| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| ·柑橘产业的概况 | 第11页 |
| ·基因工程与柑橘砧木种质改良 | 第11-16页 |
| ·柑橘砧木应用现状 | 第11-12页 |
| ·柑橘砧木的品种改良与选育 | 第12-13页 |
| ·基因工程改良柑橘砧木种质的方法 | 第13-14页 |
| ·基因工程在柑橘砧木改良上的应用 | 第14-15页 |
| ·柑橘砧木改良研究展望 | 第15-16页 |
| ·植物根特异性启动子研究进展 | 第16-25页 |
| ·植物根特异性启动子的克隆和分析方法 | 第16-19页 |
| ·植物根特异性启动子的特点 | 第19页 |
| ·植物根特异性启动子的种类 | 第19-23页 |
| ·根特异性启动子研究展望 | 第23-25页 |
| 第二章 引言 | 第25-27页 |
| ·研究的目的与意义 | 第25页 |
| ·主要研究内容 | 第25-26页 |
| ·主要技术路线图 | 第26-27页 |
| 第三章 材料与方法 | 第27-49页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第27-31页 |
| ·试剂 | 第27-30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·柑橘材料 | 第31页 |
| ·常规试验方法 | 第31-42页 |
| ·TOTAL-RNA提取方法 | 第31-32页 |
| ·反转录及PCR反应体系 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳纯化回收DNA片段 | 第33-34页 |
| ·TA克隆、大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第34页 |
| ·质粒的提取和酶切检测 | 第34-35页 |
| ·限制性内切酶酶切体系及连接反应 | 第35-36页 |
| ·农杆菌EH105菌株感受态的制备与转化 | 第36-37页 |
| ·农杆菌转染枳方法 | 第37-38页 |
| ·改良CTAB法提取DNA | 第38-39页 |
| ·YADE法扩增5'端未知序列 | 第39-41页 |
| ·实时荧光定量PCR方法 | 第41-42页 |
| ·CONTIG2序列的分析 | 第42-43页 |
| ·contig2序列的生物信息学分析 | 第42页 |
| ·contig2相对表达量分析 | 第42-43页 |
| ·CONTIG2 DNA全长序列克隆 | 第43页 |
| ·CONTIG2启动子克隆 | 第43-45页 |
| ·YADE法克隆contig25'端上游未知序列 | 第43-45页 |
| ·contig2启动子预测 | 第45页 |
| ·构建含有CONTIG2启动子的表达载体 | 第45-46页 |
| ·构建中间载体pMD19-2P | 第46页 |
| ·构建pBI121-2p载体 | 第46页 |
| ·PBI121-2P载体转入枳中表达 | 第46-49页 |
| ·pBI121-2P载体转入农杆菌 | 第46页 |
| ·获得转基因植株 | 第46-47页 |
| ·pBI121-2P在转基因植株的相对表达量分析 | 第47-49页 |
| 第四章 结果与分析 | 第49-65页 |
| ·CONTIG2序列及生物信息学分析 | 第49-52页 |
| ·contig2序列来源 | 第49页 |
| ·contig2的生物信息学分析 | 第49-52页 |
| ·CONTIG2基因组织表达分析 | 第52-54页 |
| ·CONTIG2 DNA全长序列克隆 | 第54-56页 |
| ·CONTIG2启动子克隆 | 第56-59页 |
| ·利用YADE技术克隆contig2的5'端未知序列 | 第56-57页 |
| ·contig2全序列拼接 | 第57页 |
| ·contig2启动子预测 | 第57-58页 |
| ·contig2启动子序列克隆 | 第58-59页 |
| ·PBI121-2P表达载体构建 | 第59-60页 |
| ·PBI121-2P转基因植株的获得 | 第60-62页 |
| ·PBI121-2P在转基因植株的相对表达量分析 | 第62-65页 |
| 第五章 讨论 | 第65-69页 |
| 第六章 结论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 附录 | 第83-92页 |