摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略词中英文注释表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 间充质干细胞 | 第14-16页 |
1.1.1 间充质干细胞生物学特性 | 第14页 |
1.1.2 MSC与组织修复 | 第14-15页 |
1.1.3 MSC来源外泌体的生物学特征 | 第15-16页 |
1.2 MSC与肝纤维化 | 第16-18页 |
1.2.1 肝纤维化的发病机制 | 第16-17页 |
1.2.2 MSC与肝纤维化 | 第17-18页 |
1.2.3 MSC-ex与肝纤维化 | 第18页 |
1.3 miRNA在肝纤维化治疗中的作用 | 第18-21页 |
1.3.1 miRNA的生物学特性 | 第18-19页 |
1.3.2 miRNA与肝脏疾病 | 第19-20页 |
1.3.3 miR-373与Let-7b | 第20-21页 |
1.4 研究目的、方法、技术路线和意义 | 第21-23页 |
1.4.1 研究目的 | 第21页 |
1.4.2 研究方法 | 第21页 |
1.4.3 技术路线 | 第21-22页 |
1.4.4 研究意义 | 第22-23页 |
第二章 HucMSC-ex转运miR-373缓解肝纤维化 | 第23-63页 |
2.1 材料 | 第23-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 细胞株 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23-26页 |
2.1.4 主要的仪器及相关耗材 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-35页 |
2.2.1 小鼠肝纤维化模型建立 | 第26页 |
2.2.2 HucMSC-ex的分离与鉴定 | 第26-27页 |
2.2.3 细胞转染miR-373mimics/inhibitor | 第27页 |
2.2.4 HucMSC-ex处理活化的LX-2细胞 | 第27页 |
2.2.5 细胞和组织蛋白提取 | 第27-28页 |
2.2.6 Westernblot | 第28页 |
2.2.7 RNA提取 | 第28-29页 |
2.2.8 RNA逆转录 | 第29-30页 |
2.2.9 荧光定量PCR | 第30-31页 |
2.2.10 细胞免疫荧光 | 第31页 |
2.2.11 HucMSC-ex移植治疗小鼠肝纤维化 | 第31-32页 |
2.2.12 HE、Masson和SiriusRed染色 | 第32页 |
2.2.13 免疫组织化学法 | 第32-33页 |
2.2.14 激光共聚焦显微镜观察exosome细胞内定位 | 第33页 |
2.2.15 标记的HucMSC-ex进行动物活体成像 | 第33页 |
2.2.16 血清exosome及其miRNAs的提取 | 第33-34页 |
2.2.17 双荧光素酶报告基因 | 第34页 |
2.2.18 可溶性胶原的检测 | 第34-35页 |
2.2.19 常温孵育法与超声法 | 第35页 |
2.2.20 统计分析 | 第35页 |
2.3 结果 | 第35-60页 |
2.3.1 miR-373与肝纤维化密切相关 | 第35-36页 |
2.3.2 miR-373抑制LX-2细胞的胶原合成 | 第36-40页 |
2.3.3 miR-373调控肝星状细胞的TGF-βR2表达 | 第40-44页 |
2.3.4 HucMSC-ex改善肝纤维化 | 第44-50页 |
2.3.5 HucMSC-ex-miR-373调控TGF-βR2表达和胶原合成 | 第50-55页 |
2.3.6 miR-373修饰的hucMSC-ex促进肝纤维化修复 | 第55-60页 |
2.4 讨论 | 第60-63页 |
第三章 HucMSC-ex转运Let-7b缓解肝纤维化 | 第63-68页 |
3.1 材料 | 第63页 |
3.1.1 实验动物 | 第63页 |
3.1.2 细胞株 | 第63页 |
3.1.3 主要试剂 | 第63页 |
3.1.4 主要的仪器及相关耗材 | 第63页 |
3.2 | 第63-64页 |
3.2.1 小鼠肝纤维化模型建立、HucMSC-ex移植治疗 | 第63-64页 |
3.2.2 RNA的提取、逆转录、荧光定量PCR | 第64页 |
3.2.3 细胞蛋白提取、Westernblot | 第64页 |
3.2.4 免疫组织化学法 | 第64页 |
3.2.5 细胞免疫荧光 | 第64页 |
3.3 结果 | 第64-67页 |
3.3.1 HucMSC-ex调控TGF-βR | 第64-65页 |
3.3.2 HucMSC-ex通过Let-7b调控TGF-βR1,抑制肝纤维化 | 第65-67页 |
3.4 讨论 | 第67-68页 |
第四章 总结与展望 | 第68-70页 |
4.1 结论 | 第68页 |
4.2 展望 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议 | 第79页 |
一、发表论文 | 第79页 |
二、参加会议 | 第79页 |
三、获奖情况 | 第79页 |