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白菜类蔬菜转基因技术研究:农杆菌介导的离体转化和植株渗入转化

中文摘要第1-3页
英文摘要第3-4页
目  录第4-6页
缩略词第6-7页
序言第7-9页
第一章 文献综述与进展第9-25页
 1.1 芸薹属作物离体转化技术研究进展第9-16页
  1.1.1 农杆菌介导转基因方法简介第9-10页
  1.1.2 芸薹属作物叶盘转化法的主要影响因素第10-16页
   1.1.2.1 叶盘转化法简介第10-11页
   1.1.2.2 共培养之前的影响因素第11-13页
   1.1.2.3 共培养阶段影响转化率的主要因素第13-15页
   1.1.2.4 共培养之后的影响因素第15-16页
 1.2 原位渗入转化技术——不依赖于组织或细胞培养的转化技术第16-23页
  1.2.1 原位渗入转化法的产生及其发展第17-18页
  1.2.2 农杆菌介导原位渗入转化技术的优势第18-19页
  1.2.3 原位渗入转化的机理研究进展第19-21页
   1.2.3.1 从实验结果中得到的几点推想第19-20页
   1.2.3.2 关于转化过程的模型第20-21页
   1.2.3.3 完全不同的转化模式——苜蓿原位渗入研究第21页
  1.2.4 原位渗入转化技术的进一步推广第21-22页
  1.2.5 问题与展望第22-23页
 1.3 白菜类作物的转化情况及本课题的研究目的第23-25页
第二章 结球白菜真叶离体再生系统的建立第25-35页
 2.1 材料与方法:第25-28页
  2.1.1 材料:第25页
  2.1.2 无菌苗的获得第25页
  2.1.3 外植体的获得第25页
  2.1.4 激素配比实验第25-26页
  2.1.5 材料生长状态的影响第26页
  2.1.6 AgNO_3的影响第26页
  2.1.7 不同外植体再生能力比较第26-28页
 2.2 结果与分析第28-32页
  2.2.1 最适激素配比的确定第28-30页
  2.2.2 材料本身生长状态对再生的影响第30-31页
  2.2.3 AgNO_3对植株再生的影响第31页
  2.2.4 不同外植体的再生情况第31-32页
 2.3 讨论第32-35页
第三章 真叶转化大白菜及双价抗TuMV病毒转基因白菜的获得第35-50页
 3.1 实验材料第35-36页
 3.2 实验方法第36-46页
  3.2.1 农杆菌介导离体真叶转化的一般程序第36页
   3.2.1.1 所用培养基名称及配方第36页
   3.2.1.2 农杆菌菌液的准备第36页
   3.2.1.3 转化程序第36页
  3.2.2 最适转化条件的确定第36-41页
   3.2.2.1 C58-gus-intron菌株的获得第36-39页
   3.2.2.2 利用C58-gus-intron确定最适转化条件第39-40页
   3.2.2.3 选择压及抑菌抗生素适宜浓度的确定第40-41页
  3.2.3 C58-6(-)转化10号真叶第41页
  3.2.4 抗性株的PCR及PCR-Southern鉴定第41-46页
   3.2.4.1 PCR检测第41-43页
   3.2.4.2 PCR-Southern杂交检测第43-46页
 3.3 结果与分析第46-48页
  3.3.1 确立适宜转化条件第46-47页
  3.3.2 C58-6(-)转化结果第47-48页
  3.3.3 PCR及PCR-southern杂交结果第48页
 3.4 讨论第48-50页
第四章 原位浸渍法转化小白菜初探第50-56页
 4.1 实验材料第50页
 4.2 实验方法第50-51页
  4.2.1 菌液准备第50页
  4.2.2 浸渍转化处理第50-51页
  4.2.3 转化株的筛选第51页
  4.2.4 抗性株的PCR及PCR-Southern杂交验证第51页
 4.3 结果与分析第51-53页
 4.4 讨论第53-56页
第五章 结 论第56-57页
 5.1 建立了结球白菜的真叶离体再生方法第56页
 5.2 初步建立了结球白菜的真叶离体转化方法第56页
 5.3 对不结球白菜的花序浸渍农杆菌介导转化技术进行了初步研究第56-57页
参考文献第57-62页
图版第62-66页
致谢第66页

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