中文摘要 | 第1-3页 |
英文摘要 | 第3-4页 |
目 录 | 第4-6页 |
缩略词 | 第6-7页 |
序言 | 第7-9页 |
第一章 文献综述与进展 | 第9-25页 |
1.1 芸薹属作物离体转化技术研究进展 | 第9-16页 |
1.1.1 农杆菌介导转基因方法简介 | 第9-10页 |
1.1.2 芸薹属作物叶盘转化法的主要影响因素 | 第10-16页 |
1.1.2.1 叶盘转化法简介 | 第10-11页 |
1.1.2.2 共培养之前的影响因素 | 第11-13页 |
1.1.2.3 共培养阶段影响转化率的主要因素 | 第13-15页 |
1.1.2.4 共培养之后的影响因素 | 第15-16页 |
1.2 原位渗入转化技术——不依赖于组织或细胞培养的转化技术 | 第16-23页 |
1.2.1 原位渗入转化法的产生及其发展 | 第17-18页 |
1.2.2 农杆菌介导原位渗入转化技术的优势 | 第18-19页 |
1.2.3 原位渗入转化的机理研究进展 | 第19-21页 |
1.2.3.1 从实验结果中得到的几点推想 | 第19-20页 |
1.2.3.2 关于转化过程的模型 | 第20-21页 |
1.2.3.3 完全不同的转化模式——苜蓿原位渗入研究 | 第21页 |
1.2.4 原位渗入转化技术的进一步推广 | 第21-22页 |
1.2.5 问题与展望 | 第22-23页 |
1.3 白菜类作物的转化情况及本课题的研究目的 | 第23-25页 |
第二章 结球白菜真叶离体再生系统的建立 | 第25-35页 |
2.1 材料与方法: | 第25-28页 |
2.1.1 材料: | 第25页 |
2.1.2 无菌苗的获得 | 第25页 |
2.1.3 外植体的获得 | 第25页 |
2.1.4 激素配比实验 | 第25-26页 |
2.1.5 材料生长状态的影响 | 第26页 |
2.1.6 AgNO_3的影响 | 第26页 |
2.1.7 不同外植体再生能力比较 | 第26-28页 |
2.2 结果与分析 | 第28-32页 |
2.2.1 最适激素配比的确定 | 第28-30页 |
2.2.2 材料本身生长状态对再生的影响 | 第30-31页 |
2.2.3 AgNO_3对植株再生的影响 | 第31页 |
2.2.4 不同外植体的再生情况 | 第31-32页 |
2.3 讨论 | 第32-35页 |
第三章 真叶转化大白菜及双价抗TuMV病毒转基因白菜的获得 | 第35-50页 |
3.1 实验材料 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-46页 |
3.2.1 农杆菌介导离体真叶转化的一般程序 | 第36页 |
3.2.1.1 所用培养基名称及配方 | 第36页 |
3.2.1.2 农杆菌菌液的准备 | 第36页 |
3.2.1.3 转化程序 | 第36页 |
3.2.2 最适转化条件的确定 | 第36-41页 |
3.2.2.1 C58-gus-intron菌株的获得 | 第36-39页 |
3.2.2.2 利用C58-gus-intron确定最适转化条件 | 第39-40页 |
3.2.2.3 选择压及抑菌抗生素适宜浓度的确定 | 第40-41页 |
3.2.3 C58-6(-)转化10号真叶 | 第41页 |
3.2.4 抗性株的PCR及PCR-Southern鉴定 | 第41-46页 |
3.2.4.1 PCR检测 | 第41-43页 |
3.2.4.2 PCR-Southern杂交检测 | 第43-46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-48页 |
3.3.1 确立适宜转化条件 | 第46-47页 |
3.3.2 C58-6(-)转化结果 | 第47-48页 |
3.3.3 PCR及PCR-southern杂交结果 | 第48页 |
3.4 讨论 | 第48-50页 |
第四章 原位浸渍法转化小白菜初探 | 第50-56页 |
4.1 实验材料 | 第50页 |
4.2 实验方法 | 第50-51页 |
4.2.1 菌液准备 | 第50页 |
4.2.2 浸渍转化处理 | 第50-51页 |
4.2.3 转化株的筛选 | 第51页 |
4.2.4 抗性株的PCR及PCR-Southern杂交验证 | 第51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-53页 |
4.4 讨论 | 第53-56页 |
第五章 结 论 | 第56-57页 |
5.1 建立了结球白菜的真叶离体再生方法 | 第56页 |
5.2 初步建立了结球白菜的真叶离体转化方法 | 第56页 |
5.3 对不结球白菜的花序浸渍农杆菌介导转化技术进行了初步研究 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
图版 | 第62-66页 |
致谢 | 第66页 |