| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 罗汉果研究进展 | 第12-37页 |
| 1 罗汉果生药学的研究 | 第12-15页 |
| ·生物学特性 | 第12页 |
| ·罗汉果名称的由来 | 第12-13页 |
| ·种质资源的收集及利用 | 第13-15页 |
| 2 罗汉果化学成分的研究 | 第15-18页 |
| ·葫芦烷三萜苷类 | 第15-16页 |
| ·蛋白质、氨基酸类 | 第16页 |
| ·黄酮类 | 第16-17页 |
| ·甘露醇 | 第17页 |
| ·单糖及多糖类 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸类 | 第18页 |
| ·其他成分 | 第18页 |
| 3 罗汉果药理方面的研究 | 第18-19页 |
| ·止咳祛痰作用 | 第18页 |
| ·免疫作用 | 第18页 |
| ·降血糖作用 | 第18-19页 |
| ·抗癌作用 | 第19页 |
| ·抗氧化活性作用 | 第19页 |
| ·毒性 | 第19页 |
| ·对肠胃的影响 | 第19页 |
| 4 罗汉果组织培养及分子生物学方面的研究 | 第19-20页 |
| 5 罗汉果苷生物合成途径的探讨 | 第20-27页 |
| 6 展望 | 第27页 |
| 参考文献 | 第27-37页 |
| 第二章 罗汉果不同时期果实内含物变化规律 | 第37-48页 |
| 一 引言 | 第37-40页 |
| 1 罗汉果苷类研究 | 第37-38页 |
| 2 葡萄糖在罗汉果苷从低糖苷向高糖苷转化中起关键作用 | 第38-39页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 4 研究内容 | 第40页 |
| 二 材料与方法 | 第40-42页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验试剂 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-42页 |
| ·甜苷ⅡE、Ⅲ、Ⅴ的提取及检测 | 第41页 |
| ·糖类成分及淀粉的提取及测定 | 第41-42页 |
| 三 结果与分析 | 第42-44页 |
| 1 罗汉果苷类标准品保留时间 | 第42页 |
| 2 苷类成分含量 | 第42-43页 |
| 3 糖类成分含量 | 第43-44页 |
| 四 讨论 | 第44-45页 |
| 1 罗汉果苷类的变化规律 | 第44-45页 |
| 2 糖类成分变化规律 | 第45页 |
| 五 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 第三章 利用高通量测序技术研究罗汉果果实的转录组及表达谱 | 第48-82页 |
| 一 引言 | 第48-55页 |
| 1 差异表达基因研究方法 | 第48-54页 |
| ·SSH文库 | 第48-49页 |
| ·基因芯片 | 第49-51页 |
| ·EST文库筛选技术 | 第51-52页 |
| ·第二代高通量测序技术 | 第52-54页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第54-55页 |
| 3 研究的内容 | 第55页 |
| 二 材料与方法 | 第55-60页 |
| 1 实验材料 | 第55-56页 |
| ·植物材料 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-60页 |
| ·总RNA的提取(改良Trizol法) | 第56-57页 |
| ·转录组测序 | 第57-59页 |
| ·表达谱测序 | 第59-60页 |
| 三 结果与分析 | 第60-72页 |
| 1 RNA提取 | 第60页 |
| 2 转录组测序 | 第60-67页 |
| ·原始测序数据产量 | 第60页 |
| ·中级分析结果 | 第60-67页 |
| 3 表达谱测序 | 第67-72页 |
| ·原始数据统计 | 第67-69页 |
| ·基因注释及差异表达基因的筛选 | 第69页 |
| ·罗汉果苷生物合成相关基因表达水平 | 第69-70页 |
| ·候选P450的筛选 | 第70-71页 |
| ·候选GT的筛选 | 第71-72页 |
| 四 讨论 | 第72-77页 |
| 1 RNA提取方法的选择 | 第72-73页 |
| 2 高通量测序技术在基因挖掘中的作用 | 第73-74页 |
| 3 罗汉果生物合成途径相关酶的挖掘 | 第74页 |
| 4 转录组和表达潜的结合为基因克隆提供了新的思路 | 第74-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 第四章 罗汉果苷生物合成关键酶的RACE克隆及分析 | 第82-190页 |
| 一 引言 | 第82-85页 |
| 1 全长cDNA克隆的策略 | 第82页 |
| 2 RACE技术 | 第82-83页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第83-84页 |
| 4 研究的内容 | 第84-85页 |
| 二 材料与方法 | 第85-90页 |
| 1 材料与方法 | 第85-86页 |
| ·试验材料 | 第85页 |
| ·主要试剂 | 第85页 |
| ·主要仪器 | 第85-86页 |
| 2 实验方法 | 第86-90页 |
| ·RACE全长克隆 | 第86-87页 |
| ·胶回收 | 第87-88页 |
| ·T-A克隆 | 第88页 |
| ·差异表达基因cDNA片段的测序及分析 | 第88-89页 |
| ·部分差异基因的qRT-PCR分析 | 第89-90页 |
| 三 结果与分析 | 第90-186页 |
| 1 罗汉果苷生物合成途径中相关基因全长克隆 | 第90-91页 |
| 2 罗汉果苷生物合成相关基因功能分析 | 第91-176页 |
| ·MVA途径全长基因分析 | 第91-123页 |
| ·共同途径(Common pathway) | 第123-162页 |
| ·MEP pathyway | 第162-176页 |
| 3 糖基转移酶 | 第176-186页 |
| ·M28-101-GT1 | 第177-182页 |
| ·M28-581-GT2 | 第182-186页 |
| 四 讨论 | 第186-188页 |
| 1 高通量测序技术组装的可信度 | 第186页 |
| 2 RACE过程中的问题及经验 | 第186-187页 |
| 3 糖基转移酶在罗汉果苷代谢中的作用 | 第187-188页 |
| 五 结论 | 第188页 |
| 参考文献 | 第188-190页 |
| 附录 | 第190-192页 |
| 致谢 | 第192-194页 |
