| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-22页 |
| ·天然橡胶生产所面临的现状 | 第10-11页 |
| ·橡胶树形态及生理学 | 第11-12页 |
| ·橡胶树分子生物学研究现状 | 第12-14页 |
| ·巴西橡胶树橡胶生物合成途径 | 第12-13页 |
| ·橡胶生物合成相关基因的克隆及其表达调控 | 第13-14页 |
| ·乳管分子生物学 | 第14页 |
| ·高等植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第14-18页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白基因的克隆 | 第15-16页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的分类 | 第16页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白基因的功能 | 第16-17页 |
| ·巴西橡胶树蔗糖转运蛋白研究现状 | 第17-18页 |
| ·基因表达的定量分析方法 | 第18-19页 |
| ·RNA印迹 | 第18页 |
| ·核糖核酸酶保护分析 | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第18页 |
| ·cDNA微阵列技术 | 第18-19页 |
| ·蛋白质印迹 | 第19页 |
| ·定量分析中内参基因的选用 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-41页 |
| ·材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·载体及菌株 | 第22页 |
| ·生化试剂 | 第22页 |
| ·委托业务 | 第22-23页 |
| ·方法与步骤 | 第23-41页 |
| ·酵母体内C~(14)标记的蔗糖吸收实验 | 第23页 |
| ·反向Northern分析HbSUT基因的组织特异性表达 | 第23-26页 |
| ·实时荧光定量PCR分析HbSUT5基因的表达 | 第26-28页 |
| ·HbSUT4和HbSUT5基因的Southern杂交分析 | 第28-30页 |
| ·橡胶树蔗糖转运蛋白基因HbSUT5启动子克隆及功能分析 | 第30-35页 |
| ·实时荧光定量PCR技术筛选内参基因 | 第35-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| ·酵母体内C~(14)标记的蔗糖吸收实验 | 第41页 |
| ·巴西橡胶树不同组织总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·反向Northern分析蔗糖转运蛋白基因的组织特异性表达 | 第42-43页 |
| ·荧光定量PCR分析HbSUT5基因的表达 | 第43-45页 |
| ·割胶对HbSUT5基因表达的影响 | 第43页 |
| ·伤害对HbSUT5基因表达的影响 | 第43-44页 |
| ·叶片发育不同时期HbSUT5基因表达变化 | 第44页 |
| ·不同激素处理对HbSUT5基因表达的影响 | 第44-45页 |
| ·叶片DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·Southern杂交分析HbSUT4和HbSUT5基因在基因组中的拷贝数 | 第46-48页 |
| ·探针的制备 | 第46页 |
| ·基因组DNA的酶切 | 第46-47页 |
| ·Southern杂交分析 | 第47-48页 |
| ·HbSUT5基因启动子序列的分离与功能分析 | 第48-54页 |
| ·HbSUT5基因启动子序列的分离 | 第48-49页 |
| ·HbSUT5基因的启动子序列分析 | 第49-53页 |
| ·HbSUT5基因的启动子瞬时表达功能分析 | 第53-54页 |
| ·荧光定量PCR筛选内参基因 | 第54-63页 |
| ·候选内参基因引物特异性检测及其扩增效率 | 第54-56页 |
| ·各种不同实验条件下的内参基因筛选 | 第56-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| ·关于HbSUT5基因的功能 | 第63-64页 |
| ·关于基因启动子的克隆方法 | 第64-65页 |
| ·关于基因表达分析中内参基因的选择 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 附录一:有关试剂的配制 | 第74-77页 |
| 附录二:缩略词 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第79页 |
