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北京油鸡α-干扰素的克隆和表达研究

摘要第1-4页
 Abstract第4-10页
1 引言第10-23页
   ·转基因动物的研究进展第10-13页
     ·国内外转基因动物研究现状第10-11页
     ·研究转基因动物技术与方法第11-13页
     ·转基因动物研究的应用第13页
   ·干扰素及其研究进展第13-17页
     ·干扰素的分类第14页
     ·干扰素的结构与性质第14-15页
     ·干扰素的生物学活性第15-16页
     ·禽类干扰素的研究进展第16-17页
   ·转基因靶细胞的制备第17-21页
     ·靶细胞培养第17-18页
     ·靶细胞质量鉴定第18-21页
   ·真核表达载体的构建第21-23页
     ·转基因报告系统的研究进展第21页
     ·绿色荧光蛋白表达载体第21-23页
   ·本试验的意义第23页
2 试验材料与方法第23-39页
   ·试验材料第23-28页
     ·靶细胞来源第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·试剂及配制第24-28页
   ·试验方法第28-39页
     ·靶细胞培养第28-29页
     ·靶细胞质量鉴定第29-33页
     ·目的基因的克隆第33-37页
     ·重组质粒pEGFP-C1-α–IFN 的构建第37-38页
     ·重组质粒真核表达第38-39页
3 试验结果第39-55页
   ·北京油鸡α-干扰素基因克隆第39-41页
     ·总 RNA 的提取第39页
     ·基因片段的扩增和纯化第39页
     ·重组体pGEM-T-α–IFN 提取后用特异性引物扩增目的基因结果第39页
     ·测序结果第39-41页
   ·北京油鸡α–干扰素基因真核表达载体的构建第41-42页
     ·重组体pGEM-T-α–IFN 双酶切片段回收第41页
     ·重组体pEGFP-C1-α–IFN 的提取第41-42页
   ·靶细胞培养第42-43页
     ·原代靶细胞生长情况及形态特征第42页
     ·传代靶细胞生长情况及形态特征第42-43页
   ·靶细胞质量鉴定第43-52页
     ·细胞活率检测第43-44页
     ·细胞生长曲线第44-45页
     ·微生物污染检测第45-46页
     ·核型分析第46-48页
     ·同工酶酶谱分析第48-50页
     ·脂质体介导绿色荧光蛋白质粒转染靶细胞第50-52页
   ·北京油鸡α–干扰素基因在靶细胞中的表达第52-55页
     ·脂质体介导法转染靶细胞第52页
     ·基因α–IFN 的亚细胞分布第52-55页
   ·阳性靶细胞的筛选第55页
   ·阳性靶细胞的鉴定第55页
4 讨论第55-58页
   ·RNA 的提取第55-56页
   ·目的基因的克隆第56页
   ·真核表达载体的选择与构建第56-57页
   ·脂质体介导法转染靶细胞及亚细胞分布第57-58页
5 结论第58-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-64页
作者简介第64页

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