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细胞凋亡在烟粉虱—番茄黄曲叶病毒互作中的作用及机制

致谢第6-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 绪论第15-26页
    1.1 烟粉虱与双生病毒第15-17页
        1.1.1 烟粉虱概述及其危害第15-16页
        1.1.2 双生病毒概述第16-17页
        1.1.3 烟粉虱对双生病毒的传播第17页
    1.2 细胞凋亡第17-23页
        1.2.1 细胞凋亡的生物学特征第18页
        1.2.2 细胞凋亡通路相关蛋白第18-20页
        1.2.3 细胞凋亡的信号转导途径第20-23页
    1.3 昆虫中的细胞凋亡研究第23-24页
    1.4 本研究的目的和内容第24-26页
        1.4.1 本研究的目的第24-25页
        1.4.2 本研究的内容第25-26页
2 基本材料与方法第26-33页
    2.1 基本材料第26-28页
        2.1.1 供试昆虫第26页
        2.1.2 供试植物第26页
        2.1.3 供试病毒第26页
        2.1.4 主要试剂第26-27页
        2.1.5 生态学研究相关的仪器与设备第27页
        2.1.6 分子生物学研究主要的仪器与设备第27-28页
    2.2 基本实验方法第28-33页
        2.2.1 烟粉虱总DNA的提取第28-29页
        2.2.2 烟粉虱隐存种的鉴定方法(RFLP-PCR)第29-30页
        2.2.3 带毒植物的获取第30页
        2.2.4 植物基因组DNA的提取方法(Tris碱法)第30页
        2.2.5 烟粉虱总RNA的提取第30-31页
        2.2.6 cDNA的制备(PrimeSeript RT reagent Kit)与定量PCR(SYBR PrimeSeript~(TM)qPCR Kit)第31页
        2.2.7 烟粉虱总蛋白的提取第31页
        2.2.8 蛋白免疫印迹实验(Western Blot)第31-32页
        2.2.9 统计方法第32-33页
3 烟粉虱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)基因家族的功能鉴定第33-54页
    3.1 材料与方法第34-37页
        3.1.1 供试昆虫和植物第34页
        3.1.2 本研究所用引物第34页
        3.1.3 烟粉虱中Caspase基因的检索第34-35页
        3.1.4 序列比对和系统发育分析第35页
        3.1.5 基因结构和蛋白质结构域预测第35-36页
        3.1.6 烟粉虱RNA提取和cDNA的制备(PrimeSeript RT TM reagent Kit)与定量PCR (SYBR PrimeSeript~(TM) qPCR Kit)第36页
        3.1.7 紫外光(UV)处理烟粉虱第36页
        3.1.8 末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)测定第36页
        3.1.9 RNA干扰第36-37页
    3.2 结果与分析第37-51页
        3.2.1 烟粉虱caspase基因家族的鉴定第37-38页
        3.2.2 烟粉虱caspase的系统进化关系第38-43页
        3.2.3 Bt-caspases基因结构和保守蛋白结构域分析第43-45页
        3.2.4 Bt-caspase基因在不同发育阶段的表达谱第45-47页
        3.2.5 紫外线处理下Bt-caspase基因的功能第47-49页
        3.2.6 Bt-caspase-1和Bt-caspase-3b在细胞凋亡中的作用第49-51页
    3.3 讨论第51-54页
4 细胞凋亡在烟粉虱与番茄黄曲叶病毒互作中的作用及机制第54-68页
    4.1 材料与方法第54-58页
        4.1.1 供试昆虫、植物和病毒第54-55页
        4.1.2 本研究所用引物第55页
        4.1.3 末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)测定第55页
        4.1.4 病毒的免疫荧光定位第55-56页
        4.1.5 透射电子显微镜观察细胞凋亡(TEM)第56页
        4.1.6 检测携带TYLCV烟粉虱的细胞凋亡第56页
        4.1.7 细胞凋亡的抑制剂和激活剂对烟粉虱体内病毒变化的影响第56-57页
        4.1.8 RNA干扰caspase-3基因对烟粉虱体内病毒变化的影响第57页
        4.1.9 细胞凋亡的抑制剂、激活剂对烟粉虱传播病毒的作用第57-58页
    4.2 结果与分析第58-66页
        4.2.1 TYLCV侵染激活烟粉虱的细胞凋亡第58-61页
        4.2.2 抑制或诱导细胞凋亡对烟粉虱体内TYLCV积累的影响第61-64页
        4.2.3 细胞凋亡影响TYLCV在烟粉虱体内的存留以及传毒第64-66页
    4.3 讨论第66-68页
5 总讨论第68-71页
    5.1 全文总结第68-69页
    5.2 本研究的特色和创新之处第69-70页
    5.3 值得继续研究的问题第70-71页
参考文献第71-84页
作者简介第84页

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