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替代激活小胶质细胞通过BDNF信号通路促进神经发生的研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第一章 绪论第10-18页
    1.1 神经发生的研究进展第10-11页
    1.2 成年哺乳动物神经壁龛的研究第11-12页
        1.2.1 血管对神经发生的作用第11页
        1.2.2 星形胶质细胞对神经发生的作用第11页
        1.2.3 室管膜细胞对神经发生的作用第11-12页
    1.3 小胶质细胞对神经发生的作用第12-15页
        1.3.1 静息状态的小胶质细胞对神经发生的作用第12-13页
        1.3.2 经典激活的小胶质细胞对神经发生的作用第13页
        1.3.3 替代激活的小胶质细胞对神经发生的影响第13-15页
    1.4 脑源性神经营养因子与神经发生的作用第15-17页
    1.5 本文的主要研究内容和结构安排第17-18页
第二章 N9小胶质细胞的激活状态的研究第18-30页
    2.1 前言第18页
    2.2 实验材料第18-20页
        2.2.1 实验设备和仪器第18页
        2.2.2 实验药品与试剂第18-20页
    2.3 实验方法第20-24页
        2.3.1 细胞的培养第20-21页
        2.3.2 细胞给药刺激第21页
        2.3.3 提取细胞总RNA第21-22页
        2.3.4 反转录合成cDNA模板第22页
        2.3.5 Real-Time PCR检测细胞因子的表达第22-23页
        2.3.6 细胞的固定第23-24页
        2.3.7 免疫荧光细胞化学第24页
        2.3.8 统计分析第24页
    2.4 实验结果第24-28页
        2.4.1 N9小胶质细胞形态第24-25页
        2.4.2 IFN-γ 或IL-4 对N9小胶质细胞M1型细胞因子表达的影响第25页
        2.4.3 IFN-γ 或IL-4 对N9小胶质细胞M2型细胞因子表达的影响第25-26页
        2.4.4 极化的N9小胶质细胞M2表型标志物蛋白质水平的变化第26-27页
        2.4.5 不同激活状态下N9小胶质细胞BDNF相对表达情况第27-28页
    2.5 讨论第28-30页
第三章 原代小胶质细胞激活状态的研究第30-37页
    3.1 引言第30页
    3.2 实验材料第30-31页
        3.2.1 实验设备和仪器第30页
        3.2.2 实验药品与试剂第30-31页
    3.3 实验方法第31-32页
        3.3.1 原代小细胞的培养第31页
        3.3.2 原代小胶质细胞的分离纯化第31-32页
        3.3.3 原代小胶质细胞给药刺激第32页
        3.3.4 细胞总RNA的提取第32页
        3.3.5 反转录合成cDNA模板第32页
        3.3.6 Real-Time PCR检测细胞因子的表达第32页
        3.3.7 细胞的固定第32页
        3.3.8 免疫荧光细胞化学第32页
        3.3.9 统计分析第32页
    3.4 实验结果第32-36页
        3.4.1 原代小胶质细胞的纯度第32-33页
        3.4.2 IFN-γ 或IL-4 对原代小胶质细胞M1型细胞因子表达的影响第33-34页
        3.4.3 IFN-γ 或IL-4 对原代小胶质细胞M2型细胞因子表达的影响第34-35页
        3.4.4 极化的原代小胶质细胞M2表型标志物蛋白质水平的变化第35页
        3.4.5 不同激活状态下N9小胶质细胞BDNF相对表达情况第35-36页
    3.5 讨论第36-37页
第四章 小胶质细胞与神经前体细胞共培养第37-46页
    4.1 引言第37页
    4.2 实验材料第37-39页
        4.2.1 实验设备和仪器第37页
        4.2.2 实验药品与试剂第37-39页
    4.3 实验方法第39-42页
        4.3.1 神经球的培养第39-40页
        4.3.2 神经干细胞的传代及分化第40页
        4.3.3 小胶质细胞条件培养基的制备第40-41页
        4.3.4 小胶质细胞与神经前体细胞共培养第41页
        4.3.5 原代神经前体细胞分化鉴定第41页
        4.3.6 原代神经前体细胞增殖鉴定第41页
        4.3.7 统计分析第41-42页
    4.4 实验结果第42-45页
        4.4.1 培养的神经前体细胞第42页
        4.4.2 分化的神经前体细胞第42-43页
        4.4.3 小胶质细胞对神经前体细胞的影响第43-45页
    4.5 讨论第45-46页
第五章 总结第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-53页
攻读硕士学位期间取得的成果第53-54页

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