| 缩略词 | 第1-14页 |
| 摘要 | 第14-19页 |
| ABSTRACT | 第19-25页 |
| 第一章 文献综述 | 第25-41页 |
| 1 桔全爪螨抗药性研究进展 | 第25-34页 |
| ·桔全爪螨抗药性现状 | 第25-27页 |
| ·影响桔全爪螨抗药性形成与发展的主要因子 | 第27-29页 |
| ·桔全爪螨的抗药性机理 | 第29-32页 |
| ·抗药性产生的分子机制 | 第32页 |
| ·抗性选育、抗性风险评估及抗性治理 | 第32-34页 |
| 2 昆虫(蜱螨)羧酸酯酶研究进展 | 第34-41页 |
| ·羧酸酯酶的水解代谢机制 | 第34-36页 |
| ·羧酸酯酶的组织分布及诱导表达 | 第36-37页 |
| ·昆虫(蜱螨)羧酸酯酶与抗性的关系 | 第37-41页 |
| 前言 | 第41-43页 |
| 第二章 两种杀螨剂对桔全爪螨的亚致死效应研究 | 第43-71页 |
| 第一节 甲氰菊酯亚致死浓度对桔全爪螨生长发育及繁殖的影响 | 第44-52页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·供试螨 | 第44页 |
| ·主要供试药剂 | 第44页 |
| ·亚致死浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·亚致死浓度处理 | 第45页 |
| ·数据处理 | 第45-46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·亚致死浓度的确定 | 第46页 |
| ·甲氰菊酯亚致死浓度处理对桔全爪螨F_0代的影响 | 第46-47页 |
| ·甲氰菊酯亚致死浓度处理对桔全爪螨子代种群的影响 | 第47-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 第二节 阿维菌素亚致死浓度对桔全爪螨生长发育及繁殖的影响 | 第52-59页 |
| 1 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·供试螨 | 第52页 |
| ·供试药剂 | 第52页 |
| ·亚致死浓度的确定 | 第52页 |
| ·亚致死浓度处理 | 第52-53页 |
| ·数据处理 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-57页 |
| ·亚致死剂量的确定 | 第53页 |
| ·阿维菌素亚致死浓度对桔全爪螨F_0代的影响 | 第53-54页 |
| ·阿维菌素亚致死浓度对桔全爪螨子代种群的影响 | 第54-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 第三节 两种杀螨剂对桔全爪螨体内主要解毒酶的诱导作用 | 第59-71页 |
| 1 材料与方法 | 第59-65页 |
| ·供试螨 | 第59页 |
| ·主要药剂及仪器 | 第59-60页 |
| ·甲氰菊酯和阿维菌素对桔全爪螨解毒酶的诱导处理 | 第60页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第60-61页 |
| ·羧酸酯酶(CarE)活性的测定 | 第61-63页 |
| ·谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性测定 | 第63-64页 |
| ·多功能氧化酶(MFO)氧脱甲基活性测定 | 第64-65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-69页 |
| ·牛血清蛋白、α-萘酚和对硝基苯酚的标准曲线 | 第65页 |
| ·甲氰菊酯亚致死浓度对桔全爪螨三种解毒酶的诱导作用 | 第65-67页 |
| ·阿维菌素亚致死剂量对桔全爪螨三种解毒酶的诱导作用 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第三章 桔全爪螨对两种杀螨剂的抗性选育及风险评估 | 第71-87页 |
| 1 材料与方法 | 第72-75页 |
| ·供试螨 | 第72页 |
| ·供试药剂 | 第72-74页 |
| ·抗性选育 | 第74页 |
| ·生物测定 | 第74-75页 |
| ·交互抗性测定 | 第75页 |
| ·现实遗传力(h~2)的估算 | 第75页 |
| ·抗性风险评估 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-83页 |
| ·桔全爪螨对两种杀螨剂的抗性选育 | 第75-77页 |
| ·桔全爪螨抗性品系的交互抗性 | 第77-79页 |
| ·桔全爪螨对两种杀螨剂的抗性现实遗传力 | 第79-80页 |
| ·抗性风险评估 | 第80-83页 |
| 3 讨论 | 第83-87页 |
| 第四章 桔全爪螨对两种杀螨剂的抗性机理研究 | 第87-137页 |
| 第一节 增效剂对两种杀螨剂的增效作用研究 | 第88-94页 |
| 1 材料与方法 | 第88-90页 |
| ·供试螨 | 第88页 |
| ·供试药剂 | 第88-89页 |
| ·增效作用测定 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-93页 |
| ·三种增效剂对甲氰菊酯的增效作用 | 第90页 |
| ·三种增效剂对阿维菌素的增效作用 | 第90-93页 |
| 3 讨论 | 第93-94页 |
| 第二节 桔全爪螨不同品系羧酸酯酶(CarE)比较研究 | 第94-108页 |
| 1 材料与方法 | 第94-98页 |
| ·供试螨 | 第94页 |
| ·主要药剂及仪器 | 第94-96页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第96-98页 |
| ·数据分析 | 第98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-106页 |
| ·桔全爪螨不同品系CarE活性比较 | 第98页 |
| ·桔全爪螨不同品系CarE动力学常数比较 | 第98-99页 |
| ·七种杀螨剂对桔全爪螨不同品系CarE的离体抑制作用测定 | 第99-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| 第三节 桔全爪螨不同品系磷酸酯酶(ACP和ALP)比较研究 | 第108-113页 |
| 1 材料与方法 | 第108-110页 |
| ·供试桔全爪螨 | 第108页 |
| ·主要药剂及仪器 | 第108页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第108-110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-112页 |
| ·对硝基苯酚标准曲线 | 第110-111页 |
| ·桔全爪螨不同品系ACP活性及动力学常数比较 | 第111页 |
| ·桔全爪螨不同品系ALP活性及动力学常数比较 | 第111-112页 |
| 3 讨论 | 第112-113页 |
| 第四节 桔全爪螨不同品系乙酰胆碱酯酶(AChE)比较研究 | 第113-118页 |
| 1 材料与方法 | 第113-115页 |
| ·供试螨 | 第113页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第113-114页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第114-115页 |
| 2 结果与分析 | 第115-116页 |
| ·桔全爪螨不同品系AChE活性比较 | 第115-116页 |
| ·桔全爪螨不同品系AChE动力学常数比较 | 第116页 |
| 3 讨论 | 第116-118页 |
| 第五节 桔全爪螨不同品系谷胱甘肽s-转移酶(GSTs)比较研究 | 第118-122页 |
| 1 材料与方法 | 第118-120页 |
| ·供试螨 | 第118页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第118-119页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第119-120页 |
| 2 结果与分析 | 第120-121页 |
| ·桔全爪螨不同品系GSTs活性比较 | 第120页 |
| ·桔全爪螨不同品系GSTs动力学常数比较 | 第120-121页 |
| 3 讨论 | 第121-122页 |
| 第六节 桔全爪螨不同品系多功能氧化酶(MFO)比较研究 | 第122-126页 |
| 1 材料与方法 | 第122-123页 |
| ·供试螨 | 第122页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第122-123页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第123页 |
| 2 结果与分析 | 第123-124页 |
| ·桔全爪螨不同品系MFO氧脱甲基活性比较 | 第123-124页 |
| ·桔全爪螨不同品系MFO动力学常数比较 | 第124页 |
| 3 讨论 | 第124-126页 |
| 第七节 桔全爪螨不同品系三磷酸腺苷酶(ATPase)比较研究 | 第126-137页 |
| 1 材料与方法 | 第126-130页 |
| ·供试螨 | 第126页 |
| ·主要药剂及仪器 | 第126-127页 |
| ·测定方法及操作步骤 | 第127-130页 |
| 2 结果与分析 | 第130-133页 |
| ·Pi标准曲线 | 第130页 |
| ·桔全爪螨不同品系ATPase活性比较 | 第130-131页 |
| ·桔全爪螨不同品系ATPase动力学参数比较 | 第131-132页 |
| ·甲氰菊酯对桔全爪螨Na~+-K~+-ATPase的离体抑制作用 | 第132页 |
| ·阿维菌素对桔全爪螨Na~+-K~+-ATPase的离体抑制作用 | 第132-133页 |
| 3 讨论 | 第133-137页 |
| 第五章 桔全爪螨酯酶基因的克隆及表达 | 第137-179页 |
| 第一节 桔全爪螨酯酶基因的克隆及序列分析 | 第138-162页 |
| 1 材料与方法 | 第138-148页 |
| ·供试螨 | 第138页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第138-139页 |
| ·常用储备液及培养基的配制 | 第139-140页 |
| ·总RNA的提取 | 第140页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因片段扩增 | 第140-142页 |
| ·3 ’-RACE和5'-RACE扩增 | 第142-145页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因全序列的获得 | 第145-146页 |
| ·PCR产物克隆与测序 | 第146-147页 |
| ·序列分析及蛋白质结构同源模拟 | 第147-148页 |
| 2 结果与分析 | 第148-160页 |
| ·桔全爪螨总RNA的提取 | 第148页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因片段的克隆及分析 | 第148-149页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因3’-RACE和5’-RACE | 第149-150页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因全长克隆 | 第150-151页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因序列分析 | 第151-154页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因PCE1同源性分析 | 第154-155页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因PCE1氨基酸序列比对分析 | 第155-157页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因PCE1系统发育分析 | 第157-159页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因PCE1的蛋白同源模拟 | 第159-160页 |
| 3 小结与讨论 | 第160-162页 |
| 第二节 桔全爪螨酯酶基因PCE1 MRNA表达研究 | 第162-168页 |
| 1 材料与方法 | 第162-164页 |
| ·供试虫源(同第二章) | 第162页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第162页 |
| ·总RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第162-163页 |
| ·Real-time PCR | 第163-164页 |
| ·引物扩增效率及熔解曲线分析 | 第164页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因PCE1的定量分析 | 第164页 |
| 2 结果与分析 | 第164-166页 |
| ·引物扩增效率及熔解曲线分析 | 第164-165页 |
| ·甲氰菊酯处理对桔全爪螨酯酶基因PCE1 mRNA表达水平的影响 | 第165-166页 |
| 3 讨论 | 第166-168页 |
| 第三节 桔全爪螨酯酶基因PCE1在大肠杆菌中的异源表达 | 第168-179页 |
| 1 材料与方法 | 第168-175页 |
| ·主要试剂(盒)与仪器 | 第168-169页 |
| ·试剂配制 | 第169-170页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第170-171页 |
| ·表达载体构建 | 第171-173页 |
| ·重组表达菌株的培养及表达 | 第173页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE电泳检测 | 第173-175页 |
| 2 结果分析 | 第175-178页 |
| ·PCE1基因PCR扩增 | 第175页 |
| ·PCE1基因克隆及鉴定 | 第175-176页 |
| ·pMD-PCE1的序列测定 | 第176页 |
| ·原核表达质粒的构建与鉴定 | 第176-177页 |
| ·pET43a-PCE1的诱导表达 | 第177-178页 |
| 3 讨论 | 第178-179页 |
| 第六章 主要结论及研究展望 | 第179-183页 |
| 1 主要结论 | 第179-180页 |
| ·甲氰菊酯和阿维菌素亚致死浓度对桔全爪螨生长发育及解毒酶的影响 | 第179页 |
| ·桔全爪螨抗药性选育、交互抗性及抗性风险评估 | 第179页 |
| ·桔全爪螨对两种杀螨剂的抗性生化机理 | 第179-180页 |
| ·桔全爪螨酯酶基因的克隆与表达研究 | 第180页 |
| 2 创新点 | 第180-181页 |
| 3 展望 | 第181-183页 |
| ·抗性适合度研究 | 第181页 |
| ·酯酶基因功能验证 | 第181页 |
| ·甲氰菊酯抗性品系的继续选育与钠离子通道基因的克隆 | 第181-183页 |
| 参考文献 | 第183-193页 |
| 致谢 | 第193-195页 |
| 攻读博士期间发表论文目录及参研课题情况 | 第195-196页 |
