| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 技术路线图 | 第22-25页 |
| 第一章 材料与方法 | 第25-48页 |
| ·材料 | 第25-33页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·质粒和细菌 | 第25-28页 |
| ·引物 | 第28-31页 |
| ·主要抗体 | 第31页 |
| ·主要试剂/试剂盒 | 第31-32页 |
| ·主要仪器和设备 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-48页 |
| ·细胞DNA的提取 | 第33页 |
| ·细胞或组织总RNA的提取与表达谱芯片实验 | 第33页 |
| ·囊胚的收集及囊胚RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·RNA中痕量DNA的去除 | 第34页 |
| ·Borealin体外结合DNA实验 | 第34页 |
| ·两步法RT-PCR | 第34-35页 |
| ·ES细胞培养 | 第35页 |
| ·RNA合成 | 第35-36页 |
| ·DNA克隆 | 第36-39页 |
| ·RNAi质粒的构建 | 第39页 |
| ·报道基因和siRNAs瞬时转染细胞 | 第39-40页 |
| ·小鼠超排及抗体核内注射 | 第40页 |
| ·免疫组化 | 第40-41页 |
| ·报道基因荧光素酶活性分析 | 第41页 |
| ·BCA法蛋白定量 | 第41页 |
| ·细胞总蛋白提取和Western blotting分析 | 第41-42页 |
| ·全胚胎原位杂交方法 | 第42-43页 |
| ·间接免疫荧光法的步骤 | 第43-45页 |
| ·稳定表达Borealin RNAi的MCF-7细胞系的建立 | 第45页 |
| ·抗体纯化 | 第45页 |
| ·染色质免疫沉淀-芯片实验 | 第45-47页 |
| ·统计学处理 | 第47-48页 |
| 第二章 实验结果 | 第48-82页 |
| ·Borealin及CPC相关基因在小鼠多组织及ES中的表达 | 第48-52页 |
| ·Borealin,Survivin在小鼠多组织中的表达 | 第48页 |
| ·Borealin在小鼠植入前胚胎及ES细胞中的表达 | 第48-52页 |
| ·全胚胎原位杂交 | 第52-54页 |
| ·Borealin在早期胚胎发育的作用 | 第54-58页 |
| ·Borealin抗体阻止了小鼠胚胎的发育 | 第54-56页 |
| ·Borealin影响胚胎细胞的核型和CPC复合物的形成 | 第56-58页 |
| ·Borealin体外结合DNA | 第58-59页 |
| ·ChIP on Chip | 第59-78页 |
| ·Borealin结合位点的生物信息学分析 | 第64-72页 |
| ·结合位点下游基因的分析 | 第72-78页 |
| ·ChIP检测MCF-7和ES中Borealin的结合 | 第78-79页 |
| ·RNAi处理MCF-7细胞后Borealin下游基因的表达变化 | 第79-81页 |
| ·Borealin对结合位点的转录促进作用化 | 第81-82页 |
| 第三章 讨论 | 第82-88页 |
| ·Borealin的差异性表达 | 第82-83页 |
| ·ChIP on chip | 第83-85页 |
| ·Borealin结合DNA并且结合到特殊基因的启动子区域 | 第85-86页 |
| ·Borealin在转录表达方面的调节作用 | 第86-88页 |
| 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 综述 | 第95-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果目录及附件 | 第113页 |
