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金褐霉素基因工程菌的构建及表达产物的纯化

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
第一章 文献综述第14-45页
   ·金褐霉素简介第14-15页
   ·金褐霉素的结构和理化性质第15-19页
   ·金褐霉素的研究概况第19-30页
   ·链霉菌的基因组研究进展第30-35页
   ·链霉菌次生代谢研究进展第35-42页
   ·本课题的立题依据与目的意义第42-44页
   ·本研究的总工艺流程第44-45页
第二章 金褐霉素检测方法的建立第45-56页
   ·材料与方法第46-48页
     ·菌种第46页
     ·试验药品第46页
     ·主要仪器第46-47页
     ·试验方法第47-48页
   ·结果与分析第48-54页
     ·检测波长的选择第48-49页
     ·流动相中甲醇与冰醋酸水溶液的比例对保留时间的影响第49-50页
     ·流动相中冰醋酸含量对保留时间的影响第50-51页
     ·冰醋酸含量对金褐霉素峰形的影响第51页
     ·金褐霉素标准品与发酵样品的色谱峰第51-52页
     ·金褐霉素的标准曲线第52-53页
     ·精密度和回收率试验第53页
     ·实际样品分析第53-54页
   ·结论第54页
   ·讨论第54-56页
第三章 PimM基因在金褐链霉菌中的表达及对金褐霉素合成的影响第56-81页
   ·材料与方法第57-66页
     ·菌种和质粒第57页
     ·培养基第57-58页
     ·缓冲液及试剂第58-59页
     ·抗生素及其使用浓度第59-60页
     ·酶及化学试剂第60页
     ·仪器设备第60页
     ·方法第60-66页
   ·结果与分析第66-79页
     ·PimM基因的PCR扩增第66-68页
     ·质粒PBJERM的构建第68-72页
     ·质粒PBJPIM的构建第72-77页
     ·重组质粒PBJPIM的转化第77页
     ·转化子的发酵研究第77-79页
   ·结论第79-80页
   ·讨论第80-81页
第四章 PimM的一个同源基因PimM-AURJ3M在金褐链霉菌中的表达及对金褐霉素合成的影响第81-98页
   ·材料与方法第82-83页
   ·结果与分析第83-96页
     ·PimM基因多序列比对第83-84页
     ·AURJ3M基因的PCR扩增及克隆至T-载体第84-86页
     ·SYAU0709的AURJ3M与JCM4693的PimM的同源性比较第86-88页
     ·质粒PBJJ3M的构建第88-93页
     ·重组质粒PBJJ3M的转化第93-94页
     ·转化子的发酵研究第94-95页
     ·基因AURJ3M的表达对金褐链霉菌菌体生长与金褐霉素合成的影响第95-96页
   ·结论第96-97页
   ·讨论第97-98页
第五章 金褐霉素高产菌株5L发酵罐放大培养及纯化研究第98-113页
   ·材料与方法第98-102页
     ·菌株第98页
     ·培养基第98-99页
     ·试验药品第99页
     ·主要仪器第99页
     ·试验方法第99-102页
   ·结果与分析第102-112页
     ·摇瓶剪切力模拟试验第102页
     ·搅拌速度对分批发酵的影响第102-104页
     ·最适接种量的确定第104-105页
     ·大孔吸附树脂对金褐霉素的吸附解吸性能比较第105页
     ·X-5树脂对金褐霉素的静态吸附与解吸曲线第105-106页
     ·pH值对X-5树脂吸附和解析的影响第106-107页
     ·甲醇的浓度对X-5树脂解析的影响第107页
     ·上柱流速对树脂吸附的影响第107-108页
     ·洗脱流速对树脂解吸效果的影响第108页
     ·动态解吸曲线第108-109页
     ·样品结晶第109页
     ·样品的结构鉴定第109-112页
   ·结论第112页
   ·讨论第112-113页
第六章 结论与展望第113-115页
   ·主要结论第113-114页
   ·本研究的创新点第114页
   ·展望第114-115页
参考文献第115-130页
附录第130-137页
致谢第137-138页
攻读博士期间发表学术论文第138-139页
论文图表统计第139页

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