全组织结构第34-35页
     ·乳腺中的干细胞第35-36页
   ·讨论第36-41页
     ·小鼠乳腺发育规律第36-38页
     ·不同发育时期小鼠乳腺中的干细胞第38-41页
 实验二 类乳腺干细胞的分离、培养和鉴定第41-48页
   ·实验材料和方法第41-43页
     ·实验动物第41页
     ·实验试剂第41-42页
     ·实验方法第42-43页
   ·结果第43页
   ·讨论第43-48页
 实验三 小鼠类乳腺干细胞分化潜能的研究第48-60页
   ·实验方法和材料第48-53页
     ·实验动物第48页
     ·注射用细胞的准备第48-49页
     ·去除受体鼠乳腺腺体手术第49页
     ·类乳腺干细胞的诱导泌乳培养第49页
     ·小鼠胎儿成纤维的培养第49页
     ·小鼠奶的采集第49-50页
     ·SDS-PAGE凝胶蛋白电泳第50-51页
     ·Western Blot分析第51页
     ·乳腺全组织片制作第51页
     ·小鼠乳腺的采集第51页
     ·总RNA的提取第51-52页
     ·RT-PCR检测第52-53页
   ·结果第53-56页
     ·移植包含类乳腺干细胞的乳腺细胞再生乳腺的结果第53-54页
     ·移植包含类乳腺干细胞的乳腺细胞再生乳腺的小鼠及乳腺全组织片观察第54-56页
     ·类乳腺干细胞诱导培养7天后β-酪蛋白mRNA表达的检测结果第56页
     ·诱导泌乳系统的检测结果第56页
   ·讨论第56-60页
 实验四 乳腺细胞表达干细胞特异性基因的分析第60-66页
   ·材料和方法第60-62页
     ·实验动物第60页
     ·乳腺分离、细胞培养、FACS分选方法第60页
     ·细胞RNA的提取、RT-PCR、GADPH检测RT-PCR体系的方法第60页
     ·荧光定量PCR(Q-PCR)检测基因的表达第60-61页
     ·实验中所检测基因的引物序列第61-62页
   ·结果第62-63页
     ·类乳腺干细胞、乳腺细胞以及胎儿成纤维细胞的RNA及其RT-PCR琼脂糖凝胶电泳结果第62-63页
     ·Q-PCR结果第63页
   ·讨论第63-66页
 实验五 体外短期培养富集类乳腺干细胞体系的优化第66-73页
   ·实验材料和方法第66-68页
     ·实验动物第66页
     ·乳腺的分离与培养方法第66页
     ·乳腺类腺体短期培养体系第66页
     ·乳腺单个细胞的制备第66-68页
     ·乳腺细胞的免疫反应第68页
   ·结果第68-70页
   ·讨论第70-73页
第三部分 结论与展望第73-74页
参考文献第74-86页
致谢第86-88页
个人简历第88-89页

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