| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略表(ABBREVIATION) | 第10-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-28页 |
| ·HMG及其生物学作用 | 第13-14页 |
| ·HMGA及其生物学作用 | 第14-17页 |
| ·HMGA的结构特点 | 第14-15页 |
| ·HMGA的功能 | 第15-17页 |
| ·HMGA在胚胎发生和分化中的作用 | 第15-16页 |
| ·HMGA在基因表达中的调控作用 | 第16页 |
| ·HMGA在病毒整合和表达中的作用 | 第16页 |
| ·HMGA在肿瘤转化中的作用 | 第16-17页 |
| ·HMGB及其生物学作用 | 第17-23页 |
| ·HMGB的结构特点 | 第17-18页 |
| ·HMGB的功能 | 第18-23页 |
| ·HMGB1与DNA作用 | 第18-19页 |
| ·HMGB参与增强体的形成 | 第19页 |
| ·HMGB1转录调节作用 | 第19页 |
| ·HMGB1与细胞凋亡 | 第19-20页 |
| ·HMGB1诱导炎性反应 | 第20-21页 |
| ·HMGB1参与细胞迁移和特异性分化 | 第21页 |
| ·HMGB1胞外作用的信号转导机制 | 第21-22页 |
| ·HMGB1与疾病关系 | 第22-23页 |
| ·HMGB1的抗菌作用 | 第23页 |
| ·HMGN及其生物学作用 | 第23-24页 |
| ·HMGN2及其生物学作用 | 第24-28页 |
| 2 研究目的与意义 | 第28-29页 |
| 3 材料与方法 | 第29-42页 |
| ·材料 | 第29-34页 |
| ·HMGN2序列 | 第29-30页 |
| ·质粒及菌株 | 第30页 |
| ·酶、主要试剂和试剂盒 | 第30-31页 |
| ·主要溶液的配制 | 第31-33页 |
| ·抗生素类 | 第31页 |
| ·细菌培养基 | 第31页 |
| ·质粒抽提相关溶液 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第32页 |
| ·Western blot相关溶液 | 第32-33页 |
| ·原核表达提取、纯化表达蛋白的相关溶液 | 第33页 |
| ·体外抑菌试验的相关溶液 | 第33页 |
| ·其它试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-42页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第34-35页 |
| ·PCR产物的电泳检测 | 第35页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第35页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第35页 |
| ·大肠杆菌DH5α、BL21感受态的制备(氯化钙法) | 第35-36页 |
| ·质粒的转化 | 第36页 |
| ·质粒的小量制备(碱裂解法) | 第36页 |
| ·序列测定 | 第36页 |
| ·DNA重组技术(DNA酶切、连接) | 第36-37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第38页 |
| ·重组融合蛋白的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·鉴定蛋白表达的形式 | 第39页 |
| ·包涵体的制备 | 第39页 |
| ·包涵体的纯化方法 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE检测和Western-blot鉴定 | 第40页 |
| ·体外抑菌试验 | 第40-42页 |
| ·微量肉汤法 | 第40-41页 |
| ·琼脂糖抑菌试验 | 第41-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-50页 |
| ·HMGN2基因的扩增 | 第42页 |
| ·HMGN2基因的克隆与鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组表达质粒pKG-HMGN2和PET-32a(+)-HMGN2的酶切鉴定 | 第43-45页 |
| ·重组蛋白的表达纯化和活性检测 | 第45-47页 |
| ·His-HMGN2的表达纯化和活性检测 | 第45-46页 |
| ·GST-HMGN2的表达纯化和活性检测 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白HMGN2的体外抑菌试验 | 第47-50页 |
| ·微量肉汤法 | 第47页 |
| ·琼脂糖抑菌试验 | 第47-50页 |
| 5 讨论 | 第50-55页 |
| ·表达系统的选择 | 第50页 |
| ·表达载体的选择 | 第50-52页 |
| ·牛源HMGN2重组蛋白的表达及包涵体的提取 | 第52-53页 |
| ·牛源HMGN2重组蛋白的体外抑菌试验 | 第53-55页 |
| 6 小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
