| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| 1.1 引言 | 第8-9页 |
| 1.2 研究背景 | 第9-12页 |
| 1.2.1 昆虫病原真菌致病机理的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2.2 甘露糖基转移酶Pmt家族的相关研究进展 | 第10-12页 |
| 1.3 立题依据及研究目的 | 第12-13页 |
| 1.4 研究内容 | 第13页 |
| 1.5 技术路线 | 第13-14页 |
| 1.6 本研究创新之处 | 第14-16页 |
| 2 绿僵菌MaPmts的功能分析 | 第16-74页 |
| 2.1 主要材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 供试菌株和昆虫 | 第16页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要培养基、实验溶液 | 第17-18页 |
| 2.1.5 主要设备 | 第18-19页 |
| 2.2 主要方法 | 第19-33页 |
| 2.2.1 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第19-20页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌感受态细胞的制备及电转化农杆菌 | 第20页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌与绿僵菌共培养 | 第20-21页 |
| 2.2.4 微量提取真菌的基因组 | 第21-22页 |
| 2.2.5 基因全长比对及cDNA ORF全长克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.6 MaPmts基因的生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.7 MaPmt1/4 基因的敲除、回复、超表达载体的构建 | 第23-27页 |
| 2.2.8 初步筛选验证敲除菌株、回复菌株 | 第27-28页 |
| 2.2.9 Southern blot验证MaPmt1/4 敲除、回复菌株 | 第28-29页 |
| 2.2.10 MaPmt1/2/4 生长特性分析 | 第29-30页 |
| 2.2.11 MaPmt1/2/4 逆境敏感性分析 | 第30页 |
| 2.2.12 毒力实验分析 | 第30页 |
| 2.2.13 蝗虫血淋巴中虫菌体的观察 | 第30-31页 |
| 2.2.14 蝗虫后翅上孢子的萌发、附着胞的形成 | 第31页 |
| 2.2.15 细胞壁组分荧光染色 | 第31-32页 |
| 2.2.16 几丁质含量测定 | 第32页 |
| 2.2.17 β-1,3-葡聚糖含量测定 | 第32页 |
| 2.2.18 真菌细胞壁甘露糖蛋白含量测定 | 第32-33页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第33-70页 |
| 2.3.1 生物信息学分析MaPmt1/2/4 基因 | 第33-35页 |
| 2.3.2 MaPmt1/2/4 重组载体的构建及转化菌株验证 | 第35-38页 |
| 2.3.3 MaPmt1/2/4 基因对绿僵菌生长和抗逆能力的影响 | 第38-50页 |
| 2.3.4 敲除或干扰MaPmts家族基因的绿僵菌毒力检测 | 第50-52页 |
| 2.3.5 绿僵菌MaPmt4 基因缺失在蝗虫血淋巴中的生长 | 第52-53页 |
| 2.3.6 绿僵菌MaPmts基因的缺失或干扰影响其在蝗虫后翅上孢子萌发、附着胞形成及膨压 | 第53-57页 |
| 2.3.7 绿僵菌细胞壁组分和结构分析 | 第57-70页 |
| 2.4 讨论 | 第70-74页 |
| 2.4.1 PMT 家族各成员对绿僵菌生长的贡献度是不同的 | 第71页 |
| 2.4.2 MaPmts基因与绿僵菌的逆境敏感性有关 | 第71页 |
| 2.4.3 MaPmts基因与绿僵菌的毒力有关 | 第71-72页 |
| 2.4.4 Ma Pmts 与绿僵菌细胞壁的组成和结构相关 | 第72-74页 |
| 3 主要结论和后续工作建议 | 第74-76页 |
| 3.1 主要研究结论 | 第74页 |
| 3.2 后续试验建议 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-90页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录 | 第86-87页 |
| B. 序列 | 第87-90页 |
