摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-29页 |
1.1 研究背景 | 第12页 |
1.2 食品中Bc的研究 | 第12-16页 |
1.2.1 Bc的生物学特性 | 第12-13页 |
1.2.2 Bc给人类带来的危害 | 第13-14页 |
1.2.2.1 Bc引起的食物中毒 | 第13页 |
1.2.2.2 Bc引起的人类疾病 | 第13-14页 |
1.2.3 Bc产生的毒素及致病机制 | 第14页 |
1.2.3.1 呕吐毒素 | 第14页 |
1.2.3.2 腹泻毒素 | 第14页 |
1.2.4 Bc的限量标准 | 第14-15页 |
1.2.5 Bc的控制方法 | 第15-16页 |
1.3 细菌素 | 第16-23页 |
1.3.1 细菌素的发现与定义 | 第16页 |
1.3.2 细菌素的分类 | 第16-17页 |
1.3.3 细菌素的抑菌谱 | 第17页 |
1.3.4 细菌素的相关基因 | 第17-18页 |
1.3.5 细菌素的理化特性 | 第18页 |
1.3.6 细菌素合成的理化条件 | 第18页 |
1.3.6.1 pH对细菌素合成的影响 | 第18页 |
1.3.6.2 温度对细菌素合成的影响 | 第18页 |
1.3.7 细菌素与抗生素、其它抗菌肽的区别 | 第18-19页 |
1.3.7.1 细菌素与抗生素的区别 | 第18页 |
1.3.7.2 细菌素与抗菌肽的区别 | 第18-19页 |
1.3.8 细菌素的作用机制 | 第19-20页 |
1.3.8.1 革兰氏阳性菌细菌素的作用机制 | 第19-20页 |
1.3.8.2 革兰氏阴性菌细菌素的作用机制 | 第20页 |
1.3.9 细菌素的应用 | 第20-23页 |
1.3.9.1 细菌素在食品保鲜中的应用 | 第20-21页 |
1.3.9.2 细菌素在医学中的应用 | 第21-22页 |
1.3.9.3 细菌素在饲料中的应用 | 第22页 |
1.3.9.4 细菌素在动物疾病防治中的应用 | 第22-23页 |
1.3.9.5 细菌素在水产养殖中的应用 | 第23页 |
1.4 苏云金芽胞杆菌细菌素 | 第23-27页 |
1.4.1 苏云金芽胞杆菌概述 | 第23-24页 |
1.4.2 Bt细菌素的分类 | 第24-25页 |
1.4.3 Bt细菌素研究现状 | 第25-27页 |
1.5 本研究的立题依据和意义 | 第27-29页 |
1.5.1 立题依据 | 第27-28页 |
1.5.2 研究意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-44页 |
2.1 材料 | 第29-36页 |
2.1.1 供试菌株 | 第29-32页 |
2.1.2 培养基 | 第32页 |
2.1.3 试剂 | 第32-36页 |
2.1.3.1 SDS-PAGE试剂 | 第32-33页 |
2.1.3.2 Tricine-SDS-PAGE试剂 | 第33页 |
2.1.3.3 Bradford试剂 | 第33-34页 |
2.1.3.4 其他试剂 | 第34-36页 |
2.1.4 酶类 | 第36页 |
2.1.5 层析柱及其填料 | 第36页 |
2.2 方法 | 第36-44页 |
2.2.1 细菌培养 | 第36页 |
2.2.2 细菌素产生菌筛选 | 第36-37页 |
2.2.3 对菌株发酵液产生细菌素的动态进行监测 | 第37页 |
2.2.4 最佳硫酸铵浓度筛选 | 第37-39页 |
2.2.4.1 硫酸铵沉淀细菌素 | 第37-38页 |
2.2.4.2 Tricine-SDS-PAGE | 第38-39页 |
2.2.5 SDS-PAGE及凝胶原位抑菌活性鉴定 | 第39-40页 |
2.2.5.1 SDS-PAGE | 第39-40页 |
2.2.5.2 凝胶原位抑菌活性鉴定 | 第40页 |
2.2.6 细菌素的理化特性 | 第40-41页 |
2.2.6.1 酶对细菌素稳定性的影响 | 第40页 |
2.2.6.2 温度对细菌素稳定性的影响 | 第40页 |
2.2.6.3 pH对细菌素稳定性的影响 | 第40-41页 |
2.2.7 细菌素的作用方式 | 第41页 |
2.2.7.1 细菌素对Bc营养细胞的作用方式 | 第41页 |
2.2.7.2 细菌素对Bc芽孢的作用方式 | 第41页 |
2.2.8 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第41-42页 |
2.2.9 细菌素的纯化及结构初步鉴定 | 第42-44页 |
2.2.9.1 凝胶过滤层析 | 第42页 |
2.2.9.2 阴离子交换层析 | 第42-43页 |
2.2.9.3 HPLC反相C18层析 | 第43页 |
2.2.9.4 质谱分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-62页 |
3.1 细菌素产生菌的筛选 | 第44-45页 |
3.1.1 以Bc为指示菌进行Bt细菌素产生菌的筛选 | 第44-45页 |
3.1.2 细菌素产生菌Bt BRC-ZYR2抑菌谱的研究 | 第45页 |
3.2 Bt BRC-ZYR2产生细菌素的动态监测 | 第45-47页 |
3.3 细菌素的硫酸铵沉淀及Tricine-SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
3.4 SDS-PAGE及凝胶原位抑菌活性检测 | 第48-49页 |
3.5 细菌素理化性质的研究 | 第49-52页 |
3.5.1 酶对细菌素稳定性的影响 | 第49-50页 |
3.5.2 温度对细菌素稳定性的影响 | 第50-51页 |
3.5.3 pH对细菌素稳定性的影响 | 第51-52页 |
3.6 细菌素的作用方式 | 第52-54页 |
3.6.1 细菌素对Bc营养细胞的作用方式 | 第52-53页 |
3.6.2 细菌素对Bc芽孢的作用方式 | 第53-54页 |
3.7 细菌素的纯化及结构初步鉴定 | 第54-62页 |
3.7.1 凝胶过滤层析 | 第54-56页 |
3.7.2 阴离子交换层析 | 第56-57页 |
3.7.3 HPLC反相C18层析 | 第57-59页 |
3.7.4 电泳鉴定结果 | 第59-60页 |
3.7.5 质谱结果 | 第60-62页 |
4 结论与讨论 | 第62-65页 |
5 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
硕士期间发表的论文 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |