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淀粉合成相关基因对玉米遗传转化的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第1章 文献综述第12-28页
   ·玉米淀粉的研究进展第12-15页
     ·玉米淀粉及其结构第12-14页
     ·玉米淀粉的合成第14-15页
   ·玉米直链淀粉合成相关酶第15-19页
     ·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(ADP-glucose pyrophosphorylase)第15-16页
     ·颗粒结合型淀粉合成酶(IGranule-bound starch synthase I)第16-17页
     ·可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)第17-18页
     ·大麦α-淀粉酶抑制蛋白基因 Isa-H1第18页
     ·胚乳特异性启动子 RP5 和 HorD第18-19页
   ·玉米遗传转化的研究进展第19-24页
     ·遗传转化的受体系统第19-20页
     ·农杆菌介导法第20-22页
     ·农杆菌介导法影响因素第22页
     ·花粉管通道法第22-23页
     ·基因枪法第23-24页
     ·PEG 介导法第24页
     ·电激法第24页
   ·玉米多基因共转化的研究进展第24-25页
   ·转基因植物的检测方法第25-26页
     ·PCR 快速检测法第25页
     ·Southern 杂交第25-26页
   ·测定玉米完整籽粒淀粉含量的研究第26页
   ·本实验的研究目的和意义第26-28页
第2章 目的基因的克隆与植物表达载体的构建第28-50页
   ·实验材料第28-29页
   ·实验药品第29-31页
     ·实验试剂第29-30页
     ·引物设计第30页
     ·实验中使用的培养基及溶液第30-31页
   ·实验仪器第31页
   ·实验方法第31-43页
     ·大麦 Betzes 基因组 DNA 的提取第31-32页
     ·大麦 Betzes 胚乳特异启动子 HorD 克隆第32-33页
     ·小麦中国春胚乳总 RNA 的提取第33-34页
     ·cDNA 第一链的合成第34页
     ·RT-PCR 克隆小麦 GBSSI 基因第34-35页
     ·目的片段回收第35-36页
     ·目的片段与克隆载体连接第36-37页
     ·大肠杆菌感受态(TOP10)细胞的制备第37页
     ·重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第37-38页
     ·质粒 DNA 的提取第38-39页
     ·重组质粒的 PCR 鉴定第39-40页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第40页
     ·测序第40-41页
     ·表达载体构建第41-43页
   ·实验结果第43-48页
     ·DNA 与 RNA 的提取、cDNA 的合成第43-45页
     ·胚乳特异性启动子和小麦中国春 GBSSI 基因的克隆第45-46页
     ·植物表达载体的构建第46-48页
   ·讨论第48-50页
     ·小麦中国春胚乳 GBSSI 基因的选择和克隆时遇到的问题第48页
     ·启动子的选择第48-49页
     ·改造载体的选择第49页
     ·酶切位点的选择第49-50页
第3章 农杆菌介导淀粉合成相关基因的遗传转化第50-73页
   ·以体细胞胚胎为受体材料的遗传转化第50-65页
     ·实验材料第50页
     ·实验仪器及药品第50-51页
     ·培养基配方及试剂配制第51-53页
     ·实验方法第53-57页
     ·实验结果第57-63页
     ·讨论第63-65页
   ·以幼胚为受体材料的遗传转化第65-73页
     ·实验材料第65页
     ·实验仪器及药品第65-66页
     ·培养基配方第66页
     ·实验方法第66-67页
     ·实验结果第67-73页
第4章 花粉管通道法介导淀粉合成相关基因的遗传转化第73-84页
   ·实验材料第73页
     ·菌株与表达载体第73页
     ·植物材料第73页
   ·实验仪器及药品第73-74页
     ·实验仪器第73页
     ·实验中需要用到的引物第73-74页
     ·实验药品第74页
   ·实验方法第74-76页
     ·质粒 DNA 的准备第74页
     ·质粒 DNA 的注入第74-75页
     ·抗性植株的筛选第75页
     ·植株的分子检测第75页
     ·籽粒胚乳的分子检测第75-76页
   ·实验结果第76-82页
     ·花粉管通道法获得的转化材料第76-77页
     ·抗性筛选第77-78页
     ·分子检测第78-81页
     ·淀粉检测结果第81-82页
   ·讨论第82-84页
     ·花粉管通道法的优劣及其注意事项第82-83页
     ·淀粉含量检测第83-84页
全文结论第84-85页
参考文献第85-96页
致谢第96-97页
个人简介及科研成果第97页

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