| 个人简历 | 第3-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一部分 慢病毒载体构建并建立稳定转染的CNE-2R细胞株 | 第13-34页 |
| 引言 | 第13页 |
| 1.1 材料 | 第13-16页 |
| 1.1.1 细胞株及载体 | 第13-14页 |
| 1.1.2 主要试剂及仪器 | 第14-16页 |
| 1.2 试验方法 | 第16-28页 |
| 1.2.1 细胞复苏 | 第16页 |
| 1.2.2 细胞消化、传代 | 第16-17页 |
| 1.2.3 细胞冻存 | 第17-18页 |
| 1.2.4 总RNA抽提、浓度、纯度测定及质量检测 | 第18-19页 |
| 1.2.5 qRT-PCR实验验证XAF1基因的表达 | 第19-21页 |
| 1.2.6 Westernblot实验验证XAF1基因的表达 | 第21-24页 |
| 1.2.7 重组慢病毒载体制备 | 第24-26页 |
| 1.2.8 CNE-2R细胞转染 | 第26页 |
| 1.2.9 嘌呤霉素筛选和阳性克隆的获取 | 第26-28页 |
| 1.3 结果 | 第28-32页 |
| 1.3.1 Westernblot实验检测XAF1基因的表达情况 | 第28页 |
| 1.3.2 慢病毒载体测序结果 | 第28-29页 |
| 1.3.3 荧光显微镜下观察转染的细胞 | 第29-30页 |
| 1.3.4 qRT-PCR验证XAF1mRNA的表达 | 第30-31页 |
| 1.3.5 蛋白质印迹法验证转染CNE-2R细胞中XAF1的表达 | 第31-32页 |
| 1.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第二部分 慢病毒介导的XAF1基因过表达对放射抗拒人鼻咽癌CNE-2R细胞生物学行为及放射敏感性的影响 | 第34-44页 |
| 引言 | 第34页 |
| 2.1 材料 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.2.1 CCK-8实验检测XAF1基因转染前后其对生长的影响 | 第34-35页 |
| 2.2.2 克隆形成实验检测XAF1基因转染前后其放射敏感性的变化 | 第35-36页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测CNE-2R细胞高表达XAF1后其细胞周期的变化 | 第36页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测三组细胞凋亡率的变化 | 第36-37页 |
| 2.2.5 数据统计分析方法 | 第37-38页 |
| 2.3 结果 | 第38-42页 |
| 2.3.1 CCK-8实验检测感染前后细胞生长情况的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.2 克隆形成实验检测XAF1转染前后其放射敏感性的变化 | 第39-40页 |
| 2.3.3 流失细胞术检测CNE-2R细胞高表达XAF1后其细胞周期的变化 | 第40页 |
| 2.3.4 慢病毒感染联合射线照射对细胞凋亡的影响 | 第40-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 综述 | 第50-70页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第73页 |
