| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-31页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第15-21页 |
| ·胚胎干细胞的生物学特性 | 第15页 |
| ·胚胎干细胞的研究现状 | 第15-17页 |
| ·诱导多能干细胞的研究现状 | 第17-18页 |
| ·胚胎干细胞自我更新机制 | 第18-21页 |
| ·Tle4 基因的研究进展 | 第21-28页 |
| ·Tle 基因家族的结构 | 第21-23页 |
| ·Tle 基因家族的表达及作用 | 第23-24页 |
| ·Tle4 基因的结构 | 第24-25页 |
| ·Tle4 基因的功能 | 第25-26页 |
| ·Tle4 基因信号转导途径 | 第26-28页 |
| ·基因功能研究的进展 | 第28-30页 |
| ·生物信息学分析 | 第28页 |
| ·基因的亚细胞定位和时空表达谱分析 | 第28-29页 |
| ·基因转录调控研究 | 第29页 |
| ·细胞生化水平的功能研究 | 第29页 |
| ·细胞和个体水平基因的功能研究 | 第29-30页 |
| ·本研究的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 Tle4 基因的生物信息学分析 | 第31-38页 |
| ·材料与方法 | 第31-32页 |
| ·主要数据库 | 第31页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第31页 |
| ·Tle4 基因的结构分析 | 第31页 |
| ·Tle4 基因物种间保守性分析 | 第31-32页 |
| ·Tle4 基因的保守功能域及结构分析 | 第32页 |
| ·Tle4 基因的表达情况分析 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-37页 |
| ·Tle4 基因结构分析 | 第32-33页 |
| ·Tle4 基因物种间保守性分析 | 第33-34页 |
| ·Tle4 基因的保守功能域及结构分析 | 第34-35页 |
| ·Tle4 基因的表达情况分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37页 |
| ·结论 | 第37-38页 |
| 第三章 小鼠Tle4 基因5′端侧翼序列的转录调控分析 | 第38-61页 |
| ·材料 | 第38-42页 |
| ·菌种、载体、细胞株和实验动物 | 第38-39页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第39-40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40-41页 |
| ·主要试剂、溶液及耗材 | 第41-42页 |
| ·主要数据库及分子生物学软件 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列特征分析 | 第42-43页 |
| ·Tle4 基因在ES 细胞和F9 细胞的表达情况 | 第43-44页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列长片度的克隆 | 第44-45页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼缺失片段报告基因载体的构建 | 第45-46页 |
| ·定点突变报告基因载体的构建 | 第46-47页 |
| ·瞬时转染 | 第47页 |
| ·荧光素酶报告基因活性检测 | 第47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-57页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列特征分析结果 | 第47-50页 |
| ·Tle4 基因在ES 细胞和F9 细胞的表达情况 | 第50-51页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列长片度的克隆 | 第51页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼缺失片段报告基因载体的构建结果 | 第51-54页 |
| ·定点突变报告基因载体的构建结果 | 第54-55页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列活性分析 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列生物信息学分析 | 第58页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列长片段的克隆 | 第58页 |
| ·Tle4 基因5'端侧翼序列活性分析 | 第58-59页 |
| ·Tle4 基因核心调控区域定点突变 | 第59页 |
| ·结论 | 第59-61页 |
| 第四章 小鼠胚胎干细胞Tle4 基因RNA 干扰和过表达研究 | 第61-78页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·菌种、载体、细胞株和实验动物 | 第61页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第61-62页 |
| ·主要仪器设备 | 第62页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-68页 |
| ·MEF 细胞的分离 | 第62-63页 |
| ·MEF 细胞的传代培养与纯化 | 第63页 |
| ·MEF 细胞的冻存与复苏 | 第63页 |
| ·MEF 饲养层的制备 | 第63页 |
| ·ES 细胞的传代与扩大培养 | 第63-64页 |
| ·ES 细胞的冻存与复苏 | 第64页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第64页 |
| ·Tle4 基因在小鼠胚胎发育过程和EB 的表达检测 | 第64-65页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因敲低研究 | 第65-66页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因过表达研究 | 第66-67页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因的亚细胞定位研究 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-75页 |
| ·MEF 的生长特征 | 第68-69页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第69-71页 |
| ·Tle4 基因在小鼠胚胎发育过程和EB 的表达检测 | 第71页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因敲低研究 | 第71-73页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因过表达研究 | 第73-74页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因的亚细胞定位研究 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| ·MEF 的生长特征 | 第75页 |
| ·ES 细胞的鉴定 | 第75页 |
| ·Tle4 基因在小鼠胚胎发育过程和EB 的表达检测 | 第75-76页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因敲低研究 | 第76页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因过表达研究 | 第76-77页 |
| ·ES 细胞Tle4 基因的亚细胞定位研究 | 第77页 |
| ·结论 | 第77-78页 |
| 第五章 结论 | 第78-80页 |
| ·全文结论 | 第78页 |
| ·本研究的创新点 | 第78页 |
| ·下一步的研究思路 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简历 | 第92-93页 |
