| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 引言 | 第16-23页 |
| 0.1 概述 | 第16-17页 |
| 0.2 肾结石与尿蛋白 | 第17-18页 |
| 0.3 基质γ-羧基谷氨酸蛋白 | 第18-20页 |
| 0.4 MGP蛋白生物学作用 | 第20-22页 |
| 0.4.1 MGP与血管钙化 | 第20-21页 |
| 0.4.2 MGP与肾脏钙化 | 第21-22页 |
| 0.5 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 第1章 MGP基因表达改变对肾结石形成的影响 | 第23-41页 |
| 1.1 实验材料 | 第23-28页 |
| 1.1.1 生化试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.2 主要耗材 | 第25-26页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 1.2 实验方法 | 第28-36页 |
| 1.2.1 HK-2细胞培养 | 第28-30页 |
| 1.2.1.1 HK-2细胞复苏 | 第28页 |
| 1.2.1.2 HK-2细胞换液 | 第28-29页 |
| 1.2.1.3 HK-2细胞传代 | 第29-30页 |
| 1.2.1.4 HK-2细胞冻存 | 第30页 |
| 1.2.2 Ad-MGP、Ad-siMGP感染HK-2细胞最适感染复数确定 | 第30-31页 |
| 1.2.3 RT-qPCR确认重组腺病感染HK-2细胞后MGP mRNA表达量变化情况 | 第31-35页 |
| 1.2.4 原子吸收光谱测定MGP基因表达变化对结晶与HK-2细胞黏着力的影响 | 第35-36页 |
| 1.2.5 数据及统计学处理 | 第36页 |
| 1.3 结果与讨论 | 第36-39页 |
| 1.3.1 Ad-MGP、Ad-siMGP感染HK-2细胞后显著上调或下调MGP mRNA表达量 | 第36-38页 |
| 1.3.2 上调或下调MGP基因表达量能显著减低或增强草酸钙结晶与HK-2细胞间黏着力 | 第38-39页 |
| 1.4 结论 | 第39-41页 |
| 第2章 MGP蛋白活性改变对草酸钙结晶诱导HK-2细胞损伤的影响 | 第41-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-47页 |
| 2.2.1 台盼蓝染色计数法确定维生素K1、华法令药物浓度 | 第41-43页 |
| 2.2.1.1 维生素K1、华法令药物配制 | 第41页 |
| 2.2.1.2 HK-2细胞计数 | 第41-43页 |
| 2.2.2 MGP活性改变对草酸钙结晶诱导HK-2细胞损伤及凋亡的影响 | 第43-45页 |
| 2.2.2.1 MTT毒性实验检测MGP活性变化对HK-2细胞损伤作用研究 | 第43-44页 |
| 2.2.2.2 DAPI染色实验检测MGP活性变化对HK-2细胞凋亡作用研究 | 第44-45页 |
| 2.2.3 原子吸收光谱法检测MGP活性变化对结晶与HK-2细胞黏着力的影响 | 第45-46页 |
| 2.2.4 原子吸收光谱法测定维生素K1通过改变MGP活性对HK-2细胞起保护作用 | 第46-47页 |
| 2.2.5 数据及统计学处理 | 第47页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第47-55页 |
| 2.3.1 维生素K1和华法令最适药物浓度的摸索和确定 | 第47-50页 |
| 2.3.2 MGP蛋白活性变化对HK-2细胞损伤有显著保护作用 | 第50-51页 |
| 2.3.3 MGP蛋白活性变化对HK-2细胞凋亡有显著保护作用 | 第51-53页 |
| 2.3.4 MGP蛋白活性变化对结晶与HK-2细胞黏着力有显著影响 | 第53-54页 |
| 2.3.5 维生素K1对肾小管上皮细胞的保护作用通过增强MGP的活性实现 | 第54-55页 |
| 2.4 结论 | 第55-56页 |
| 第3章 维生素K1对SD大鼠肾脏结石形成的作用研究 | 第56-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 3.1.1 实验用动物 | 第56页 |
| 3.1.2 生化试剂 | 第56-57页 |
| 3.1.3 主要耗材 | 第57页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第57-58页 |
| 3.1.5 试剂配制 | 第58页 |
| 3.2 实验方法 | 第58-60页 |
| 3.2.1 模型动物的分组情况及给药方式 | 第58页 |
| 3.2.2 大鼠处死方法及过程 | 第58-59页 |
| 3.2.3 大鼠肾脏组织石蜡包埋切片实验步骤 | 第59页 |
| 3.2.4 大鼠肾脏组织切片HE染色 | 第59-60页 |
| 3.2.5 数据及统计学处理 | 第60页 |
| 3.3 实验结果 | 第60-62页 |
| 3.3.1 维生素K1对抑制SD大鼠肾脏结晶有显著作用 | 第60-62页 |
| 3.4 结论 | 第62-64页 |
| 第4章 结果与展望 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第75-76页 |
