| 中文文摘 | 第1-12页 |
| 英文文摘 | 第12-15页 |
| 英文缩写表 | 第15-17页 |
| 1 引言 | 第17-34页 |
| ·概述 | 第17-19页 |
| ·黄瓜“花打顶”在生产中的表现 | 第17页 |
| ·造成黄瓜“花打顶”的环境因子 | 第17-18页 |
| ·黄瓜“花打顶”的栽培防治措施 | 第18-19页 |
| ·黄瓜“花打顶”相关生理机制--衰老的研究 | 第19-29页 |
| ·植物的衰老控制 | 第20页 |
| ·叶片衰老的生理生化变化 | 第20-22页 |
| ·叶片衰老的调节 | 第22-24页 |
| ·外因对叶片衰老的调节 | 第22-23页 |
| ·内因对叶片衰老的调节 | 第23-24页 |
| ·叶片衰老相关基因的表达 | 第24-26页 |
| ·与蛋白质降解有关的衰老相关基因 | 第24-25页 |
| ·与核酸降解有关的衰老相关基因 | 第25页 |
| ·与脂降解有关的衰老相关基因 | 第25-26页 |
| ·与氮和碳元素再动员有关的衰老相关基因 | 第26页 |
| ·叶片衰老相关基因(SAGs)的调控 | 第26-27页 |
| ·延缓叶片衰老的分子生物学研究 | 第27-29页 |
| ·mRNA差异显示技术 | 第29-33页 |
| ·mRNA差异显示技术的原理 | 第29-30页 |
| ·mRNA差异显示的优缺点及改进 | 第30-31页 |
| ·mRNA差异显示技术的应用 | 第31-33页 |
| ·基因表达 | 第31-32页 |
| ·植物的发育及抗性 | 第32页 |
| ·基因的鉴定与克隆 | 第32-33页 |
| ·本研究的依据、研究的主要内容和预计实现的目标 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-48页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·切片制作用材料 | 第34页 |
| ·其他材料 | 第34-35页 |
| ·引物 | 第35-36页 |
| ·实验设计 | 第36-37页 |
| ·切片制作及显微、电镜照片制作 | 第37-38页 |
| ·石蜡切片 | 第37页 |
| ·半薄切片 | 第37页 |
| ·电镜扫描 | 第37页 |
| ·电镜透射 | 第37-38页 |
| ·基因的分离与鉴定方法 | 第38-47页 |
| ·RNA提取与纯化 | 第38页 |
| ·RNA纯化 | 第38-39页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第39页 |
| ·RT-PCR | 第39-40页 |
| ·聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第40-41页 |
| ·安装电泳装置 | 第40页 |
| ·制备6％凝胶溶液和灌胶 | 第40页 |
| ·安装测序胶 | 第40页 |
| ·上样和电泳 | 第40-41页 |
| ·染色 | 第41页 |
| ·所需溶液 | 第41页 |
| ·染色步骤 | 第41页 |
| ·获得并回收差异带 | 第41页 |
| ·差异带的PCR及电泳检测 | 第41-42页 |
| ·反向Northern点杂交 | 第42页 |
| ·阳性带的克隆 | 第42-44页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第43页 |
| ·DNA片段与TA克隆载体的连接与转化 | 第43页 |
| ·质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·Northern杂交 | 第44-45页 |
| ·RNA提取及电泳 | 第44页 |
| ·转膜 | 第44页 |
| ·探针合成 | 第44页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第44-45页 |
| ·Southern杂交 | 第45-46页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·基因组DNA的限制性内切酶消化 | 第45页 |
| ·转膜 | 第45-46页 |
| ·探针合成 | 第46页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第46页 |
| ·cDNA序列全长的获得 | 第46-47页 |
| ·加尾法获得5’端序列 | 第46页 |
| ·5’RACE法获得5’端序列 | 第46-47页 |
| ·cDNA序列全长的获得 | 第47页 |
| ·多胺的测定 | 第47-48页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·材料处理 | 第47页 |
| ·多胺测定与数据分析 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-80页 |
| ·“花打顶”黄瓜形态学特征的变化 | 第48-49页 |
| ·“花打顶“黄瓜“龙头”形态 | 第48-49页 |
| ·黄瓜“花打顶”后基本形态指标的变化 | 第49页 |
| ·扫描电镜下叶片和茎尖形态的变化 | 第49-51页 |
| ·茎尖形态 | 第49-51页 |
| ·叶片表面形态 | 第51页 |
| ·解剖学特征的变化 | 第51-54页 |
| ·茎解剖特征的变化 | 第51-52页 |
| ·叶片解剖特征的变化 | 第52-53页 |
| ·叶片厚度、栅栏组织、和海绵组织的变化 | 第52-53页 |
| ·叶片细胞大小的变化 | 第53页 |
| ·茎尖解剖特征的变化 | 第53-54页 |
| ·细胞学特征的变化 | 第54-56页 |
| ·叶片细胞学特征的变化 | 第54页 |
| ·茎尖分生组织细胞学特征的变化 | 第54-56页 |
| ·mRNA差异显示获得差异片段 | 第56-59页 |
| ·RNA的提取 | 第57页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第57页 |
| ·差异带PCR | 第57-58页 |
| ·反向Northern点杂交 | 第58-59页 |
| ·差异带的克隆及序列分析 | 第59-61页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第59页 |
| ·2序列分析结果 | 第59-61页 |
| ·CuATP和CuADC的cDNA全长的分离 | 第61-70页 |
| ·CuATP全长cDNA序列的分离 | 第61-64页 |
| ·CuATP5′端cDNA序列的分离 | 第61-63页 |
| ·CuATP全长cDNA序列的分离 | 第63-64页 |
| ·CuADC全长cDNA序列的分离 | 第64-70页 |
| ·CuADC中间cDNA序列的分离 | 第64页 |
| ·CuADC5′端cDNA序列的分离 | 第64-66页 |
| ·CuADC全长cDNA序列的分离 | 第66-70页 |
| ·基因表达分析 | 第70-76页 |
| ·CuATP的表达分析 | 第70-74页 |
| ·CuATP Southern杂交结果 | 第70-71页 |
| ·CuATP Northern杂交结果 | 第71-74页 |
| ·CuADC的表达分析 | 第74-76页 |
| ·CuADC Southern杂交结果 | 第74页 |
| ·CuADC Northern杂交结果 | 第74-76页 |
| ·多胺含量 | 第76-80页 |
| ·不同器官中多胺含量 | 第77-78页 |
| ·“花打顶”后多胺含量的变化 | 第78页 |
| ·正常条件下不同品种中多胺含量的比较 | 第78-79页 |
| ·不同处理条件下多胺含量的变化 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-95页 |
| ·“花打顶”黄瓜形态、解剖、细胞学特征 | 第80-84页 |
| ·“花打顶”黄瓜“龙头”部位叶片的形态、解剖和细胞学特征 | 第80-82页 |
| ·“花打顶”黄瓜茎的形态、解剖和细胞学特征 | 第82-83页 |
| ·“花打顶”黄瓜茎尖的形态、解剖和细胞学特征 | 第83-84页 |
| ·mRNA差异显示体系的建立 | 第84-86页 |
| ·黄瓜中CuATP的表达分析 | 第86-90页 |
| ·植物中ATPase的种类及功能 | 第86-87页 |
| ·CuATP结构 | 第87页 |
| ·CuATP的表达特征 | 第87-88页 |
| ·黄瓜“花打顶”后CuATP的表达 | 第88页 |
| ·不同处理对CuATP表达的影响 | 第88-90页 |
| ·CuADC的序列特征、表达分析和对多胺合成的影响 | 第90-93页 |
| ·多胺及其生物合成 | 第90-91页 |
| ·CuADC的序列特征 | 第91页 |
| ·CuADC的基本表达特征 | 第91-92页 |
| ·黄瓜“花打顶”后CuADC的表达 | 第92页 |
| ·外因对CuADC表达的影响 | 第92-93页 |
| ·黄瓜“花打顶”的可能途径 | 第93-95页 |
| 5 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-109页 |
| 附录1 克隆载体图 | 第109-110页 |
| 附录2 CuATP的GeneBank注册结果 | 第110-111页 |
| 附录3 CuADC的GeneBank注册结果 | 第111-113页 |
| 附录4 博士期间形成的论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |