| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的发现历史 | 第9页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的病原学 | 第9-10页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行病学及其危害 | 第10-11页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的毒力相关因子 | 第11-15页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的诊断方法 | 第15-18页 |
| ·ELISA诊断方法的概述 | 第18-22页 |
| 第2章 目的和意义 | 第22-24页 |
| 第3章 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌种与质粒 | 第24页 |
| ·所用血清 | 第24页 |
| ·主要药品及试剂 | 第24页 |
| ·主要培养基 | 第24页 |
| ·引物 | 第24页 |
| ·酶及试剂盒 | 第24-25页 |
| ·质粒抽提与鉴定试剂 | 第25页 |
| ·Western-blot相关溶液 | 第25页 |
| ·Westrn-blot相关溶液 | 第25-26页 |
| ·ELISA缓冲液 | 第26页 |
| ·试验动物 | 第26页 |
| ·蛋白的表达及纯化 | 第26-30页 |
| ·ApxⅡ蛋白的表达与纯化 | 第26-27页 |
| ·TbpA蛋白的表达与纯化 | 第27-30页 |
| ·ELISA试验条件的确定 | 第30-31页 |
| ·最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定(方阵滴定) | 第30-31页 |
| ·ELISA的操作步骤 | 第31页 |
| ·ELISA阴阳界限的确定 | 第31页 |
| ·ELISA方法的特异性试验 | 第31页 |
| ·ELISA方法的重复性试验 | 第31页 |
| ·ELISA的临床应用与动物试验 | 第31-33页 |
| ·ApxⅡ-ELISA的临床血清调查 | 第31-32页 |
| ·ApxⅡ-ELlSA的临床血清调查 | 第32页 |
| ·IHA的操作步骤 | 第32页 |
| ·ApxⅡ-ELISA、TbpA-ELISA和IHA间的比较 | 第32页 |
| ·统计分析 | 第32页 |
| ·小鼠免疫及免疫后的检测 | 第32-33页 |
| 第4章 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·ApxⅡ-ELISA诊断方法的研制 | 第33-36页 |
| ·ApxⅡ表达条件的优化 | 第33-34页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第34页 |
| ·ELISA结果判定标准的确定 | 第34页 |
| ·ApxⅡ-ELISA特异性和敏感性及重复性试验 | 第34-35页 |
| ·ApxⅡ-ELISA对APP标准阳性兔血清的检测 | 第35页 |
| ·ApxⅡ-ELISA的临床应用 | 第35-36页 |
| ·tbpA基因的克隆及原核表达 | 第36-38页 |
| ·tbpA基因的扩增与克隆 | 第36页 |
| ·阳性重组子序列测定 | 第36页 |
| ·原核表达阳性重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·TbpA基因的原核表达及Western blotting检测 | 第37-38页 |
| ·TbpA-ELISA诊断方法的研究 | 第38-41页 |
| ·抗原包被浓度与血清最佳稀释度的选择 | 第38页 |
| ·ELISA结果判定标准的确定 | 第38页 |
| ·TbpA-ELISA特异性与重复性试验 | 第38页 |
| ·TbpA-ELISA与ApxⅡ-ELISA和IHA间的比较 | 第38-39页 |
| ·小鼠免疫及免疫后的检测 | 第39-41页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·ApxⅡ-ELISA诊断方法的研制 | 第41页 |
| ·TbpA基因的原核表达及其ELISA诊断方法的建立 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 缩略语表 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |