| 中文摘要 | 第4-11页 |
| abstract | 第11-18页 |
| 英文缩略词表(Abbreviations) | 第24-26页 |
| 第一部分 RSF1在骨肉瘤中的表达 | 第26-44页 |
| 1 前言 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-33页 |
| 2.1 临床骨肉瘤标本 | 第28页 |
| 2.2 细胞系 | 第28页 |
| 2.3 主要药品及试剂 | 第28页 |
| 2.4 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.5 RNA提取和逆转录 | 第29-30页 |
| 2.6 细胞总蛋白提取和蛋白浓度测定 | 第30-31页 |
| 2.7 qRT-PCR反应 | 第31页 |
| 2.8 Western blot检测 | 第31-32页 |
| 2.9 统计学处理 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-37页 |
| 3.1 RSF1在骨肉瘤组织中高表达 | 第33-34页 |
| 3.2 RSF1表达与骨肉瘤临床病理特征相关性分析 | 第34-35页 |
| 3.3 RSF1表达与骨肉瘤癌患者预后的关系 | 第35页 |
| 3.4 RSF1在骨肉瘤细胞中的表达 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 6 参考文献 | 第40-44页 |
| 第二部分 RSF1表达在骨肉瘤生物学特性中的作用 | 第44-69页 |
| 1 前言 | 第44-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-51页 |
| 2.1 细胞系 | 第46页 |
| 2.2 主要药品及试剂 | 第46页 |
| 2.3 细胞培养 | 第46页 |
| 2.4 RSF1干扰慢病毒的制备与感染 | 第46-47页 |
| 2.5 MTT增殖实验 | 第47页 |
| 2.6 克隆形成实验 | 第47页 |
| 2.7 细胞划痕实验 | 第47-48页 |
| 2.8 Transwell侵袭实验 | 第48页 |
| 2.9 细胞总蛋白提取和蛋白浓度测定 | 第48-49页 |
| 2.10 Western blot检测 | 第49页 |
| 2.11 裸鼠成瘤实验 | 第49-50页 |
| 2.12 免疫组化 | 第50-51页 |
| 2.13 统计学处理 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-60页 |
| 3.1 构建RSF1慢病毒小发卡RNA | 第51-52页 |
| 3.2 RSF1低表达抑制骨肉瘤细胞的增殖 | 第52-55页 |
| 3.3 RSF1低表达抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力 | 第55-56页 |
| 3.4 RSF1激活MAPK/ERK信号通路 | 第56-57页 |
| 3.5 RSF1低表达抑制动物模型中的骨肉瘤生长 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 5 小结 | 第63-64页 |
| 6 参考文献 | 第64-69页 |
| 第三部分 XIST/miR-193a-3p靶向调节骨肉瘤细胞RSF1表达 | 第69-93页 |
| 1 前言 | 第69-72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-76页 |
| 2.1 临床骨肉瘤标本和细胞系 | 第72页 |
| 2.2 主要药品及试剂 | 第72页 |
| 2.3 细胞培养 | 第72页 |
| 2.4 RSF1和XIST干扰慢病毒的制备与感染 | 第72-73页 |
| 2.5 荧光素报告基因实验 | 第73页 |
| 2.6 RNA提取和逆转录 | 第73-74页 |
| 2.7 细胞总蛋白提取和蛋白浓度测定 | 第74页 |
| 2.8 qRT-PCR | 第74页 |
| 2.9 Western blot检测 | 第74页 |
| 2.10 RNA拉下实验 | 第74-76页 |
| 2.11 统计学处理 | 第76页 |
| 3 结果 | 第76-84页 |
| 3.1 RSF1是miR-193a-3p的直接靶点 | 第76-78页 |
| 3.2 RSF1在骨肉瘤中上调并与miR-193a-3p的表达负相关 | 第78-81页 |
| 3.3 XIST可以作为miR-193a-3p的分子结合物 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-86页 |
| 5 小结 | 第86-87页 |
| 6 参考文献 | 第87-93页 |
| 综述一 RSF1与DNA修复 | 第93-102页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 综述二 lncRNA与骨肉瘤 | 第102-112页 |
| 参考文献 | 第108-112页 |
| 个人简历 | 第112页 |
| 博士期间发表论文情况 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
