| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-29页 |
| 1 蔬菜抗根结线虫研究进展及生物技术的应用 | 第11-13页 |
| ·蔬菜抗根结线虫研究进展 | 第11-13页 |
| ·生物技术的应用 | 第13页 |
| 2 植物基因工程研究进展 | 第13-22页 |
| ·转基因技术研究概况 | 第13-14页 |
| ·转基因作物在世界各地的种植情况 | 第14页 |
| ·根癌农杆菌介导和花粉管通道法介导的遗传转化 | 第14-16页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化机理 | 第14-15页 |
| ·花粉管通道法(pollen-tube pathway)介导的转化原理 | 第15-16页 |
| ·花粉管通道法的应用情况 | 第16页 |
| ·转基因沉默现象及消弱办法 | 第16-20页 |
| ·转基因沉默及产生原因 | 第16-17页 |
| ·转基因沉默的不同类型及引发因素 | 第17-19页 |
| ·消弱转基因沉默的方法 | 第19-20页 |
| ·转基因植物的筛选与检测 | 第20-22页 |
| ·PCR检测 | 第20页 |
| ·RT-PCR和Northern杂交 | 第20-21页 |
| ·点杂交和Southern杂交 | 第21页 |
| ·免疫技术检测法 | 第21-22页 |
| ·标记基因的使用 | 第22页 |
| 3 黄瓜转基因技术研究进展 | 第22-26页 |
| ·黄瓜再生技术体系研究进展 | 第23-25页 |
| ·基因型 | 第23-24页 |
| ·苗龄 | 第24页 |
| ·外植体类型 | 第24页 |
| ·激素的添加 | 第24-25页 |
| ·黄瓜遗传转化研究进展 | 第25-26页 |
| 4 烟草遗传转化研究进展简介 | 第26-27页 |
| 5 研究目的及意义 | 第27-29页 |
| 第二章 载体的构建和在烟草上的转化 | 第29-53页 |
| 1 材料和方法 | 第29-40页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·试验材料 | 第29页 |
| ·菌株 | 第29页 |
| ·质粒载体 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·试验地点 | 第30页 |
| ·所用引物 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-40页 |
| ·表达载体构建过程中所涉及的试验方法 | 第31-34页 |
| ·烟草高频再生体系的建立 | 第34-35页 |
| ·抗根结线虫基因对烟草的转化 | 第35-38页 |
| ·杂交验证 | 第38-40页 |
| 2 结果和分析 | 第40-51页 |
| ·pCAMBIA1301-22-21和pCAMBIA1301-16D基因表达载体的构建体系 | 第40-44页 |
| ·流程图 | 第40页 |
| ·pCAMBIA1301-22-21和pCAMBIA1301-16D表达载体的检测结果 | 第40-44页 |
| ·烟草叶片外植体再生体系的建立 | 第44-46页 |
| ·不同激素配比对芽诱导的影响 | 第44-45页 |
| ·不同生根培养基对根的诱导 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导的黄瓜遗传转化体系 | 第46-48页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化效率的影响 | 第46-47页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第47-48页 |
| ·潮霉素(Hyg)对外植体敏感性的测定 | 第48页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第48-50页 |
| ·GUS染色法的初步鉴定 | 第48-49页 |
| ·PCR检测 | 第49-50页 |
| ·Southern blot杂交的结果 | 第50-51页 |
| 3 讨论与结论 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·GUS染色检测 | 第51页 |
| ·转基因植株的检测 | 第51-52页 |
| ·展望 | 第52页 |
| ·结论 | 第52-53页 |
| 第三章 根结线虫基因在黄瓜上的转化 | 第53-62页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·质粒载体 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-55页 |
| ·黄瓜高效再生体系的建立 | 第53-54页 |
| ·根癌农杆菌介导的黄瓜遗传转化 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·黄瓜再生体系的建立 | 第55-56页 |
| ·不同苗龄对黄瓜外植体再生频率的影响 | 第55页 |
| ·三种物质不同配比对黄瓜外植体再生频率的影响 | 第55-56页 |
| ·不同预培养天数对转化的影响 | 第56页 |
| ·影响黄瓜遗传转化的因素 | 第56-57页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化的影响 | 第56-57页 |
| ·潮霉素(Hyg)浓度对转化频率的影响 | 第57页 |
| ·黄瓜遗传转化结果 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| ·对作物离体再生的外界影响因素 | 第58-60页 |
| ·AgNO_3浓度对作物离体再生的影响 | 第58-59页 |
| ·ABA浓度对作物离体再生的影响 | 第59页 |
| ·潮霉素在转化中的应用 | 第59页 |
| ·Carb的应用 | 第59-60页 |
| ·农杆菌侵染 | 第60页 |
| 4 结论 | 第60-61页 |
| ·黄瓜表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·黄瓜组织培养 | 第61页 |
| 5 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 附录 | 第70-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介 | 第74页 |
