中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-23页 |
1.1 宿主限制因子SERINC(Ser)简介 | 第11-16页 |
1.1.1 SERINC5(Ser5)简介 | 第11-13页 |
1.1.2 SERINC5抗HIV病毒功能简介 | 第13-16页 |
1.2 HIV-1Nef的研究现状 | 第16-20页 |
1.2.1 HIV-1的辅助蛋白 | 第16页 |
1.2.2 HIV-1Nef简介 | 第16-18页 |
1.2.3 Nef对SERINC5的拮抗机制 | 第18-20页 |
1.3 论文设计与实验方案 | 第20-23页 |
1.3.1 论文目的 | 第20-21页 |
1.3.2 实验设计 | 第21-23页 |
第二章 实验材料与方法 | 第23-30页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 细胞和菌株 | 第23页 |
2.1.2 抗体 | 第23页 |
2.1.3 实验室保存质粒列表 | 第23-24页 |
2.2 仪器与设备 | 第24-25页 |
2.3 实验方法及试剂 | 第25-30页 |
2.3.1 质粒的构建 | 第25-27页 |
2.3.2 细胞培养及转染 | 第27页 |
2.3.3 蛋白电泳与免疫印迹 | 第27-28页 |
2.3.4 HIV-1病毒的收集及含量测定 | 第28页 |
2.3.5 HIV-1病毒感染力测定 | 第28页 |
2.3.6 细胞荧光 | 第28页 |
2.3.7 流式细胞仪分析 | 第28-29页 |
2.3.8 免疫沉淀法 | 第29页 |
2.3.9 统计学处理方法 | 第29-30页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第30-54页 |
3.1 真核表达质粒的构建及其在真核系统中的表达验证 | 第30-41页 |
3.1.1 SERINC5质粒构建及表达 | 第30-34页 |
3.1.2 nef质粒构建及表达 | 第34-37页 |
3.1.3 HIV-1NL43(35)nef质粒构建及表达 | 第37-40页 |
3.1.4 讨论与小结 | 第40-41页 |
3.2 Nef拮抗SERINC5的抗病毒能力 | 第41-44页 |
3.2.1 SERINC5抗病毒能力的验证 | 第41-42页 |
3.2.2 Nef对SERINC5抗病毒能力具有拮抗作用 | 第42-43页 |
3.2.3 讨论与小结 | 第43-44页 |
3.3 Nef具有降解SERINC5的能力 | 第44-48页 |
3.3.1 流式细胞术检测Nef对SERINC5的降解 | 第44-45页 |
3.3.2 Westernblot检测Nef对SERINC5的降解 | 第45页 |
3.3.3 细胞荧光检测Nef对SERINC5的降解 | 第45-46页 |
3.3.4 HIV-1病毒中Nef对SERINC5的降解 | 第46-47页 |
3.3.5 讨论与小结 | 第47-48页 |
3.4 Nef对SERINC5降解途径 | 第48-52页 |
3.4.1 筛选Nef对SERINC5降解途径 | 第48-49页 |
3.4.2 Nef对SERINC5突变体的降解 | 第49-51页 |
3.4.3 Nef与SERINC5相互作用的验证 | 第51页 |
3.4.4 讨论与小结 | 第51-52页 |
3.5 蛋白酶体途径的抑制增加了SERINC5的抗病毒能力 | 第52-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
作者简介 | 第59页 |
在学期间主要科研成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |