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大豆根瘤菌与宿主共生能力差异的遗传学研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
缩略词表第12-13页
第一章 绪论第13-31页
    1.1 引言第13页
    1.2 豆科植物和根瘤菌建立共生关系第13-15页
        1.2.1 根瘤菌的定殖第13页
        1.2.2 侵染线的形成第13-14页
        1.2.3 根瘤的形成第14-15页
        1.2.4 固氮作用的微氧环境第15页
    1.3 豆血红蛋白第15-18页
        1.3.1 豆血红蛋白第15-16页
        1.3.2 血红素第16-17页
        1.3.3 血红素合成相关的基因在共生过程中的作用第17-18页
    1.4 营养物质的交换第18-21页
        1.4.1 类菌体的NH_4~+吸收第18-19页
        1.4.2 植物的NH_4~+吸收第19-21页
    1.5 根瘤菌和宿主植物之间的选择性第21-23页
        1.5.1 类黄酮第21页
        1.5.2 结瘤因子第21-22页
        1.5.3 表面多糖第22-23页
    1.6 三型分泌系统(Type Ⅲ secretion system)第23-26页
        1.6.1 三型分泌系统对共生作用的影响第23-25页
        1.6.2 效应因子第25-26页
        1.6.3 植物基因第26页
    1.7 反硝化作用第26-28页
        1.7.1 反硝化作用第26-28页
        1.7.2 反硝化作用对共生过程的影响第28页
    1.8 本研究的目的和意义第28-31页
第二章 材料与方法第31-43页
    2.1 实验材料第31-33页
        2.1.1 菌株与质粒第31-33页
        2.1.2 试剂和培养基第33页
    2.2 实验方法第33-43页
        2.2.1 基因组提取第33-34页
        2.2.2 质粒提取第34页
        2.2.3 转化第34-35页
        2.2.4 三亲本结合试验第35页
        2.2.5 载体构建第35-36页
        2.2.6 GS抗体制备第36页
        2.2.7 Westen blot第36-37页
        2.2.8 定量测定GS硝化水平第37-38页
        2.2.9 无缝克隆第38页
        2.2.10 固氮酶活性测定第38-39页
        2.2.11 谷氨酰胺合成酶(GS)活性测定第39页
        2.2.12 根瘤提取液的制备第39页
        2.2.13 蛋白含量测定第39页
        2.2.14 Tn5突变体库构建第39-40页
        2.2.15 Tn5转座子插入位点鉴定第40页
        2.2.16 蛭石接种试验第40-43页
第三章 三株Sinorhizobium菌株的共生适应能力差异的机制第43-67页
    3.1 反硝化基因簇在共生过程中的作用第44-48页
        3.1.1 反硝化基因簇是45436与宿主植物共生所必需的第45-46页
        3.1.2 反硝化基因簇的删除导致05631与宿主植物的共生能力下降第46-48页
    3.2 反硝化基因簇中的关键基因第48-52页
        3.2.1 45436 nap突变体与冀豆17和野大豆的共生能力下降第48-50页
        3.2.2 05631 hemN突变体与野大豆的共生能力下降第50-52页
    3.3 hemN在45436、05631和05684与宿主植物共生过程中的作用第52-57页
        3.3.1 hemN1是45436和05631与野大豆共生所必需的第52-55页
        3.3.2 hemN1和hemN2是05684与野大豆共生所必需的第55-57页
    3.4 45436的hemN1不能回补05684△hemN1的共生表型第57-58页
    3.5 HemN1结构的分析第58-60页
    3.6 45436和05631的hemN1突变体共生表型为Nod~+Fix~+,而05684的hemN1突变体共生表型为Nod~(+/-)Fix~-第60-61页
    3.7 45436△hemN1根瘤中谷氨酰胺合成酶活性降低第61-63页
    3.8 分析与讨论第63-67页
第四章 Sinorhizobium spp.与冀豆17共生不匹配的遗传基础第67-77页
    4.1 筛选Tn5随机插入突变体库获得与冀豆17匹配的突变体第68-70页
    4.2 三型分泌系统是05631与冀豆17匹配性的一个决定因素第70-71页
    4.3 IS的转座导致基因突变第71-72页
    4.4 进化克隆可以与冀豆17和野大豆建立稳定的共生关系第72-74页
        4.4.1 1进化克隆可以与冀豆17建立稳定的共生关系第72-73页
        4.4.2 进化克隆与野大豆建立稳定的共生关系第73-74页
    4.5 分析与讨论第74-77页
第五章 结论和展望第77-81页
参考文献第81-97页
附录第97-109页
致谢第109-110页
个人简历第110页

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