| 第一章 前言 | 第1-21页 |
| 1．1 L-苯丙氨酸的性质和应用 | 第9页 |
| 1．2 L-苯丙氨酸的生产方法 | 第9-12页 |
| 1．2．1 提取法 | 第10页 |
| 1．2．2 化学合成法 | 第10页 |
| 1．2．3 微生物直接发酵法 | 第10页 |
| 1．2．4 酶法 | 第10-11页 |
| 1．2．5 各种生产方法的比较 | 第11-12页 |
| 1．3 苯丙氨酸解氨酶转化肉桂酸生产途径的研究进展 | 第12-17页 |
| 1．3．1 肉桂酸途径研究进展与现状 | 第12-13页 |
| 1．3．1．1 肉桂酸途径研究历史与产PAL菌种简介 | 第12页 |
| 1．3．1．2 红酵母属与粘红酵母简介 | 第12-13页 |
| 1．3．2 PAL工程菌构建进展 | 第13-14页 |
| 1．3．3 PAL稳定性的研究 | 第14-15页 |
| 1．3．4 动力学研究 | 第15-16页 |
| 1．3．5 利用PAL途径的L-苯丙氨酸固定化法生产进展 | 第16页 |
| 1．3．6 PAL工程菌构建进展 | 第16-17页 |
| 1．4 L-苯丙氨酸的提取技术进展 | 第17-18页 |
| 1．4．1 海因法 | 第17-18页 |
| 1．4．2 离子交换树脂法 | 第18页 |
| 1．4．3 双水相分配技术 | 第18页 |
| 1．5 苯丙氨酸的HPLC分析法进展 | 第18-19页 |
| 1．6 本课题的立题依据 | 第19-20页 |
| 1．7 本论文的研究内容及实验方案设计 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-27页 |
| 2．1 材料 | 第21-23页 |
| 2．1．1 菌种 | 第21页 |
| 2．1．2 试剂 | 第21-22页 |
| 2．1．3 仪器 | 第22页 |
| 2．1．4 培养基 | 第22页 |
| 2．1．5 主要溶液 | 第22-23页 |
| 2．2 实验方法 | 第23-27页 |
| 2．2．1 菌种的 | 第23页 |
| 2．2．2 培养方法 | 第23页 |
| 2．2．3 转化方法 | 第23页 |
| 2．2．4 测定方法 | 第23-27页 |
| 2．2．4．1 生物量的测定 | 第23-24页 |
| 2．2．4．2 苯丙氨酸解氨酶活力的紫外分光光度法测定 | 第24-25页 |
| 2．2．4．3 转化反应液中肉桂酸转化率的测定 | 第25-26页 |
| 2．2．4．4 出芽率的测定 | 第26页 |
| 2．2．4．5 葡萄糖浓度的测定 | 第26页 |
| 2．2．4．6 纸层析法测定L-苯丙氨酸 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-57页 |
| 3．1 酶活力与生物转化间的对应性 | 第27页 |
| 3．2 产酶模式的探究与产酶动力学数学模型的初步构建 | 第27-44页 |
| 3．2．1 产酶模式的探究 | 第28-31页 |
| 3．2．1．1 粘红酵母在合成培养基中的生长与耗糖情况 | 第28页 |
| 3．2．1．2 本底产酶动力学曲线 | 第28页 |
| 3．2．1．3 产酶培养期初始添加诱导物条件下的产酶动力学曲线 | 第28-29页 |
| 3．2．1．4 减速期和稳定期添加诱导物条件下的产酶动力学曲线 | 第29-30页 |
| 3．2．1．5 诱导物浓度对产酶动力学的影响 | 第30页 |
| 3．2．1．6 产酶模式的探究 | 第30-31页 |
| 3．2．2 合成培养基中PAL产酶动力学数学模型的建立与分析 | 第31-35页 |
| 3．2．2．1 产酶动力学数学模型的建立与初步验证 | 第31-33页 |
| 3．2．2．2 模型参数的解释与求解 | 第33-34页 |
| 3．2．2．3 产酶动力学模型评价 | 第34-35页 |
| 3．2．3 天然培养基条件下各因素对产酶的影响 | 第35-44页 |
| 3．2．3．1 种子质量对于生物量和酶活力的影响 | 第35-37页 |
| 3．2．3．2 碳源对于生物量与产酶的影响 | 第37-39页 |
| 3．2．3．3 不同氮源对于生物量与产酶的影响 | 第39-40页 |
| 3．2．3．4 通过正交实验优化碳氮源 | 第40-42页 |
| 3．2．3．5 无机盐对于生物量的影响 | 第42-43页 |
| 3．2．3．6 诱导物对产酶的影响——D-Phe的安慰诱导作用 | 第43-44页 |
| 3．2．3．7 诱导物添加时间对于产酶的影响 | 第44页 |
| 3．3 天然产酶培养基中产酶动力学曲线及动力学方程 | 第44-47页 |
| 3．3．1 产酶动力学数学模型的扩展假设 | 第44-45页 |
| 3．3．2 产酶动力学方程的参数求解 | 第45页 |
| 3．3．3 产酶条件优化前后动力学参数的比较 | 第45-47页 |
| 3．4 转化条件的优化 | 第47-51页 |
| 3．4．1 氨离子浓度对L-苯丙氨酸积累浓度的影响 | 第47-48页 |
| 3．4．2 碳酸氢根离子浓度对L-苯丙氨酸积累浓度的影响 | 第48页 |
| 3．4．3 pH对L-苯丙氨酸积累浓度的影响 | 第48页 |
| 3．4．4 转化条件的优化 | 第48-49页 |
| 3．4．5 细胞膜透性对转化的影响 | 第49-51页 |
| 3．4．5．1 表面活性剂对转化的影响 | 第49-50页 |
| 3．4．5．2 制霉菌素对转化的影响 | 第50-51页 |
| 3．4．6 细胞浓度对转化的影响 | 第51页 |
| 3．5 PAL酶活力稳定性研究 | 第51-56页 |
| 3．5．1 底物流加实验 | 第51-53页 |
| 3．5．2 添加效应物对于转化实验的影响 | 第53-54页 |
| 3．5．3 存在多种效应物情况下的底物流加实验 | 第54-56页 |
| 3．6 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 结论 | 第57-58页 |
| 第五章 展望 | 第58-63页 |
| 5．1 菌种的改造 | 第58页 |
| 5．2 PAL工程菌的构建 | 第58-62页 |
| 5．3 酵母菌体高密度培养 | 第62页 |
| 5．4 固定化生产研究 | 第62页 |
| 5．5 PAL提纯及固定化研究 | 第62页 |
| 5．6 进一步完善动力学模型研究 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附页 | 第70页 |
