第一部分 文献综述 | 第1-29页 |
综述一 干细胞研究与应用 | 第12-20页 |
1 胚胎干细胞 | 第12-15页 |
·胚胎干细胞研究现状 | 第12-13页 |
·胚胎干细胞的应用 | 第13-15页 |
2 成体干细胞研究现状 | 第15-20页 |
·造血干细胞研究及应用 | 第16-17页 |
·上皮干细胞研究及应用 | 第17页 |
·间充质干细胞研究及应用 | 第17-18页 |
·神经干细胞研究及应用 | 第18-19页 |
·骨骼肌干细胞研究及应用 | 第19-20页 |
综述二 类乳腺干细胞研究进展 | 第20-28页 |
1 乳腺的发生和发育 | 第20-22页 |
2 乳腺的基本结构及其细胞组成 | 第22页 |
3 乳腺发育及其细胞分化的调控 | 第22-23页 |
4 类乳腺干细胞的种类 | 第23-24页 |
5 类乳腺干细胞的分化调控 | 第24-25页 |
6 干细胞的潜能和衰老 | 第25页 |
7 类乳腺干细胞与乳腺再生的关系 | 第25-26页 |
8 类乳腺干细胞的特异性标记物 | 第26-28页 |
总结与展望 | 第28-29页 |
第二部分 实验内容 | 第29-73页 |
实验一 小鼠乳腺发育规律及乳腺中的干细胞的研究 | 第29-41页 |
·实验材料和方法 | 第29-34页 |
·实验动物 | 第29页 |
·试剂与仪器 | 第29-30页 |
·乳腺全组织片的制作与观察 | 第30-31页 |
·乳腺组织切片免疫荧光组织化学染色 | 第31-34页 |
·结果 | 第34-36页 |
·乳腺全组织结构 | 第34-35页 |
·乳腺中的干细胞 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-41页 |
·小鼠乳腺发育规律 | 第36-38页 |
·不同发育时期小鼠乳腺中的干细胞 | 第38-41页 |
实验二 类乳腺干细胞的分离、培养和鉴定 | 第41-48页 |
·实验材料和方法 | 第41-43页 |
·实验动物 | 第41页 |
·实验试剂 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·结果 | 第43页 |
·讨论 | 第43-48页 |
实验三 小鼠类乳腺干细胞分化潜能的研究 | 第48-60页 |
·实验方法和材料 | 第48-53页 |
·实验动物 | 第48页 |
·注射用细胞的准备 | 第48-49页 |
·去除受体鼠乳腺腺体手术 | 第49页 |
·类乳腺干细胞的诱导泌乳培养 | 第49页 |
·小鼠胎儿成纤维的培养 | 第49页 |
·小鼠奶的采集 | 第49-50页 |
·SDS-PAGE凝胶蛋白电泳 | 第50-51页 |
·Western Blot分析 | 第51页 |
·乳腺全组织片制作 | 第51页 |
·小鼠乳腺的采集 | 第51页 |
·总RNA的提取 | 第51-52页 |
·RT-PCR检测 | 第52-53页 |
·结果 | 第53-56页 |
·移植包含类乳腺干细胞的乳腺细胞再生乳腺的结果 | 第53-54页 |
·移植包含类乳腺干细胞的乳腺细胞再生乳腺的小鼠及乳腺全组织片观察 | 第54-56页 |
·类乳腺干细胞诱导培养7天后β-酪蛋白mRNA表达的检测结果 | 第56页 |
·诱导泌乳系统的检测结果 | 第56页 |
·讨论 | 第56-60页 |
实验四 乳腺细胞表达干细胞特异性基因的分析 | 第60-66页 |
·材料和方法 | 第60-62页 |
·实验动物 | 第60页 |
·乳腺分离、细胞培养、FACS分选方法 | 第60页 |
·细胞RNA的提取、RT-PCR、GADPH检测RT-PCR体系的方法 | 第60页 |
·荧光定量PCR(Q-PCR)检测基因的表达 | 第60-61页 |
·实验中所检测基因的引物序列 | 第61-62页 |
·结果 | 第62-63页 |
·类乳腺干细胞、乳腺细胞以及胎儿成纤维细胞的RNA及其RT-PCR琼脂糖凝胶电泳结果 | 第62-63页 |
·Q-PCR结果 | 第63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
实验五 体外短期培养富集类乳腺干细胞体系的优化 | 第66-73页 |
·实验材料和方法 | 第66-68页 |
·实验动物 | 第66页 |
·乳腺的分离与培养方法 | 第66页 |
·乳腺类腺体短期培养体系 | 第66页 |
·乳腺单个细胞的制备 | 第66-68页 |
·乳腺细胞的免疫反应 | 第68页 |
·结果 | 第68-70页 |
·讨论 | 第70-73页 |
第三部分 结论与展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
个人简历 | 第88-89页 |