| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 缩略语中英文注释表 | 第5-8页 |
| 第一章 ：绪论 | 第8-24页 |
| 1.1 男性不育简介 | 第8-9页 |
| 1.2 精子成熟 | 第9-10页 |
| 1.3 附睾简介 | 第10-16页 |
| 1.3.1 附睾结构 | 第10-12页 |
| 1.3.2 附睾管腔微环境 | 第12-13页 |
| 1.3.3 附睾上皮细胞组成 | 第13-14页 |
| 1.3.4 附睾与男性不育 | 第14-16页 |
| 1.4 附睾管腔液蛋白研究进展 | 第16-24页 |
| 1.4.1 附睾管腔液蛋白的分泌形式 | 第16-17页 |
| 1.4.2 附睾管腔液蛋白的主要成分 | 第17-20页 |
| 1.4.3 附睾管腔液蛋白的功能 | 第20-21页 |
| 1.4.4 附睾管腔液蛋白研究的技术手段 | 第21-24页 |
| 第二章 ：实验方法 | 第24-42页 |
| 2.1 主要实验仪器、试剂及材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 实验方案和技术路线图 | 第26页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第26-27页 |
| 2.2 附睾管腔液的收集 | 第27页 |
| 2.3 样品制备 | 第27-32页 |
| 2.3.1 蛋白定量 | 第27-29页 |
| 2.3.2 考马斯亮蓝G-250 染色检测样品 | 第29页 |
| 2.3.3 蛋白还原、烷基化及酶解 | 第29-30页 |
| 2.3.4 蛋白样品的i TRAQ标记 | 第30页 |
| 2.3.5 强阳离子交换色谱分离 | 第30-32页 |
| 2.4 2D-LC-MS/MS质谱分析 | 第32页 |
| 2.5 蛋白定性和定量 | 第32-33页 |
| 2.6 生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 2.7 免疫印迹 | 第34-40页 |
| 2.7.1 组织蛋白提取 | 第34页 |
| 2.7.2 组织蛋白浓度测定 | 第34-37页 |
| 2.7.3 免疫印迹试剂配制 | 第37-38页 |
| 2.7.4 免疫印迹实验步骤 | 第38-40页 |
| 2.8 免疫荧光 | 第40-42页 |
| 2.8.1 组织免疫荧光 | 第40-41页 |
| 2.8.2 精子免疫荧光 | 第41-42页 |
| 第三章 ：实验结果 | 第42-73页 |
| 3.1 蛋白样品SDS-PAGE检验 | 第42-43页 |
| 3.2 蛋白鉴定结果 | 第43-46页 |
| 3.3 附睾头和附睾尾差异富集蛋白鉴定 | 第46页 |
| 3.4 差异蛋白的生物信息学分析 | 第46-65页 |
| 3.4.1 GO功能富集分析 | 第46-58页 |
| 3.4.2 KEGG信号通路分析 | 第58-61页 |
| 3.4.3 蛋白质相互作用分析 | 第61-65页 |
| 3.5 免疫印迹和免疫荧光验证 | 第65-73页 |
| 3.5.1 免疫印迹验证 | 第65-66页 |
| 3.5.2 免疫荧光验证 | 第66-73页 |
| 第四章 ：结果分析与讨论 | 第73-82页 |
| 4.1 附睾管腔液蛋白i TRAQ鉴定 | 第74页 |
| 4.1.1 附睾管腔液蛋白鉴定 | 第74页 |
| 4.1.2 附睾头和附睾尾差异管腔液蛋白鉴定 | 第74页 |
| 4.2 附睾管腔液差异蛋白生物信息学分析 | 第74-78页 |
| 4.2.1 附睾管腔液蛋白与脂质代谢 | 第75-76页 |
| 4.2.2 附睾管腔液蛋白维持附睾管腔还原微环境 | 第76-77页 |
| 4.2.3 附睾管腔液蛋白作用网络 | 第77-78页 |
| 4.2.4 附睾管腔液的糖代谢 | 第78页 |
| 4.3 Pdzk1和Spink5 在附睾管腔液中的作用分析 | 第78-82页 |
| 4.3.1 Pdzk1 与附睾功能分析 | 第78-80页 |
| 4.3.2 Spink5 与附睾功能分析 | 第80-82页 |
| 第五章 ：全文结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读博士期间发表论文 | 第101-103页 |