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苏云金芽胞杆菌BRC-ZYR2细菌素的活性、作用方式及结构初步鉴定

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-29页
    1.1 研究背景第12页
    1.2 食品中Bc的研究第12-16页
        1.2.1 Bc的生物学特性第12-13页
        1.2.2 Bc给人类带来的危害第13-14页
            1.2.2.1 Bc引起的食物中毒第13页
            1.2.2.2 Bc引起的人类疾病第13-14页
        1.2.3 Bc产生的毒素及致病机制第14页
            1.2.3.1 呕吐毒素第14页
            1.2.3.2 腹泻毒素第14页
        1.2.4 Bc的限量标准第14-15页
        1.2.5 Bc的控制方法第15-16页
    1.3 细菌素第16-23页
        1.3.1 细菌素的发现与定义第16页
        1.3.2 细菌素的分类第16-17页
        1.3.3 细菌素的抑菌谱第17页
        1.3.4 细菌素的相关基因第17-18页
        1.3.5 细菌素的理化特性第18页
        1.3.6 细菌素合成的理化条件第18页
            1.3.6.1 pH对细菌素合成的影响第18页
            1.3.6.2 温度对细菌素合成的影响第18页
        1.3.7 细菌素与抗生素、其它抗菌肽的区别第18-19页
            1.3.7.1 细菌素与抗生素的区别第18页
            1.3.7.2 细菌素与抗菌肽的区别第18-19页
        1.3.8 细菌素的作用机制第19-20页
            1.3.8.1 革兰氏阳性菌细菌素的作用机制第19-20页
            1.3.8.2 革兰氏阴性菌细菌素的作用机制第20页
        1.3.9 细菌素的应用第20-23页
            1.3.9.1 细菌素在食品保鲜中的应用第20-21页
            1.3.9.2 细菌素在医学中的应用第21-22页
            1.3.9.3 细菌素在饲料中的应用第22页
            1.3.9.4 细菌素在动物疾病防治中的应用第22-23页
            1.3.9.5 细菌素在水产养殖中的应用第23页
    1.4 苏云金芽胞杆菌细菌素第23-27页
        1.4.1 苏云金芽胞杆菌概述第23-24页
        1.4.2 Bt细菌素的分类第24-25页
        1.4.3 Bt细菌素研究现状第25-27页
    1.5 本研究的立题依据和意义第27-29页
        1.5.1 立题依据第27-28页
        1.5.2 研究意义第28-29页
2 材料与方法第29-44页
    2.1 材料第29-36页
        2.1.1 供试菌株第29-32页
        2.1.2 培养基第32页
        2.1.3 试剂第32-36页
            2.1.3.1 SDS-PAGE试剂第32-33页
            2.1.3.2 Tricine-SDS-PAGE试剂第33页
            2.1.3.3 Bradford试剂第33-34页
            2.1.3.4 其他试剂第34-36页
        2.1.4 酶类第36页
        2.1.5 层析柱及其填料第36页
    2.2 方法第36-44页
        2.2.1 细菌培养第36页
        2.2.2 细菌素产生菌筛选第36-37页
        2.2.3 对菌株发酵液产生细菌素的动态进行监测第37页
        2.2.4 最佳硫酸铵浓度筛选第37-39页
            2.2.4.1 硫酸铵沉淀细菌素第37-38页
            2.2.4.2 Tricine-SDS-PAGE第38-39页
        2.2.5 SDS-PAGE及凝胶原位抑菌活性鉴定第39-40页
            2.2.5.1 SDS-PAGE第39-40页
            2.2.5.2 凝胶原位抑菌活性鉴定第40页
        2.2.6 细菌素的理化特性第40-41页
            2.2.6.1 酶对细菌素稳定性的影响第40页
            2.2.6.2 温度对细菌素稳定性的影响第40页
            2.2.6.3 pH对细菌素稳定性的影响第40-41页
        2.2.7 细菌素的作用方式第41页
            2.2.7.1 细菌素对Bc营养细胞的作用方式第41页
            2.2.7.2 细菌素对Bc芽孢的作用方式第41页
        2.2.8 Bradford法测定蛋白质浓度第41-42页
        2.2.9 细菌素的纯化及结构初步鉴定第42-44页
            2.2.9.1 凝胶过滤层析第42页
            2.2.9.2 阴离子交换层析第42-43页
            2.2.9.3 HPLC反相C18层析第43页
            2.2.9.4 质谱分析第43-44页
3 结果与分析第44-62页
    3.1 细菌素产生菌的筛选第44-45页
        3.1.1 以Bc为指示菌进行Bt细菌素产生菌的筛选第44-45页
        3.1.2 细菌素产生菌Bt BRC-ZYR2抑菌谱的研究第45页
    3.2 Bt BRC-ZYR2产生细菌素的动态监测第45-47页
    3.3 细菌素的硫酸铵沉淀及Tricine-SDS-PAGE检测第47-48页
    3.4 SDS-PAGE及凝胶原位抑菌活性检测第48-49页
    3.5 细菌素理化性质的研究第49-52页
        3.5.1 酶对细菌素稳定性的影响第49-50页
        3.5.2 温度对细菌素稳定性的影响第50-51页
        3.5.3 pH对细菌素稳定性的影响第51-52页
    3.6 细菌素的作用方式第52-54页
        3.6.1 细菌素对Bc营养细胞的作用方式第52-53页
        3.6.2 细菌素对Bc芽孢的作用方式第53-54页
    3.7 细菌素的纯化及结构初步鉴定第54-62页
        3.7.1 凝胶过滤层析第54-56页
        3.7.2 阴离子交换层析第56-57页
        3.7.3 HPLC反相C18层析第57-59页
        3.7.4 电泳鉴定结果第59-60页
        3.7.5 质谱结果第60-62页
4 结论与讨论第62-65页
5 展望第65-66页
参考文献第66-73页
硕士期间发表的论文第73-74页
致谢第74页

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