| 中文摘要 | 第4-9页 |
| abstract | 第9-14页 |
| 引言 | 第18-23页 |
| 第一部分 电离辐射旁效应对小鼠皮肤损伤愈合的影响 | 第23-32页 |
| 材料 | 第23-24页 |
| 一、实验细胞及动物 | 第23页 |
| 二、实验器材 | 第23-24页 |
| 三、实验试剂 | 第24页 |
| 方法 | 第24-26页 |
| 一、活体照射 | 第24页 |
| 二、活体共培养 | 第24-25页 |
| 三、Western Blot检测受照小鼠皮肤γH2AX表达水平 | 第25页 |
| 四、统计学方法 | 第25-26页 |
| 实验结果 | 第26-30页 |
| 一、α粒子直接照射对小鼠皮肤伤口愈合的影响 | 第26-28页 |
| 二、电离辐射旁效应对受α粒子照射小鼠皮肤伤口愈合减慢的贡献 | 第28-30页 |
| 讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分 电离辐射旁效应对皮肤细胞迁移速度的影响及其内在机制研究 | 第32-74页 |
| 材料 | 第32-36页 |
| 一、实验细胞 | 第32页 |
| 二、主要器材 | 第32-33页 |
| 三、主要试剂 | 第33-36页 |
| 四、其他材料见第一部分 | 第36页 |
| 方法 | 第36-45页 |
| 一、细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第36-37页 |
| 二、辐照条件 | 第37页 |
| 三、旁效应研究方法：共培养法 | 第37-38页 |
| 四、划痕实验检测旁效应细胞的迁移 | 第38页 |
| 五、WST-1实验检测旁效应细胞的增殖 | 第38-39页 |
| 六、旁效应细胞胞内ROS水平的测定 | 第39页 |
| 七、基因芯片样品制备 | 第39-40页 |
| 八、细胞转染 | 第40页 |
| 九、细胞microRNA的提取 | 第40-41页 |
| 十、cDNA的合成 | 第41页 |
| 十一、Real-timePCR检测miR-27a/b的表达 | 第41-42页 |
| 十二、Western Blot检测旁效应细胞的SOD2及MMP2表达水平 | 第42页 |
| 十三、外泌体提取 | 第42页 |
| 十四、外泌体电镜制样 | 第42-43页 |
| 十五、外泌体粒径测量 | 第43页 |
| 十六、外泌体荧光标记 | 第43页 |
| 十七、绝对定量Real-time PCR标准曲线绘制 | 第43-44页 |
| 十八、荧光素酶报告基因实验 | 第44页 |
| 十九、病毒感染 | 第44页 |
| 二十、统计学方法 | 第44-45页 |
| 实验结果 | 第45-71页 |
| 一、共培养可以诱导旁效应细胞迁移速度改变 | 第45-46页 |
| 二、共培养对旁效应细胞增殖能力的影响 | 第46-47页 |
| 三、旁效应细胞胞内ROS水平与其迁移速度的关系 | 第47-50页 |
| 四、miR-27a对电离辐射旁效应具有调控作用 | 第50-56页 |
| 五、外泌体介导电离辐射旁效应的信号传递 | 第56-66页 |
| 六、靶基因筛选 | 第66-71页 |
| 讨论 | 第71-74页 |
| 第三部分 外泌体介导的电离辐射旁效应影响伤口愈合在活体动物上的验证 | 第74-79页 |
| 材料 | 第74页 |
| 一、实验细胞及动物 | 第74页 |
| 二、实验器材及试剂 | 第74页 |
| 三、其他材料见第一二部分 | 第74页 |
| 方法 | 第74-75页 |
| 一、活体注射 | 第74-75页 |
| 二、外泌体荧光标记活体追踪 | 第75页 |
| 三、统计学方法 | 第75页 |
| 实验结果 | 第75-78页 |
| 一、外泌体对小鼠皮肤伤口愈合的影响 | 第75-77页 |
| 二、人重组蛋白MMP2对小鼠皮肤伤口愈合的影响 | 第77-78页 |
| 讨论 | 第78-79页 |
| 第四部分 连续α照射对二维培养和三维组织中HaCaT细胞的影响 | 第79-89页 |
| 材料 | 第79-80页 |
| 一、实验细胞 | 第79页 |
| 二、实验器材和试剂 | 第79-80页 |
| 三、其他器材和试剂见前三部分 | 第80页 |
| 方法 | 第80-85页 |
| 一、三维皮肤模型构建 | 第80-81页 |
| 二、三维皮肤组织的辐照 | 第81页 |
| 三、三维胶原皮肤组织模型的脱水、包埋和切片 | 第81-82页 |
| 四、HE染色 | 第82-83页 |
| 五、免疫组织化学染色 | 第83-85页 |
| 结果 | 第85-88页 |
| 一、三维皮肤模型构建 | 第85-86页 |
| 二、连续α粒子照射对单层角质细胞和三维人造皮肤的影响 | 第86-88页 |
| 讨论 | 第88-89页 |
| 结论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 综述 | 第100-108页 |
| 参考文献 | 第103-108页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论文 | 第108-109页 |
| 缩略词表 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
