致谢 | 第6-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 绪论 | 第15-26页 |
1.1 烟粉虱与双生病毒 | 第15-17页 |
1.1.1 烟粉虱概述及其危害 | 第15-16页 |
1.1.2 双生病毒概述 | 第16-17页 |
1.1.3 烟粉虱对双生病毒的传播 | 第17页 |
1.2 细胞凋亡 | 第17-23页 |
1.2.1 细胞凋亡的生物学特征 | 第18页 |
1.2.2 细胞凋亡通路相关蛋白 | 第18-20页 |
1.2.3 细胞凋亡的信号转导途径 | 第20-23页 |
1.3 昆虫中的细胞凋亡研究 | 第23-24页 |
1.4 本研究的目的和内容 | 第24-26页 |
1.4.1 本研究的目的 | 第24-25页 |
1.4.2 本研究的内容 | 第25-26页 |
2 基本材料与方法 | 第26-33页 |
2.1 基本材料 | 第26-28页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第26页 |
2.1.2 供试植物 | 第26页 |
2.1.3 供试病毒 | 第26页 |
2.1.4 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.5 生态学研究相关的仪器与设备 | 第27页 |
2.1.6 分子生物学研究主要的仪器与设备 | 第27-28页 |
2.2 基本实验方法 | 第28-33页 |
2.2.1 烟粉虱总DNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.2 烟粉虱隐存种的鉴定方法(RFLP-PCR) | 第29-30页 |
2.2.3 带毒植物的获取 | 第30页 |
2.2.4 植物基因组DNA的提取方法(Tris碱法) | 第30页 |
2.2.5 烟粉虱总RNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.6 cDNA的制备(PrimeSeript RT reagent Kit)与定量PCR(SYBR PrimeSeript~(TM)qPCR Kit) | 第31页 |
2.2.7 烟粉虱总蛋白的提取 | 第31页 |
2.2.8 蛋白免疫印迹实验(Western Blot) | 第31-32页 |
2.2.9 统计方法 | 第32-33页 |
3 烟粉虱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)基因家族的功能鉴定 | 第33-54页 |
3.1 材料与方法 | 第34-37页 |
3.1.1 供试昆虫和植物 | 第34页 |
3.1.2 本研究所用引物 | 第34页 |
3.1.3 烟粉虱中Caspase基因的检索 | 第34-35页 |
3.1.4 序列比对和系统发育分析 | 第35页 |
3.1.5 基因结构和蛋白质结构域预测 | 第35-36页 |
3.1.6 烟粉虱RNA提取和cDNA的制备(PrimeSeript RT TM reagent Kit)与定量PCR (SYBR PrimeSeript~(TM) qPCR Kit) | 第36页 |
3.1.7 紫外光(UV)处理烟粉虱 | 第36页 |
3.1.8 末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)测定 | 第36页 |
3.1.9 RNA干扰 | 第36-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-51页 |
3.2.1 烟粉虱caspase基因家族的鉴定 | 第37-38页 |
3.2.2 烟粉虱caspase的系统进化关系 | 第38-43页 |
3.2.3 Bt-caspases基因结构和保守蛋白结构域分析 | 第43-45页 |
3.2.4 Bt-caspase基因在不同发育阶段的表达谱 | 第45-47页 |
3.2.5 紫外线处理下Bt-caspase基因的功能 | 第47-49页 |
3.2.6 Bt-caspase-1和Bt-caspase-3b在细胞凋亡中的作用 | 第49-51页 |
3.3 讨论 | 第51-54页 |
4 细胞凋亡在烟粉虱与番茄黄曲叶病毒互作中的作用及机制 | 第54-68页 |
4.1 材料与方法 | 第54-58页 |
4.1.1 供试昆虫、植物和病毒 | 第54-55页 |
4.1.2 本研究所用引物 | 第55页 |
4.1.3 末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)测定 | 第55页 |
4.1.4 病毒的免疫荧光定位 | 第55-56页 |
4.1.5 透射电子显微镜观察细胞凋亡(TEM) | 第56页 |
4.1.6 检测携带TYLCV烟粉虱的细胞凋亡 | 第56页 |
4.1.7 细胞凋亡的抑制剂和激活剂对烟粉虱体内病毒变化的影响 | 第56-57页 |
4.1.8 RNA干扰caspase-3基因对烟粉虱体内病毒变化的影响 | 第57页 |
4.1.9 细胞凋亡的抑制剂、激活剂对烟粉虱传播病毒的作用 | 第57-58页 |
4.2 结果与分析 | 第58-66页 |
4.2.1 TYLCV侵染激活烟粉虱的细胞凋亡 | 第58-61页 |
4.2.2 抑制或诱导细胞凋亡对烟粉虱体内TYLCV积累的影响 | 第61-64页 |
4.2.3 细胞凋亡影响TYLCV在烟粉虱体内的存留以及传毒 | 第64-66页 |
4.3 讨论 | 第66-68页 |
5 总讨论 | 第68-71页 |
5.1 全文总结 | 第68-69页 |
5.2 本研究的特色和创新之处 | 第69-70页 |
5.3 值得继续研究的问题 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-84页 |
作者简介 | 第84页 |