| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·前言 | 第11页 |
| ·甲壳动物免疫系统 | 第11-14页 |
| ·细胞免疫 | 第12-13页 |
| ·体液免疫 | 第13-14页 |
| ·抗菌肽研究进展 | 第14-17页 |
| ·抗菌肽的特点 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第15-17页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第17页 |
| ·甲壳动物抗菌肽的研究进展 | 第17-18页 |
| ·ALF 的研究进展 | 第18-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第2章 中国明对虾ALFFc 基因的原核表达 | 第23-35页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·研究材料 | 第23-24页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·总RNA 的提取及cDNA 的合成 | 第24-25页 |
| ·ALFFc 基因的克隆及载体构建 | 第25页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-32页 |
| ·ALFFc 基因片段的扩增及重组质粒的酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第27-32页 |
| ·讨论 | 第32-35页 |
| 第3章 中国明对虾ALFFc 的纯化、抗血清制备及组织表达分析 | 第35-40页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·试剂的配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·ALFFc 重组蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·多克隆抗血清的制备 | 第36页 |
| ·免疫扩散法检测抗血清的产生 | 第36页 |
| ·融合蛋白DsbA-ALFFc 的Western Blot 鉴定 | 第36页 |
| ·ALFFc 在蛋白水平上的组织定位 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·ALFFc 重组蛋白的纯化 | 第37页 |
| ·免疫扩散结果 | 第37-38页 |
| ·Western Blot 鉴定结果 | 第38页 |
| ·ALFFc 在蛋白水平上的组织定位 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第4 章中国明对虾ALFFc 基因的毕赤酵母表达 | 第40-50页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·研究材料 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·培养基和试剂的配制 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·总RNA 的提取及cDNA 的合成 | 第41-42页 |
| ·ALFFc 基因的克隆及载体构建 | 第42页 |
| ·质粒pPIC9K-ALFFc，pPIC9K 的提取及线性化 | 第42页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第42-43页 |
| ·筛选Mut~+和Muts~5转化子 | 第43页 |
| ·酵母DNA 的提取 | 第43页 |
| ·转化子的PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第44页 |
| ·SDS-PAGE 检测蛋白表达情况 | 第44页 |
| ·Western Blot 鉴定表达产物 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-50页 |
| ·ALFFc 基因片段的扩增及重组质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·毕赤酵母的转化及MM，MD 筛选结果 | 第45-46页 |
| ·转化子的PCR 鉴定结果 | 第46页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第46页 |
| ·Western Blot 鉴定结果 | 第46-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第59页 |
