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杉木茎段cDNA文库的构建

致谢第1-3页
中文摘要第3-4页
英文摘要第4-7页
一 文献综述第7-18页
 引言第7页
 1 植物基因组研究进展第7-15页
   ·基因组研究简介第7-11页
     ·结构基因组学研究第8-9页
     ·功能基因组学研究第9-10页
     ·蛋白质组学研究第10-11页
     ·与基因组学相关的其他学科的诞生第11页
   ·植物功能基因组研究方法第11-15页
     ·植物的表达序列标签(EST)和基因组大规模测序第11-12页
     ·植物基因的功能分析第12-15页
       ·基于DNA芯片的基因功能分析第12-13页
       ·基因表达的系统分析(SAGE)第13页
       ·基因产物蛋白质的表达分析第13-14页
       ·利用正向和反向遗传学技术研究植物基因功能第14-15页
 2 建立cDNA文库的原理及应用第15-16页
   ·构建cDNA文库的原理第15页
   ·cDNA文库的特点第15页
   ·cDNA文库的应用第15-16页
     ·筛选与相关性状相关的重要基因第15页
     ·为表达序列标签(EST)的开发提供材料第15-16页
     ·为SSR引物的开发提供平台第16页
     ·结合DNA芯片技术对生物体的基因的时空表达进行研究第16页
 3 杉木cDNA文库构建的意义第16-18页
二 杉木cDNA文库的构建第18-31页
 1 试验材料第18页
 2 试验方法第18-28页
   ·杉木总RNA的提取第18-19页
   ·Poly(A)~+mRNA的分离第19-20页
   ·cDNA文库的构建第20-28页
     ·实验流程第20-21页
     ·实验操作方法第21-23页
     ·cDNA片段大小的过柱筛选第23-25页
     ·连接cDNA于λZAP Express Vector中第25页
     ·准备宿主菌第25-26页
     ·用Gigapack Ⅲ Gold Packing Extract包装连接产物第26页
     ·铺平板和滴度的测定第26-27页
     ·初级cDNA文库的扩增和滴度的测定第27-28页
 3 从λZAP Express vector中剪切PBK-CMV噬菌粒第28页
 4 cDNA插入片段大小的检测第28-31页
   ·用PCR扩增的方法检测cDNA插入片段的大小第28-29页
   ·双酶切检测cDNA插入片段的大小第29-31页
三 结果与分析第31-36页
 1 杉木总RNA的提取结果第31页
 2 Poly(A~+)mRNA的分离结果第31页
 3 cDNA文库的构建结果第31-36页
四 讨论第36-39页
 1 cDNA文库建库材料的选择第36页
 2 杉木RNA的提取第36-37页
 3 影响杉木cDNA文库初级库容量大小的因素第37-39页
五 对下一步研究工作的展望第39-41页
 1 从cDNA文库中开发表达序列标签(EST)第39页
 2 开发SSR引物第39-40页
 3 结合基因表达芯片技术对杉木阶段性表达的基因进行研究第40-41页
参考文献第41-43页

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