| 中文摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第15-34页 |
| 1.1 动物源胶原蛋白 | 第15-22页 |
| 1.1.1 动物源性材料 | 第15页 |
| 1.1.2 胶原蛋白结构及其跨膜受体 | 第15-20页 |
| 1.1.3 动物源胶原蛋白的应用安全性 | 第20-22页 |
| 1.2 胶原蛋白的免疫原性 | 第22-26页 |
| 1.2.1 来源与影响因素 | 第23-24页 |
| 1.2.1.1 胶原分子上的抗原决定簇 | 第23-24页 |
| 1.2.1.2 细胞及细胞表面抗原 | 第24页 |
| 1.2.2 清除方法 | 第24-26页 |
| 1.2.2.1 脱细胞 | 第25页 |
| 1.2.2.2 杂蛋白清除 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 交联 | 第26页 |
| 1.3 胶原蛋白的医学应用 | 第26-31页 |
| 1.3.1 皮肤敷料 | 第27-29页 |
| 1.3.2 止血材料 | 第29-30页 |
| 1.3.3 骨修复材料 | 第30-31页 |
| 1.4 本论文的主要内容 | 第31-33页 |
| 1.5 论文的创新性 | 第33-34页 |
| 第二章 Ⅰ型胶原免疫原清除方法研究 | 第34-63页 |
| 前言 | 第34页 |
| 2.1 材料和方法 | 第34-45页 |
| 2.1.1 端肽清除 | 第34-37页 |
| 2.1.1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1.2 红外光谱分析 | 第35-36页 |
| 2.1.1.3 透射电镜分析 | 第36页 |
| 2.1.1.4 圆二色谱分析 | 第36-37页 |
| 2.1.1.5 端肽含量测定 | 第37页 |
| 2.1.2 脱细胞和去除杂蛋白 | 第37-39页 |
| 2.1.2.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.2.2 脱细胞处理 | 第38页 |
| 2.1.2.3 BSA染色极限 | 第38页 |
| 2.1.2.4 SDS-PAGE电泳 | 第38页 |
| 2.1.2.5 高效液相色谱分析 | 第38-39页 |
| 2.1.3 残留核酸清除 | 第39-40页 |
| 2.1.3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.3.2 荧光染色分析 | 第40页 |
| 2.1.3.3 数据分析 | 第40页 |
| 2.1.4 外源微生物清除 | 第40-43页 |
| 2.1.4.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 2.1.4.2 病毒培养 | 第42页 |
| 2.1.4.3 TCID50测定 | 第42页 |
| 2.1.4.4 表面活性剂处理 | 第42页 |
| 2.1.4.5 碱处理 | 第42-43页 |
| 2.1.4.6 低pH孵化 | 第43页 |
| 2.1.5 脂多糖清除和内毒素检查 | 第43-45页 |
| 2.1.5.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.1.5.2 脂多糖清除 | 第44页 |
| 2.1.5.2 内毒素实验 | 第44-45页 |
| 2.2 结果和讨论 | 第45-61页 |
| 2.2.1 胶原的三螺旋结构 | 第45-46页 |
| 2.2.2 端肽含量 | 第46-47页 |
| 2.2.3 胶原蛋白纯度 | 第47-48页 |
| 2.2.4 杂蛋白含量 | 第48-51页 |
| 2.2.5 残留DNA含量 | 第51-53页 |
| 2.2.6 病毒灭活 | 第53-58页 |
| 2.2.6.1 病毒TCID50 | 第53-54页 |
| 2.2.6.2 洗必泰灭活病毒 | 第54-56页 |
| 2.2.6.3 NaOH灭活效果 | 第56-57页 |
| 2.2.6.4 酸灭活作用 | 第57-58页 |
| 2.2.8 内毒素检查 | 第58-61页 |
| 2.2.8.1 灵敏度复核 | 第58-59页 |
| 2.2.8.2 胶原中的内毒素 | 第59-61页 |
| 2.3 本章小结 | 第61-63页 |
| 第三章 Ⅰ型胶原免疫清除效果评价和毒理学研究 | 第63-115页 |
| 前言 | 第63-65页 |
| 3.1 材料和方法 | 第65-82页 |
| 3.1.1 豚鼠主动皮肤过敏试验 | 第65-67页 |
| 3.1.1.1 实验材料 | 第65页 |
| 3.1.1.2 动物分组和给药 | 第65-66页 |
| 3.1.1.3 观察指标和评分标准 | 第66-67页 |
| 3.1.2 豚鼠最大化试验 | 第67-70页 |
| 3.1.2.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 3.1.2.2 预实验 | 第68-69页 |
| 3.1.2.3 动物分组和剂量设置 | 第69页 |
| 3.1.2.4 皮内诱导和局部诱导 | 第69-70页 |
| 3.1.2.5 激发试验 | 第70页 |
| 3.1.3 不同剂量长期给药对BALB/C小鼠免疫器官的毒性 | 第70-74页 |
| 3.1.3.1 实验材料 | 第70-71页 |
| 3.1.3.2 动物分组和剂量设置 | 第71页 |
| 3.1.3.3 给药和组织取材 | 第71-72页 |
| 3.1.3.4 血液学和病理学检查 | 第72-73页 |
| 3.1.3.5 抗核抗体检测 | 第73-74页 |
| 3.1.3.6 统计分析 | 第74页 |
| 3.1.4 细胞免疫实验 | 第74-78页 |
| 3.1.4.1 实验材料 | 第74-75页 |
| 3.1.4.2 分组、剂量设计与给药 | 第75-76页 |
| 3.1.4.3 淋巴细胞分离 | 第76页 |
| 3.1.4.4 淋巴细胞增殖试验 | 第76页 |
| 3.1.4.5 乳酸脱氢酶试验 | 第76页 |
| 3.1.4.6 T淋巴细胞亚群分析 | 第76-77页 |
| 3.1.4.7 统计分析 | 第77-78页 |
| 3.1.5 KM小鼠碳粒廓清试验 | 第78-80页 |
| 3.1.5.1 实验材料 | 第78-79页 |
| 3.1.5.2 分组与剂量设计 | 第79页 |
| 3.1.5.3 碳粒廓清试验 | 第79-80页 |
| 3.1.6 体液免疫反应 | 第80-82页 |
| 3.1.6.1 实验材料 | 第80-81页 |
| 3.1.6.2 分组、剂量设计和给药 | 第81页 |
| 3.1.6.3 血清总IgE、IgG、IgM、C3a、C5a测定 | 第81页 |
| 3.1.6.4 统计分析 | 第81-82页 |
| 3.2 结果和讨论 | 第82-114页 |
| 3.2.1 主动皮肤过敏反应 | 第82-85页 |
| 3.2.2 致敏反应 | 第85-89页 |
| 3.2.2.1 动物一般观察 | 第85-86页 |
| 3.2.2.2 过敏反应症状评分 | 第86-89页 |
| 3.2.3 免疫器官毒性 | 第89-101页 |
| 3.2.3.1 一般观察 | 第89页 |
| 3.2.3.2 系统解剖检查 | 第89页 |
| 3.2.3.3 脏器重量与脏器系数 | 第89-92页 |
| 3.2.3.4 组织病理学 | 第92-96页 |
| 3.2.3.5 抗核抗体分析 | 第96-97页 |
| 3.2.3.6 血液学检查 | 第97-100页 |
| 3.2.3.7 统计分析 | 第100-101页 |
| 3.2.4 细胞免疫应答反应 | 第101-106页 |
| 3.2.4.1 一般观察 | 第102页 |
| 3.2.4.2 淋巴细胞增殖和NK细胞杀伤能力试验 | 第102-103页 |
| 3.2.4.3 流式细胞分析淋巴细胞亚群 | 第103-106页 |
| 3.2.5 吞噬细胞效应 | 第106-107页 |
| 3.2.5.1 一般观察 | 第106页 |
| 3.2.5.2 廓清指数K和吞噬指数a测定 | 第106-107页 |
| 3.2.5.3 脾脏指数s和胸腺指数t测定 | 第107页 |
| 3.2.6 体液免疫反应 | 第107-114页 |
| 3.2.6.1 一般观察 | 第107-108页 |
| 3.2.6.2 血清总IgE、IgM、IgG抗体水平 | 第108-114页 |
| 3.3 本章小结 | 第114-115页 |
| 第四章 动物源胶原的医学应用研究 | 第115-134页 |
| 前言 | 第115-116页 |
| 4.1 材料和方法 | 第116-121页 |
| 4.1.1 胶原敷料用于糖尿病皮肤缺损修复 | 第116-118页 |
| 4.1.1.1 实验材料 | 第116-117页 |
| 4.1.1.2 糖尿病大鼠模型的制作 | 第117-118页 |
| 4.1.1.3 创面愈合分析 | 第118页 |
| 4.1.1.4 成纤维细胞和新生血管计数 | 第118页 |
| 4.1.1.5 组织学分析 | 第118页 |
| 4.1.1.6 统计学分析 | 第118页 |
| 4.1.2 胶原膜用于骨缺损的修复 | 第118-121页 |
| 4.1.2.1 实验材料 | 第118-119页 |
| 4.1.2.2 造模及材料植入 | 第119页 |
| 4.1.2.3 X光片检查 | 第119-120页 |
| 4.1.2.4 组织病理分析 | 第120页 |
| 4.1.2.5 血常规检查 | 第120页 |
| 4.1.2.6 血清抗体水平 | 第120页 |
| 4.1.2.7 统计学分析 | 第120-121页 |
| 4.2 结果和讨论 | 第121-133页 |
| 4.2.1 糖尿病皮肤修复及组织相容性 | 第121-127页 |
| 4.2.1.1 造模及模型的稳定性 | 第121-122页 |
| 4.2.1.2 组织修复观察 | 第122页 |
| 4.2.1.3 创面愈合环境 | 第122-124页 |
| 4.2.1.4 局部组织炎症反应 | 第124-125页 |
| 4.2.1.5 成纤维细胞计数 | 第125-126页 |
| 4.2.1.6 局部毛细血管新生 | 第126-127页 |
| 4.2.2 胶原膜促进骨折愈合修复 | 第127-133页 |
| 4.2.2.1 造模及模型的稳定性 | 第127页 |
| 4.2.2.2 血常规变化 | 第127-129页 |
| 4.2.2.3 血清抗体检查 | 第129页 |
| 4.2.2.4 骨折愈合评分 | 第129-131页 |
| 4.2.2.5 组织学观察 | 第131-132页 |
| 4.2.2.6 植入部位炎症反应 | 第132-133页 |
| 4.3 本章小结 | 第133-134页 |
| 第五章 结论 | 第134-137页 |
| 参考文献 | 第137-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
