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激活蛋白AP-2αsiRNA电转染牛双核滋养层巨细胞对其特异表达基因转录水平的影响

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语中英文对照(Abbreviation)第11-12页
文献综述第12-26页
 1 牛的子叶型胎盘(Cotyledonary placenta)第12页
 2 反刍动物双核滋养层巨细胞的来源和结构第12-13页
 3 反刍动物双核滋养层巨细胞的妊娠特异蛋白家族第13-16页
   ·胎盘催乳素家族(placental lactogen,PL)第14-15页
   ·催乳素相关蛋白家族(Placental prolactin-related protein,PRP)第15-16页
   ·妊娠相关糖蛋白家族(pregnancy-associated glycoprotein,PAG)第16页
 4 Csh1、PRP-Ⅰ和PAG1在牛胎盘上的时空特异表达第16-18页
   ·Csh1第17页
   ·PRP-Ⅰ第17页
   ·PAG1第17-18页
 5 激活蛋白AP-2可能参与滋养层细胞特异表达基因的转录调控第18-19页
 6 siRNA电转染干扰法分析转录调控第19-20页
 参考文献第20-26页
试验研究第26-49页
 试验一 牛双核滋养层巨细胞体外培养模型的建立第26-36页
  1 材料和方法第27-29页
   ·材料第27页
   ·原代细胞培养第27-28页
   ·原代细胞纯化第28页
   ·细胞活力检测第28页
   ·Hoechst33342核染色鉴定双核第28-29页
   ·细胞免疫荧光化学法鉴定细胞第29页
  2 结果第29-31页
   ·细胞分离结果及形态观察第29-30页
   ·Hoechst33342细胞核染色和细胞免疫荧光化学染色结果第30-31页
  3 讨论第31-33页
  参考文献第33-36页
 试验二 AP-2asiRNA电转染BNC对BNC特异表达基因转录水平的影响第36-49页
  1 材料和方法第37-39页
   ·材料第37页
   ·siRNA设计与合成第37页
   ·细胞电转染条件优化第37-38页
   ·Real-time PCR检测AP-2asiRNA干扰效率第38-39页
   ·Real-time PCR检测Csh1,PRP-Ⅰ和PAG1的mRNA水平第39页
   ·数据分析第39页
  2 结果第39-44页
   ·不同电转参数下的细胞转染效率及存活率第39-41页
   ·AP-2a siRNA干扰效率第41-42页
   ·转染后Csh1,PRP-Ⅰ和PAG1mRNA水平第42-44页
  3 讨论第44-47页
  参考文献第47-49页
全文结论第49-50页
附录第50-52页
攻读硕士学位期间发表论文第52-54页
致谢第54页

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