| 缩略语表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-32页 |
| 正文 | 第32-65页 |
| 第一部分 LIS基因稳定转染HEPG2 及SMMC-7721 细胞实验 | 第32-46页 |
| 1 材料 | 第33-37页 |
| ·细胞株 | 第33页 |
| ·质粒载体 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂及缓冲液的配制 | 第34-37页 |
| 2 方法 | 第37-41页 |
| ·冻存细胞的复苏 | 第37页 |
| ·细胞的传代 | 第37-38页 |
| ·G418 筛选浓度预实验 | 第38页 |
| ·重组pEGFP-N1-lis质粒和pEGFP-N1 质粒转染肝癌细胞HepG2、SMMC-7721 细胞 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第39页 |
| ·lis基因在细胞中表达鉴定 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-44页 |
| ·G418 筛选浓度 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-lis转染HepG2 及SMMC-7721 细胞24 小时后荧光表达观察 | 第42-43页 |
| ·HepG2/lis及SMMC/lis细胞荧光表达观察 | 第43页 |
| ·HepG2/lis细胞及SMMC/lis细胞中lis基因表达检测 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第二部分 LIS/LIN自杀基因系统对HEPG2 及SMMC-7721 细胞杀伤作用的体外实验 | 第46-56页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| ·细胞株 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂及缓冲液的配制 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-49页 |
| ·细胞生长曲线绘制 | 第48页 |
| ·lin对HepG2 和SMMC-7721 细胞毒性试验 | 第48页 |
| ·lis/lin自杀基因系统对HepG2 细胞杀伤试验 | 第48-49页 |
| ·lis/lin自杀基因系统对SMMC-7721 细胞杀伤试验 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-53页 |
| ·细胞生长曲线 | 第49-50页 |
| ·lin细胞对未转染肝癌细胞毒性 | 第50页 |
| ·lis/lin自杀基因系统对HepG2 细胞杀伤效应 | 第50-52页 |
| ·lis/lin自杀基因系统对SMMC-7721 细胞杀伤效应 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 第三部分 LIS/LIN自杀基因系统旁观者效应的观察试验 | 第56-65页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·细胞株 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56-57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂及缓冲液的配制 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-61页 |
| ·前体药物lin浓度为250mg/L时旁观者效应 | 第58-59页 |
| ·前体药物lin浓度为500mg/L时旁观者效应 | 第59页 |
| ·前体药物lin浓度为1000mg/L时旁观者效应 | 第59-60页 |
| ·500mg/L lin 作用 96 小时后 5%混合细胞组荧光显微镜下观察 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 个人简历和研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
