| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-49页 |
| ·燃料乙醇的应用和发展 | 第18-22页 |
| ·传统方式的乙醇生产所面临的问题 | 第20-21页 |
| ·木质纤维素发酵生产乙醇的现状及前景 | 第21-22页 |
| ·代谢利用木糖产乙醇的菌株 | 第22-32页 |
| ·自然界中利用木糖发酵产生乙醇的菌株 | 第23-26页 |
| ·木糖代谢途径 | 第26-27页 |
| ·酵母菌的木糖代谢工程改造 | 第27-30页 |
| ·大肠杆菌木糖代谢产生乙醇的遗传工程改造 | 第30-32页 |
| ·运动发酵单胞菌代谢产乙醇的代谢工程改造 | 第32-39页 |
| ·运动发酵单胞菌的基本特征 | 第32-35页 |
| ·Z.mobilis的基因组序列 | 第35-36页 |
| ·重组Z.mobilis代谢木糖产乙醇的研究进展 | 第36-39页 |
| ·副产物木糖醇对重组Z.mobilis菌体生长的抑制 | 第39-41页 |
| ·葡萄糖果糖氧化还原酶 | 第41-44页 |
| ·糖运输 | 第44-46页 |
| ·本论文立题依据 | 第46-47页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第47-49页 |
| 第二章 代谢木糖重组Zymomonas mobilis的构建 | 第49-72页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-56页 |
| ·分子生物学方法 | 第50-54页 |
| ·感受态制备 | 第54页 |
| ·运动发酵单胞菌电转化方法 | 第54-55页 |
| ·粗酶液制备 | 第55页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第55页 |
| ·酶活检测 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-70页 |
| ·相关基因的克隆及载体的构建 | 第56-64页 |
| ·pUC19-Pgap-xylA-xylB和pUC19-Peno-talB-tktA重组质粒测序 | 第64-65页 |
| ·pBBR-Pgap-xylA-xylB-Peno-talB-tktA重组质粒的构建 | 第65-66页 |
| ·运动发酵单胞菌的电转化 | 第66-67页 |
| ·重组运动发酵单胞菌验证 | 第67-69页 |
| ·重组菌Z.mobilis(pBBR-xyl)相关酶活测定 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-71页 |
| 本章小结 | 第71-72页 |
| 第三章 重组Zymomonas mobilis的木糖发酵 | 第72-84页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·菌株 | 第72页 |
| ·培养基 | 第72-73页 |
| ·方法 | 第73页 |
| ·生长曲线的测定 | 第73页 |
| ·葡萄糖木糖共发酵实验操作 | 第73页 |
| ·发酵产物的检测 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-79页 |
| ·Z.mobilis CP4和Z.mobilis(pBBR-xyl)的葡萄糖发酵 | 第73-75页 |
| ·Z.mobilis CP4和Z.mobilis(pBBR-xyl)葡萄糖和木糖共发酵 | 第75-78页 |
| ·Z.mobilis CP4和Z.mobilis(pBBR-xyl)的木糖发酵 | 第78-79页 |
| 讨论 | 第79-83页 |
| 本章小结 | 第83-84页 |
| 第四章 Zymomonas mobilis中木糖醇形成机制的研究 | 第84-109页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·菌株和质粒 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85-86页 |
| ·主要试剂 | 第86页 |
| ·方法 | 第86-90页 |
| ·分子生物学方法 | 第86-88页 |
| ·BL21感受态制备 | 第88页 |
| ·蛋白的表达 | 第88页 |
| ·粗酶液的制备 | 第88页 |
| ·蛋白的纯化 | 第88-89页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第89页 |
| ·酶活检测 | 第89页 |
| ·GFOR催化反应相关常数的测定 | 第89-90页 |
| ·结果及分析 | 第90-106页 |
| ·相关基因的克隆及载体的构建 | 第90-94页 |
| ·蛋白的诱导表达及纯化 | 第94页 |
| ·GFOR催化木糖反应产物的鉴定 | 第94-96页 |
| ·GFOR催化木糖的动力学过程 | 第96-100页 |
| ·GFOR催化反应过程中底物之间的关系 | 第100-102页 |
| ·GFOR催化木糖生成木糖醇反应机制的确定 | 第102-106页 |
| 讨论 | 第106-107页 |
| 本章小结 | 第107-109页 |
| 第五章 运动发酵单胞菌葡萄糖促扩散蛋白介导木糖运输机制分析及进化改造平台初建 | 第109-124页 |
| ·材料 | 第110-111页 |
| ·菌株和质粒 | 第110页 |
| ·培养基 | 第110-111页 |
| ·分子生物操作试剂 | 第111页 |
| ·方法 | 第111-114页 |
| ·分子生物学方法 | 第111-113页 |
| ·ZSC112ΔptsHI-crr和ZSC112ΔptsHI-crr-xylfgh感受态制备 | 第113页 |
| ·ZSC112ΔptsHI-crr的转化及敲除 | 第113页 |
| ·ZSC112ΔptsHI-crr-xylfgh的转化 | 第113页 |
| ·ZSC112ΔptsHI-crr-xylfgh(pUC19-glf-glk)在葡萄糖和木糖中的恢复生长 | 第113-114页 |
| ·结果与分析 | 第114-122页 |
| ·葡萄糖木糖代谢缺陷菌株ZSC112ΔptsHI-crr-xylfgh的获取及验证 | 第114-118页 |
| ·GLF-GLK重组表达质粒构建 | 第118-121页 |
| ·GLF-GLK对ZSC112ΔptsHI-crr-xylfgh在葡萄糖和木糖碳源上生长缺陷的恢复 | 第121-122页 |
| 讨论 | 第122-123页 |
| 本章小结 | 第123-124页 |
| 全文总结及展望 | 第124-127页 |
| 参考文献 | 第127-139页 |
| 攻读学位期间发表的主要学术论文 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140-142页 |
| 外文写作一 | 第142-158页 |
| 外文写作二 | 第158-170页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第170页 |
