| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 中英文对照 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 HIF-1α和VEGF小干扰RNA对人血管内皮细胞HIF-1α和VEGF表达的抑制 | 第17-34页 |
| ·材料和方法 | 第17-25页 |
| ·主要试剂和材料设备 | 第17-18页 |
| ·HIF-1α siRNA重组质粒的构建 | 第18页 |
| ·细胞培养及分组 | 第18-19页 |
| ·基因转染 | 第19页 |
| ·细胞的低氧培养 | 第19页 |
| ·RT-PCR检测重组质粒的表达 | 第19-22页 |
| ·RT-PCR检测HIF-1α和VEGF mRNA的表达 | 第22-24页 |
| ·免疫细胞化学法检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达 | 第24-25页 |
| ·统计学分析 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·RT-PCR检测重组质粒的表达 | 第25页 |
| ·HIF-1α和VEGF mRNA的表达变化 | 第25-26页 |
| ·HIF-1α和VEGF蛋白的表达变化 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-33页 |
| ·血管内皮细胞的特性 | 第29页 |
| ·HIF-1α、VEGF与缺氧的关系 | 第29-31页 |
| ·RNA干扰与基因转染 | 第31-32页 |
| ·HIF-1α siRNA和VEGF_(165)siRNA对HIF-1α和VEGF的调控 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第二章 HIF-1α和VEGF小干扰RNA对鼠视网膜新生血管的抑制 | 第34-59页 |
| ·材料与方法 | 第34-46页 |
| ·主要试剂和材料设备 | 第34-38页 |
| ·小鼠视网膜新生血管动物模型的建立 | 第38页 |
| ·脂质体介导pEGFP-N_1质粒转染小鼠视网膜 | 第38-39页 |
| ·动物分组及基因转染 | 第39页 |
| ·RT-PCR检测重组质粒的表达 | 第39-40页 |
| ·FITC-dextran荧光造影视网膜铺片 | 第40页 |
| ·突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核计数 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR检测视网膜HIF-1α和VEGF mRNA的表达 | 第41-43页 |
| ·免疫组化染色法检测视网膜HIF-1α和VEGF蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·Western blot检测视网膜HIF-1α和VEGF蛋白的表达 | 第44-46页 |
| ·统计学分析 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·动物模型的建立 | 第46页 |
| ·GFP在小鼠视网膜中的表达 | 第46-47页 |
| ·RT-PCR检测重组质粒的表达 | 第47页 |
| ·FITC-dextran荧光造影视网膜铺片 | 第47-48页 |
| ·突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数 | 第48-50页 |
| ·视网膜HIF-1α和VEGF mRNA的表达变化 | 第50-51页 |
| ·免疫组化检测视网膜HIF-1α和VEGF蛋白的表达变化 | 第51-52页 |
| ·Western blot检测视网膜HIF-1α和VEGF蛋白的表达变化 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-58页 |
| ·氧诱导的小鼠视网膜新生血管模型的建立及鉴定 | 第54-55页 |
| ·玻璃体腔注射基因转染 | 第55页 |
| ·HIF-1α siRNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用 | 第55-56页 |
| ·VEGF_(165)siRNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用 | 第56-57页 |
| ·共转染HIF-1α和VEGF_(165)siRNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 眼部新生血管的基因治疗 | 第65-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 攻读博士学位期间发表的主要论文 | 第94页 |
