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转Bcl-2水稻抗氧化胁迫及水稻边缘细胞发育调控的研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
第一章 文献综述第15-33页
 1 细胞程序性死亡---动物细胞凋亡第15-21页
   ·细胞凋亡的概述第15-16页
   ·细胞凋亡调控途径第16-18页
     ·死亡受体途径第16-17页
     ·线粒体途径第17-18页
   ·细胞凋亡相关基因第18-21页
     ·Bcl-2第18-19页
     ·Caspase第19-21页
 2 植物细胞程序性死亡第21-27页
   ·植物细胞程序性死亡概述第21页
   ·植物PCD的检测方法第21-23页
   ·植物细胞程序性死亡相关基因的研究第23-26页
     ·metacaspases第24-25页
     ·VPE第25-26页
   ·动物抗凋亡基因和植物PCD第26-27页
 3 高等植物根边缘细胞的概况第27-33页
   ·边缘细胞的特征第28-29页
   ·边缘细胞的粘液层及其成分第29页
   ·边缘细胞mRNA表达和蛋白质合成的特异性第29页
   ·边缘细胞产生的影响因素第29-30页
   ·边缘细胞的作用第30页
     ·生物胁迫第30页
     ·非生物胁迫第30页
   ·边缘细胞发育相关基因的研究第30-33页
第二章 Bcl-2通过抑制PCD提高水稻抗氧化胁迫能力第33-58页
 前言第33页
 1 实验材料第33页
 2 实验方法第33-43页
   ·转基因植株分子鉴定第33-40页
     ·水稻基因组DNA的提取第33-34页
     ·转基因水稻PCR检测第34-35页
     ·水稻总RNA的提取第35-36页
     ·RT-PCR第36-37页
     ·Northern blot第37-40页
   ·生理指标检测第40-41页
     ·水稻种子萌发第40页
     ·水稻根长测定第40页
     ·H_2O_2处理第40-41页
     ·叶片叶绿素含量的测定第41页
   ·凋亡检测第41-43页
     ·DNA laddering第41页
     ·FDA染色第41页
     ·TUNEL第41-43页
 3 实验结果和分析第43-55页
   ·Bcl-2转基因水稻的基因表达分析第43页
   ·Bcl-2可提高水稻的抗氧化胁迫能力第43-48页
   ·Bcl-2通过抑制PCD来提高水稻的抗氧化胁迫能力第48-51页
   ·Bcl-2通过调节水稻VPE的表达来抑制PCD的产生第51-55页
 4 讨论第55-58页
   ·Bcl-2通过抑制PCD提高水稻对氧化胁迫的耐受性第55-56页
   ·Bcl-2通过调节VPE的表达抑制水稻中氧化胁迫诱导的PCD的产生第56-57页
   ·后续实验展望第57-58页
第三章 水稻边缘细胞的发育调控第58-81页
 前言第58页
 1 实验材料第58页
 2 实验方法第58-68页
   ·水稻边缘细胞的数目统计和活性检测第59-60页
     ·水稻种子萌发及其培养第59页
     ·边缘细胞数目统计和去除第59页
     ·边缘细胞的活性检测第59页
     ·果胶甲基酯酶PME的提取及其活性检测第59-60页
     ·植物激素对RBC发育的影响第60页
     ·数据分析第60页
   ·水稻果胶甲基酯酶的克隆和农杆菌介导的转化第60-68页
     ·水稻果胶甲基酯酶基因家族成员的序列和表达分析第60页
     ·pMD19-T-OsPME-1构建第60-64页
     ·水稻表达载体构建第64-65页
     ·农杆菌介导法转化水稻第65-67页
     ·转基因植株的获得和基因表达检测第67-68页
 3 实验结果和分析第68-78页
   ·水稻根边缘细胞的概况第68-72页
     ·水稻根边缘细胞的数目变化第68-69页
     ·激素对水稻根边缘细胞发育的影响第69-70页
     ·离体收集的水稻边缘细胞活性检测第70-71页
     ·根冠果胶甲基酯酶(PME)活性与边缘细胞发育的相关性第71-72页
   ·水稻果胶甲基酯酶基因的克隆和功能分析第72-78页
     ·OsPME-1的序列和表达分析第72-74页
     ·OsPME-1的克隆第74-75页
     ·pMD19-T-OsPME-1构建第75-76页
     ·植物转化载体构建第76页
     ·农杆菌介导的转基因水稻的获得第76-78页
 4 讨论第78-81页
   ·水稻边缘细胞的发育模式第78-79页
   ·水稻果胶甲基酯酶基因功能的研究第79-81页
参考文献第81-100页
附录A第100-102页
附录B第102-108页
攻读学位期间研究成果第108-109页
致谢第109页

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