| 缩略语表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-24页 |
| 1.肿瘤转移的发生机制 | 第15-18页 |
| 2.肿瘤微环境 | 第18-20页 |
| 3.肿瘤相关中性粒细胞 | 第20-24页 |
| 实验一 中性粒细胞与人骨肉瘤分期及转移复发的关系 | 第24-33页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 主要试剂 | 第24页 |
| 1.2 主要仪器及耗材 | 第24-25页 |
| 1.3 溶液配制 | 第25页 |
| 1.4 标本收集 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-27页 |
| 2.1 骨肉瘤组织石蜡包块切片 | 第26页 |
| 2.2 骨肉瘤组织石蜡切片HE染色 | 第26页 |
| 2.3 骨肉瘤组织免疫组化染色 | 第26-27页 |
| 2.4 统计学分析 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| 3.1 骨肉瘤组织HE染色结果 | 第27-28页 |
| 3.2 骨肉瘤组织免疫组化染色结果 | 第28-29页 |
| 3.3 中性粒细胞与骨肉瘤临床病理特征的关系 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 实验二 骨肉瘤细胞与中性粒细胞共培养后生物学特性的变化 | 第33-40页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 1.3 主要耗材 | 第34页 |
| 1.4 溶液配制 | 第34页 |
| 1.5 细胞系及血液样本 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-37页 |
| 2.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.2 人外周血中性粒细胞分离 | 第35页 |
| 2.3 中性粒细胞鉴定及活性检测 | 第35-36页 |
| 2.4 人外周血中性粒细胞与骨肉瘤细胞SOSP-9607共培养 | 第36-37页 |
| 2.5 统计学分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-38页 |
| 3.1 中性粒细胞的分离与纯化 | 第37页 |
| 3.2 中性粒细胞与骨肉瘤细胞SOSP-9607共培养后SOSP-9607迁移能力增强 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 实验三 骨肉瘤细胞与中性粒细胞共培养后细胞因子的变化 | 第40-49页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| 1.1 主要试剂 | 第40页 |
| 1.2 主要仪器 | 第40-41页 |
| 1.3 主要耗材 | 第41页 |
| 1.4 溶液配制 | 第41-42页 |
| 1.5 细胞系及血液样本 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| 2.1 人外周血中性粒细胞分离及鉴定 | 第42页 |
| 2.2 细胞共培养 | 第42页 |
| 2.3 细胞因子芯片检测 | 第42-44页 |
| 2.4 westernblot | 第44-45页 |
| 2.5 统计学分析 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-47页 |
| 3.1 细胞因子芯片检测显示中性粒细胞与骨肉瘤细胞SOSP-9607共培养后多种细胞因子升高 | 第45-47页 |
| 3.2 验证细胞共培养是否刺激中性粒细胞分泌IL-6 | 第47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 实验四 IL-6对骨肉瘤细胞SOSP-9607的影响 | 第49-62页 |
| 1 材料 | 第49-51页 |
| 1.1 主要试剂 | 第49页 |
| 1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 1.3 主要耗材 | 第50页 |
| 1.4 溶液配制 | 第50-51页 |
| 1.5 细胞系 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-55页 |
| 2.1 细胞培养 | 第51页 |
| 2.2 稳定下调IL-6骨肉瘤细胞系的建立 | 第51页 |
| 2.3 实时定量PCR | 第51-52页 |
| 2.4 westernblot | 第52-53页 |
| 2.5 条件培养基的获得 | 第53-54页 |
| 2.6 Transwell迁移实验 | 第54页 |
| 2.7 Transwell细胞侵袭实验 | 第54-55页 |
| 2.8 统计学分析 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-60页 |
| 3.1 验证9607-shIL-6骨肉瘤细胞IL-6的下调效果 | 第55-57页 |
| 3.2 IL-6对骨肉瘤细胞迁移能力的影响 | 第57-59页 |
| 3.3 IL-6对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 个人简历和研究成果 | 第72-73页 |
| 个人简历 | 第72页 |
| 研究成果 | 第72页 |
| 会议交流 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
