| 图片目录 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 第一章 水稻精细胞优势表达基因RSSG58的克隆与特征分析 | 第15-34页 |
| 摘要 | 第15页 |
| 1 引言 | 第15-16页 |
| 2 材料和方法 | 第16-21页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·方法 | 第18-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-30页 |
| ·RSSG58全长cDNA的克隆和分析 | 第21-25页 |
| ·RSSG58基因推测的氨基酸序列分析 | 第25-28页 |
| ·RSSG58表达特异性RT-PCR检测 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-31页 |
| ·水稻精细胞中存在差异表达基因 | 第30页 |
| ·水稻精细胞中表达基因的特点 | 第30-31页 |
| ·RSSG58开放读框编码蛋白质的序列分析 | 第31页 |
| 小结 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 第二章 RSSG58在大肠杆菌中的蛋白表达、抗体制备和免疫定位 | 第34-55页 |
| 摘要 | 第34页 |
| 1 引言 | 第34-35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-42页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-49页 |
| ·RSSG58基因编码区的克隆和表达载体pQE30-RSSG58的构建 | 第42-43页 |
| ·重组子鉴定 | 第43页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析和Western杂交检测 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白纯化 | 第44-45页 |
| ·抗血清的滴度测定 | 第45页 |
| ·抗血清的特异性鉴定 | 第45页 |
| ·Western杂交分析 | 第45-46页 |
| ·免疫组化定位 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·选用大肠杆菌中表达蛋白体系 | 第49页 |
| ·RSSG58基因重组蛋白纯化和抗血清制备 | 第49-50页 |
| ·抗血清鉴定 | 第50页 |
| ·RSSG58基因的时空表达 | 第50-51页 |
| 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 第三章 水稻精细胞基因RSSG58启动子的克隆分析及表达载体构建 | 第55-66页 |
| 摘要 | 第55页 |
| 1 引言 | 第55-56页 |
| 2 材料和方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-63页 |
| ·水稻花粉RSSG58基因启动子的克隆片段 | 第59-60页 |
| ·RSSG58基因启动子序列的功能元件分析 | 第60-61页 |
| ·Pr58缺失分析的表达载体构建 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第四章 水稻花粉发育中RSSG58基因mRNA的原位杂交 | 第66-79页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 1 引言 | 第66-67页 |
| 2 材料和方法 | 第67-71页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-71页 |
| 3 结果 | 第71-74页 |
| ·探针cDNA片段的制备 | 第71页 |
| ·重组载体pSPT18RSSG58的构建与酶切鉴定 | 第71-72页 |
| ·重组质粒PspT18-RSSG58线性化 | 第72页 |
| ·RNA探针的制备和检测 | 第72-73页 |
| ·原位杂交显示RSSG58基因在水稻花粉发育中的时空表达 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| ·严格避免RNase污染 | 第75页 |
| ·探针的选择 | 第75页 |
| ·材料固定应注意的问题 | 第75-76页 |
| ·杂交之前的预处理是成功进行杂交的重要步骤 | 第76页 |
| 小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第五章 利用反义RNA技术对RSSG58基因功能初探 | 第79-92页 |
| 摘要 | 第79页 |
| 1 引言 | 第79-80页 |
| 2 材料和方法 | 第80-84页 |
| ·材料 | 第80-81页 |
| ·方法 | 第81-84页 |
| 3 结果 | 第84-89页 |
| ·正义和反义目的基因片段的扩增 | 第84-85页 |
| ·正义和反义重组质粒的构建和鉴定 | 第85-86页 |
| ·转化植株的抗性筛选及转基因植株的获得 | 第86页 |
| ·转化植株的PCR鉴定 | 第86页 |
| ·转化植株的形态观察 | 第86页 |
| ·转化植株花粉的形态和生活力的变化 | 第86-89页 |
| ·转化植株花粉发育过程中的细胞学变化 | 第89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 小结 | 第90页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 文献综述 被子植物双受精研究进展 | 第92-121页 |
| 1 精细胞的结构特点 | 第92-94页 |
| ·雄性生殖单位的结构与功能 | 第92页 |
| ·精细胞的细胞学观察 | 第92-93页 |
| ·精子异型性和倾向受精 | 第93-94页 |
| 2 肌球蛋白在被子植物双受精中的作用 | 第94-97页 |
| ·肌球蛋白概况 | 第94-95页 |
| ·肌球蛋白对精细胞在花粉管中的运动起着重要的作用 | 第95-96页 |
| ·精细胞在胚囊中的移动 | 第96-97页 |
| 3 精卵识别和离体受精 | 第97-98页 |
| 4 精细胞的分离、纯化和保存 | 第98-100页 |
| ·精细胞的释放 | 第98-99页 |
| ·精细胞的纯化 | 第99-100页 |
| ·生活力保存 | 第100页 |
| 5 植物精细胞特异蛋白 | 第100-102页 |
| 6 精细胞中的基因表达 | 第102-104页 |
| 7 反义RNA及其应用 | 第104-108页 |
| ·反义RNA的基本原理 | 第104页 |
| ·自然界反义RNA的存在 | 第104-105页 |
| ·反义RNA技术在植物学研究中的应用 | 第105-108页 |
| ·反义RNA技术在植物基因功能及植物生理代谢途径研究中的应用 | 第105-106页 |
| ·反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第106-107页 |
| ·反义RNA技术在植物抗病性研究的应用 | 第107-108页 |
| 8 结语 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-121页 |
| 致谢 | 第121-122页 |
| 在读期间发表及待发表论文情况 | 第122-123页 |
