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菲降解细菌的分离鉴定及其降解效果的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 绪论第11-31页
   ·PAHs及其污染现状第11-13页
   ·多环芳烃来源第13页
   ·PAHs的生物毒性第13-15页
   ·多环芳烃污染去除方式第15-21页
     ·非生物消除第15-20页
     ·生物降解和非生物处理相结合——复合修复第20-21页
   ·多环芳烃降解分子机理第21-23页
     ·染色体编码代谢途径第21页
     ·降解质粒编码代谢途径第21-23页
     ·质粒和染色体共同编码代谢途径第23页
   ·菲第23-29页
     ·菲的结构特性第23-24页
     ·菲的生物降解第24-26页
     ·提供共代谢底物对菲降解率的影响第26-27页
     ·细菌菲降解途径中的酶系第27-29页
   ·本论文的研究内容、目的和意义第29-31页
     ·主要研究内容第29-30页
     ·研究目的和意义第30-31页
第二章 菲降解菌株的分离筛选及其特性研究第31-38页
   ·前言第31页
   ·材料与方法第31-34页
     ·试剂和仪器第31-32页
     ·采样第32页
     ·材料与培养基第32-33页
     ·实验方法第33-34页
       ·菲降解菌株初筛第33页
       ·菲降解菌株降解能力初筛第33页
       ·样品制备第33页
       ·HPLC测定第33-34页
       ·菌株生长曲线及菲降解曲线测定第34页
   ·结果与分析第34-37页
     ·筛选菌株降解效率的比较第34-36页
     ·优势降解菌株菲降解曲线第36页
     ·优势降解菌株生长曲线第36-37页
   ·小结第37-38页
第三章 三株优势降解菌株的鉴定及系统发育分析第38-50页
   ·前言第38页
   ·材料与方法第38-41页
     ·试剂和仪器第38页
     ·培养基及培养方法第38-39页
     ·实验方法第39-41页
       ·染色及形态观察第39页
       ·细菌总DNA提取第39-40页
       ·16SrDNA扩增与测序第40页
       ·测序以及序列同源性分析第40-41页
       ·16SrDNA序列数据处理和系统发育树构建第41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·菌株C22、C13、C8形态观察第41页
     ·16SrDNA扩增及测序第41-45页
     ·基于16SrDNA序列系统发育树的构建第45-48页
   ·小结第48-50页
第四章 菲降解菌株生长和降解特性研究第50-61页
   ·前言第50页
   ·材料与方法第50-52页
     ·试剂和仪器第50页
     ·材料与培养基第50-51页
     ·多环芳烃的测定方法第51页
     ·菲降解生长菌株生长条件的研究第51页
       ·菲含量对降解菌株生长的影响第51页
       ·培养基初始pH对降解菌株生长的影响第51页
       ·不同菲降解菌株混培对整体生物量的影响第51页
     ·菌株C22的菲降解特性研究第51-52页
       ·培养基初始pH对菌株C22菲降解的影响第51-52页
       ·菲含量对菌株C22菲降解的影响第52页
       ·有机质对菌株C22菲降解的影响第52页
       ·不同多环芳烃共基质培养对菌株C22菲降解的影响第52页
       ·不同菲降解菌株混培对降解菌株C22降解菲的影响第52页
       ·表面活性剂Tween-80对菌株C22降解菲的影响第52页
       ·菌株C22对其他多环芳烃的降解第52页
   ·结果与分析第52-60页
     ·菲降解菌株生长条件第52-55页
       ·培养基菲含量对菌株C22生长的影响第52-53页
       ·培养基初始pH对菌株生长的影响第53-54页
       ·不同菲降解菌株混培对整体生物量的影响第54-55页
     ·菌株C22的菲降解特性第55-60页
       ·培养基初始pH对菌株C22菲降解的影响第55页
       ·菲含量对C22菌株菲降解的影响第55-56页
       ·有机质对C22菌株菲降解的影响第56-57页
       ·不同多环芳烃共基质培养对菲降解的影响第57-58页
       ·菲降解菌株混培对菲降解的影响第58页
       ·表面活性剂吐温Tween-80对菲降解的影响第58-59页
       ·菌株C22对其他多环芳烃的降解第59-60页
   ·小结第60-61页
第五章 C22中邻苯二酚2,3-双加氧酶基因定位的初步研究第61-71页
   ·前言第61-62页
   ·材料与方法第62-67页
     ·材料第62-63页
       ·分子生物学实验中主要培养基及化学试剂的配制第62-63页
       ·实验材料及主要仪器第63页
     ·菌株C22代谢菲途径分析第63页
     ·降解途径中相关酶的酶活测定第63-64页
       ·细胞裂解物的制备第64页
       ·多酚酶活性检测第64页
     ·SDS法消除质粒第64页
     ·引物设计第64页
     ·总DNA提取第64-65页
     ·质粒提取第65-66页
     ·PCR扩增及扩增产物的纯化第66-67页
       ·PCR扩增第66页
       ·DNA电泳第66-67页
       ·PCR扩增产物纯化第67页
   ·结果与分析第67-69页
     ·菌株C22代谢菲途径分析第67-68页
     ·多酚氧化酶活性研究第68页
     ·质粒消除实验结果第68-69页
     ·邻苯二酚2,3-双加氧酶基因片段扩增及电泳检测第69页
   ·小结第69-71页
第六章 结论与建议第71-73页
   ·实验结论第71-72页
   ·建议第72-73页
参考文献第73-86页
致谢第86-87页
攻读学位期间发表的学术论文目录第87页

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