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BVDV-2分离株XJ-04全基因组测序和抗BVDV单克隆抗体制备及初步应用

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
符号说明第11-12页
文献综述第12-29页
 1 病原学第12-13页
   ·发现第12-13页
   ·主要特征第13页
 2 BVDV 分子生物学研究进展第13-19页
   ·BVDV 基因组结构第13-14页
   ·BVDV 蛋白功能研究第14-19页
 3 BVDV 分型及分子流行病学研究进展第19-25页
   ·BVDV 分型第19-21页
   ·国外BVDV 流行状况第21-22页
   ·国内BVDV 流行情况第22-24页
   ·BVDV 感染其他动物第24-25页
 4 牛病毒性腹泻病毒检测技术研究进展第25-28页
   ·聚合酶链式反应(PCR)技术第25-26页
   ·病毒分离与免疫荧光技术第26页
   ·电镜技术第26页
   ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第26-27页
   ·免疫过氧化物酶技术第27页
   ·血清中和试验(Serum neutralization test,SNT)第27页
   ·琼脂扩散试验(Agar gel diffusion test,AGDT)第27-28页
 5 防制第28-29页
研究一、牛病毒性腹泻病毒 XJ-04 株基因组序列的测定与分析第29-45页
 摘要第29页
 Abstract第29-30页
 1 材料第30-31页
   ·毒株、细胞和菌株第30页
   ·主要试剂第30-31页
   ·主要仪器第31页
 2 方法第31-38页
   ·病毒的传代及浓缩第31页
   ·病毒RNA 的提取第31-32页
   ·反转录(RT)第32页
   ·病毒基因组内侧序列的测定第32-37页
   ·病毒5’-3’-UTR 部分序列的测定第37-38页
   ·基因序列的拼接与分析第38页
 3 结果第38-42页
   ·基因组序列的RT-PCR 扩增第38-39页
   ·基因组全序列测定结果及同源性分析第39-41页
   ·结构蛋白的糖基化位点分析第41-42页
 4 讨论第42-45页
   ·基因组序列测定第42-43页
   ·基因组序列分析第43-45页
研究二、抗 BVDV 单克隆抗体的制备及初步应用第45-59页
 摘要第45页
 Abstract第45-47页
 1 材料第47-48页
   ·病毒、菌株和蛋白第47页
   ·实验动物和细胞系第47页
   ·细胞培养基及主要试剂第47页
   ·仪器设备第47-48页
 2 方法第48-53页
   ·抗原的制备第48-49页
   ·小鼠的免疫第49页
   ·骨髓瘤细胞SP2/0 的制备第49页
   ·饲养细胞的制备第49页
   ·脾淋巴细胞的准备第49-50页
   ·细胞的融合第50页
   ·杂交瘤细胞株的筛选第50-51页
   ·杂交瘤细胞的克隆化及建株第51页
   ·单克隆抗体制备和效价测定第51-52页
   ·Western-blotting第52页
   ·单克隆抗体的稳定性检测第52页
   ·单克隆抗体的纯化第52页
   ·单抗的生物素标记及效价的测定第52页
   ·双抗体夹心ELISA 方法的建立第52-53页
   ·双抗体夹心ELISA 方法特异性的检测第53页
   ·双抗体夹心ELISA 方法临界值的确定第53页
   ·双抗体夹心ELISA 方法临床应用第53页
 3 结果第53-57页
   ·抗原的制备第53-54页
   ·细胞的融合及筛选第54-55页
   ·单克隆抗体的制备和效价测定第55页
   ·Western-blotting 结果第55-56页
   ·单克隆抗体稳定性检测第56页
   ·单克隆抗体的纯化第56页
   ·IgG 的biotin 标记第56页
   ·双抗体夹心ELISA 方法的建立第56页
   ·双抗体夹心ELISA 方法的特异性第56-57页
   ·双抗体夹心ELISA 方法临界值的确定第57页
   ·双抗体夹心ELISA 方法的应用第57页
 4 讨论第57-59页
全文总结第59-60页
文献第60-69页
致谢第69-70页
攻读学位期间发表的学术论文目录第70页

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