中文摘要 | 第1-8页 |
引言 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-20页 |
1 小麦抗叶锈病基因的染色体定位 | 第10-12页 |
2 小麦抗叶锈病基因分析研究进展 | 第12-20页 |
2.1 传统的杂交方法 | 第12页 |
2.2 抗性基因推导法 | 第12-14页 |
2.3 分子标记技术在检测小麦抗叶锈基因中的应用 | 第14-20页 |
2.3.1 RFLP标记 | 第15页 |
2.3.2 RAPD标记 | 第15-16页 |
2.3.3 AFLP标记 | 第16页 |
2.3.4 SSR标记 | 第16-17页 |
2.3.5 ISSR标记 | 第17-19页 |
2.3.6 几种分子标记的比较 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-25页 |
1 材料 | 第20页 |
1.1 植物材料及供试菌株 | 第20页 |
1.2 供试试剂 | 第20页 |
1.3 所需主要仪器 | 第20页 |
2 方法 | 第20-25页 |
2.1 抗病性鉴定 | 第20-21页 |
2.2 DNA提取 | 第21-22页 |
2.2.1 大量提取法 | 第21-22页 |
2.2.2 微量提取法 | 第22页 |
2.2.3 DNA的质量和浓度检测 | 第22页 |
2.3 引物的配制 | 第22-23页 |
2.4 小麦RAPD分析最佳反应体系的建立 | 第23页 |
2.5 小麦近等基因系基因组DNA的RAPD扩增 | 第23页 |
2.6 RAPD扩增产物的电泳检测 | 第23-24页 |
2.6.1 琼脂糖凝胶的制备 | 第23-24页 |
2.6.2 DNA样品的检测 | 第24页 |
2.7 特异性DNA片段的回收 | 第24页 |
2.8 特异性DNA回收片段的扩增 | 第24-25页 |
结果与分析 | 第25-34页 |
1 苗期抗叶锈性鉴定 | 第25页 |
2 小麦基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
3 RAPD分析最佳反应体系的建立 | 第26-29页 |
3.1 Mg~(2+)浓度对RAPD扩增结果的影响 | 第26-27页 |
3.2 dNTP浓度对RAPD扩增结果的影响 | 第27页 |
3.3 引物浓度对RAPD扩增结果的影响 | 第27-28页 |
3.4 DNA浓度对RAPD扩增结果的影响 | 第28页 |
3.5 Taq DNA聚合酶浓度对RAPD扩增结果的影响 | 第28-29页 |
3.6 温度循环参数对RAPD扩增结果的影响 | 第29页 |
4 小麦叶锈病近等基因系的RAPD分析 | 第29-33页 |
4.1 引物S30在NIL Thatcher和Lr38/6~*Thatcher 间的扩增结果 | 第30页 |
4.2 引物S33在NIL Thatcher和Lr38/6~*Thatcher间的扩增结果 | 第30-32页 |
4.3 多态性引物S30和S33对不同遗传背景下Lr38的检测 | 第32-33页 |
5 特异性DNA片段的回收 | 第33-34页 |
讨论 | 第34-39页 |
1 关于小麦基因组DNA的提取 | 第34页 |
2 不同实验室间小麦RAPD分析最佳反应条件的比较 | 第34-35页 |
3 RAPD的稳定性和可行性 | 第35页 |
4 与小麦叶锈病抗病基因Lr38连锁的RAPD标记 | 第35-37页 |
5 RAPD标记转化为经典的PCR标记 | 第37页 |
6 RAPD技术在分子标记辅助选择研究中的应用 | 第37-39页 |
结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-50页 |
英文摘要 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附表 | 第53页 |