摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一部分 拟南芥耐盐突变体的筛选及相关基因的分析研究——AT6 | 第9-61页 |
综述 | 第11-23页 |
1.植物MAPK激酶的成员和分类,以及MAPK信号通路对于植物盐耐受的重要性 | 第11-16页 |
2.种子的萌发和植物激素之间的关系 | 第16-23页 |
材料和方法 | 第23-31页 |
1.pSKI105质粒DNA的农杆菌电激转化 | 第23页 |
2.pSKI105激活突变体的创建(浸花转化和除草剂筛选) | 第23-24页 |
3.耐盐萌发突变体的筛选 | 第24页 |
4.AT6突变体各生长阶段耐逆性状分析(盐胁迫、ABA、GA和乙烯敏感性分析) | 第24-25页 |
5.遗传分析 | 第25页 |
6.Tail-PCR确定AT6突变体中T-DNA的插入位点 | 第25-27页 |
7.Salk_004541和Salk_001982纯合体的鉴定 | 第27-28页 |
8.RT-PCR分析WT(Col-0)和突变体中AT1g73660基因和胁迫效应Marker gene的表达情况 | 第28-31页 |
结果 | 第31-43页 |
1.具有耐盐萌发表型的AT6突变体的获得 | 第31页 |
2.AT6突变体各个生长发育阶段的耐盐表型 | 第31-33页 |
3.AT6耐盐突变体的遗传分析和T-DNA插入位点的确定 | 第33-34页 |
4.RT-PCR验证AT6突变体中AT1g73660基因的功能缺失 | 第34页 |
5.PCR方法鉴定并获得Salk_004541和Salk_001982的纯合体株系以及纯合突变体的耐盐萌发表型分析实验 | 第34-36页 |
6.三个突变体的耐盐萌发实验的再一次证实 | 第36-37页 |
7.纯合的Salk_004541、纯合的Salk_001982和AT6萌发阶段对ABA和GA敏感性的分析 | 第37-38页 |
8.Salk_004541-1、Salk_001982-1和AT6萌发阶段对乙烯敏感性的分析 | 第38-40页 |
9.RT-PCR分析AT1g73660以及ABA或者GA相关基因的表达 | 第40-43页 |
讨论和分析 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-61页 |
第二部分 拟南芥耐盐突变体的筛选及相关基因的分析研究——AT13 | 第61-109页 |
综述 | 第63-73页 |
1.盐胁迫对植物造成严重危害以及植物的耐盐机制 | 第63-69页 |
2.根癌农杆菌介导的T-DNA激活转化系统的原理、特征和应用 | 第69-72页 |
3.植物物种中的功能未知蛋白的分类和基础特性 | 第72-73页 |
材料和方法 | 第73-81页 |
1.感受态细胞的制备 | 第73-74页 |
2.耐盐萌发突变体AT13的筛选 | 第74页 |
3.AT13突变体各生长阶段耐逆性状分析(盐胁迫,干旱胁迫,ABA敏感性) | 第74页 |
4.遗传分析 | 第74-75页 |
5.AT13突变体中T-DNA插入位点的确立 | 第75页 |
6.Salk_009978和Salk_010002纯合体的鉴定 | 第75-76页 |
7.花青素的提取 | 第76页 |
8.AT13突变体晚花性状的具体分析 | 第76页 |
9.pCB2002H/AT3g58110 promoter的构建 | 第76-79页 |
10.pCB2002H/AT3g58110 promoter的农杆菌电激转化 | 第79页 |
11.RT-PCR分析 | 第79-81页 |
实验结果 | 第81-91页 |
1.耐盐突变体AT13突变体的获得 | 第81页 |
2.AT13突变体仅在萌发期具有耐盐性状 | 第81-82页 |
3.AT13的遗传分析和T-DNA插入位点的确定 | 第82-83页 |
4.AT3g58110相关Salk line的获得和纯合体鉴定 | 第83-84页 |
5.RT-PCR验证三个AT3g58110基因功能突变体中AT3g58110基因的敲除 | 第84页 |
6.萌芽期,AT3g58110相关多个等位基因突变体的耐盐性状分析 | 第84-85页 |
7.萌芽期,AT13、Salk_009978和Salk_010002对ABA敏感性分析 | 第85-86页 |
8.AT13、Salk_009978和Salk_010002叶片深绿而且含有较高的花青素 | 第86-87页 |
9.AT13、纯合Salk_009978和纯合Salk_010002的晚花表型分析实验 | 第87-88页 |
10.AT3g58110启动子的活性分析(GUS染色分析和组织PCR) | 第88-91页 |
讨论和分析 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-109页 |
附录1 培养基的配置 | 第109-110页 |
附录2 分子实验所需溶液的配置 | 第110-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第113页 |