摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 引言 | 第10-23页 |
·转基因动物的研究进展 | 第10-13页 |
·国内外转基因动物研究现状 | 第10-11页 |
·研究转基因动物技术与方法 | 第11-13页 |
·转基因动物研究的应用 | 第13页 |
·干扰素及其研究进展 | 第13-17页 |
·干扰素的分类 | 第14页 |
·干扰素的结构与性质 | 第14-15页 |
·干扰素的生物学活性 | 第15-16页 |
·禽类干扰素的研究进展 | 第16-17页 |
·转基因靶细胞的制备 | 第17-21页 |
·靶细胞培养 | 第17-18页 |
·靶细胞质量鉴定 | 第18-21页 |
·真核表达载体的构建 | 第21-23页 |
·转基因报告系统的研究进展 | 第21页 |
·绿色荧光蛋白表达载体 | 第21-23页 |
·本试验的意义 | 第23页 |
2 试验材料与方法 | 第23-39页 |
·试验材料 | 第23-28页 |
·靶细胞来源 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·试剂及配制 | 第24-28页 |
·试验方法 | 第28-39页 |
·靶细胞培养 | 第28-29页 |
·靶细胞质量鉴定 | 第29-33页 |
·目的基因的克隆 | 第33-37页 |
·重组质粒pEGFP-C1-α–IFN 的构建 | 第37-38页 |
·重组质粒真核表达 | 第38-39页 |
3 试验结果 | 第39-55页 |
·北京油鸡α-干扰素基因克隆 | 第39-41页 |
·总 RNA 的提取 | 第39页 |
·基因片段的扩增和纯化 | 第39页 |
·重组体pGEM-T-α–IFN 提取后用特异性引物扩增目的基因结果 | 第39页 |
·测序结果 | 第39-41页 |
·北京油鸡α–干扰素基因真核表达载体的构建 | 第41-42页 |
·重组体pGEM-T-α–IFN 双酶切片段回收 | 第41页 |
·重组体pEGFP-C1-α–IFN 的提取 | 第41-42页 |
·靶细胞培养 | 第42-43页 |
·原代靶细胞生长情况及形态特征 | 第42页 |
·传代靶细胞生长情况及形态特征 | 第42-43页 |
·靶细胞质量鉴定 | 第43-52页 |
·细胞活率检测 | 第43-44页 |
·细胞生长曲线 | 第44-45页 |
·微生物污染检测 | 第45-46页 |
·核型分析 | 第46-48页 |
·同工酶酶谱分析 | 第48-50页 |
·脂质体介导绿色荧光蛋白质粒转染靶细胞 | 第50-52页 |
·北京油鸡α–干扰素基因在靶细胞中的表达 | 第52-55页 |
·脂质体介导法转染靶细胞 | 第52页 |
·基因α–IFN 的亚细胞分布 | 第52-55页 |
·阳性靶细胞的筛选 | 第55页 |
·阳性靶细胞的鉴定 | 第55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
·RNA 的提取 | 第55-56页 |
·目的基因的克隆 | 第56页 |
·真核表达载体的选择与构建 | 第56-57页 |
·脂质体介导法转染靶细胞及亚细胞分布 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
作者简介 | 第64页 |