| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-14页 |
| ·课题来源、研究目的和意义 | 第10-11页 |
| ·课题来源 | 第10页 |
| ·研究目的 | 第10-11页 |
| ·研究意义 | 第11页 |
| ·国内外研究概况 | 第11-13页 |
| ·国内研究概况 | 第11-12页 |
| ·国外研究概况 | 第12-13页 |
| ·论文的主要研究方法 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-35页 |
| ·研究资料与仪器设备 | 第14-21页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-16页 |
| ·菌株,引物引物及miRNA | 第16-17页 |
| ·其他一些普通的试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液的配制 | 第17-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验流程与方法 | 第21-35页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·磁珠分选CD4~+淋巴细胞 | 第21-22页 |
| ·RT-PCR方法检测CD4~+淋巴细胞表达TH | 第22-23页 |
| ·western blot方法检测CD4+淋巴细胞表达TH | 第23-25页 |
| ·PCR产物的克隆,构建质粒标准品 | 第25-28页 |
| ·pcDNATM6.2-GW/-miRNA干扰质粒的构建 | 第28-30页 |
| ·CD4+淋巴细胞用AMAXA细胞核转染技术转染干扰质粒 | 第30-31页 |
| ·real-time PCR方法检测TH mRNA沉默效率 | 第31-32页 |
| ·western blot方法检测TH目的蛋白的沉默效率 | 第32页 |
| ·高效液相色谱法检测CD4+T淋巴细胞胞内儿茶酚胺含量 | 第32-33页 |
| ·流式细胞术检测胞内细胞因子含量 | 第33-34页 |
| ·统计学处理 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-47页 |
| ·小鼠CD4~+T淋巴细胞表达酪氨酸羟化酶的证据 | 第35-37页 |
| ·磁珠分选后检测CD4~+T淋巴细胞纯度 | 第35-36页 |
| ·CD4~+T淋巴细胞表达TH mRNA的证据 | 第36页 |
| ·CD4~+T淋巴细胞表达TH蛋白的证据 | 第36-37页 |
| ·TH基因片段克隆,制备质粒标准曲线 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR结果 | 第37页 |
| ·质粒测序鉴定 | 第37-38页 |
| ·实时定量PCR质粒标准曲线 | 第38页 |
| ·TH干扰质粒的构建 | 第38-41页 |
| ·单链退火生成双链 | 第38-39页 |
| ·测序鉴定连接产物 | 第39-41页 |
| ·TH干扰质粒介导CD4~+T淋巴细胞TH基因沉默 | 第41-45页 |
| ·AMAXA核转技术转染TH干扰质粒进入CD4~+T淋巴细胞 | 第41-43页 |
| ·实时定量PCR法检测TH基因沉默效果 | 第43-44页 |
| ·western blot法检测TH蛋白沉默效果 | 第44-45页 |
| ·TH基因沉默后CD4~+T淋巴细胞合成儿茶酚胺含量降低 | 第45-46页 |
| ·CD4~+T淋巴细胞合成的儿茶酚胺对Th淋巴细胞功能的影响 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 英文缩写词表 | 第56-57页 |
| 综述 | 第57-80页 |
| 综述参考文献 | 第72-80页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
