致谢 | 第1-3页 |
中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
一 文献综述 | 第7-18页 |
引言 | 第7页 |
1 植物基因组研究进展 | 第7-15页 |
·基因组研究简介 | 第7-11页 |
·结构基因组学研究 | 第8-9页 |
·功能基因组学研究 | 第9-10页 |
·蛋白质组学研究 | 第10-11页 |
·与基因组学相关的其他学科的诞生 | 第11页 |
·植物功能基因组研究方法 | 第11-15页 |
·植物的表达序列标签(EST)和基因组大规模测序 | 第11-12页 |
·植物基因的功能分析 | 第12-15页 |
·基于DNA芯片的基因功能分析 | 第12-13页 |
·基因表达的系统分析(SAGE) | 第13页 |
·基因产物蛋白质的表达分析 | 第13-14页 |
·利用正向和反向遗传学技术研究植物基因功能 | 第14-15页 |
2 建立cDNA文库的原理及应用 | 第15-16页 |
·构建cDNA文库的原理 | 第15页 |
·cDNA文库的特点 | 第15页 |
·cDNA文库的应用 | 第15-16页 |
·筛选与相关性状相关的重要基因 | 第15页 |
·为表达序列标签(EST)的开发提供材料 | 第15-16页 |
·为SSR引物的开发提供平台 | 第16页 |
·结合DNA芯片技术对生物体的基因的时空表达进行研究 | 第16页 |
3 杉木cDNA文库构建的意义 | 第16-18页 |
二 杉木cDNA文库的构建 | 第18-31页 |
1 试验材料 | 第18页 |
2 试验方法 | 第18-28页 |
·杉木总RNA的提取 | 第18-19页 |
·Poly(A)~+mRNA的分离 | 第19-20页 |
·cDNA文库的构建 | 第20-28页 |
·实验流程 | 第20-21页 |
·实验操作方法 | 第21-23页 |
·cDNA片段大小的过柱筛选 | 第23-25页 |
·连接cDNA于λZAP Express Vector中 | 第25页 |
·准备宿主菌 | 第25-26页 |
·用Gigapack Ⅲ Gold Packing Extract包装连接产物 | 第26页 |
·铺平板和滴度的测定 | 第26-27页 |
·初级cDNA文库的扩增和滴度的测定 | 第27-28页 |
3 从λZAP Express vector中剪切PBK-CMV噬菌粒 | 第28页 |
4 cDNA插入片段大小的检测 | 第28-31页 |
·用PCR扩增的方法检测cDNA插入片段的大小 | 第28-29页 |
·双酶切检测cDNA插入片段的大小 | 第29-31页 |
三 结果与分析 | 第31-36页 |
1 杉木总RNA的提取结果 | 第31页 |
2 Poly(A~+)mRNA的分离结果 | 第31页 |
3 cDNA文库的构建结果 | 第31-36页 |
四 讨论 | 第36-39页 |
1 cDNA文库建库材料的选择 | 第36页 |
2 杉木RNA的提取 | 第36-37页 |
3 影响杉木cDNA文库初级库容量大小的因素 | 第37-39页 |
五 对下一步研究工作的展望 | 第39-41页 |
1 从cDNA文库中开发表达序列标签(EST) | 第39页 |
2 开发SSR引物 | 第39-40页 |
3 结合基因表达芯片技术对杉木阶段性表达的基因进行研究 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |